一种从石榴皮中提取石榴皮碱的方法技术

技术编号:5515375 阅读:352 留言:1更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种从石榴皮中提取石榴皮碱的方法。该从石榴皮中提取石榴皮碱的方法,其特殊之处在于:将酶合超声破壁处理与醇合超声浸提有效结合,从石榴皮中提取石榴皮碱。本发明专利技术的提取的石榴皮碱具有极高的医学药用价值,纯化出来的石榴皮碱可有效抑制病毒的复制,提高促兴奋性药物及天然抗病毒药物药效;本发明专利技术将酶合超声破壁处理与醇合超声浸提有效结合,既促进了石榴皮碱从细胞中释放,又增强了石榴皮碱的浸提效果;该工艺的制备过程简单、收率高,拓宽了石榴皮碱的制备途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提取石榴皮碱的工艺方法,特别涉及一种从石榴皮中提取石榴皮 碱的方法。(二)
技术介绍
石榴皮中含有以石榴皮碱、异石榴皮碱、伪石榴皮碱、甲基异石榴皮碱为主并具 有高效生物活性的生物碱类化合物,该石榴皮碱具有提高心脏兴奋性、延缓脉搏等特性。另 外研究发现,该类物质能抑制病毒复制,具有治疗病毒性疾病功效。经过专利检索,没有发 现从石榴皮中或从石榴皮提取物中分离纯化石榴皮碱的相关专利。
技术实现思路
本专利技术为了弥补现有技术的不足,提供了,该方 法以石榴皮粉末为原料,从石榴皮粉末中提取及分离石榴皮碱,为开发新的促兴奋性药物 及天然抗病毒药物提供了 一定技术支持。本专利技术是通过如下技术方案实现的,其特殊之处在于将酶合超声破壁处理与醇合 超声浸提有效结合,从石榴皮中提取石榴皮碱。本专利技术的从石榴皮中提取石榴皮碱的方法,步骤如下(1)将石榴皮粉碎,获得石榴皮粉末;(2)对步骤(1)制得的石榴皮粉末进行酶合超声破壁处理,获得悬浊液;(3)将步骤(2)制得的悬浊液过滤、洗涤、干燥,获得干固态物料;(4)对步骤(3)制得的干固态物料进行醇合超声浸提处理,获得浸提浊液;(5)将步骤(4)制得的浸提浊液离心分离,真空浓缩,获得浓缩液;(6)将步骤(5)制得的浓缩液进NKA柱,吸附、水洗、洗脱分离,获得石榴皮碱溶液;(7)将步骤(6)制得的石榴皮碱溶液真空干燥,获得石榴皮碱粉末。所述步骤(1)中的石榴皮,无霉烂,含水率12. 1 14. 6%。所述步骤(2)中的酶合超声破壁处理,步骤如下向石榴皮粉末中按质量体积比为1:4的比例加入无离子水,每升悬浊液中添加0. 6 1. 5g纤维素酶(酶活20000U/g),混合均勻,超声破壁。所述步骤(2)中的酶合超声破壁处理,条件为温度40 60°C,超声功率200 400W,破壁时间50 70分钟。所述步骤(3)中的过滤、洗涤、干燥,步骤如下用定性滤纸(孔径50 μ m)过滤悬浊液,无离子水洗涤吸附在滤纸表面的湿固态物料 3 5次,75 95°C干燥1 3小时。所述步骤(4)中的醇合超声浸提处理,步骤如下向干固态物料中按质量体积比为1:5的比例加入体积分数为95%的乙醇,每升悬浊液 中添加0. 03mol/L硫酸溶液5 15ml,混合均勻,超声浸提。所述步骤(4)中的醇合超声浸提处理,条件为温度60 90°C,超声功率400 500W,浸提时间50 80分钟。所述步骤(5)中的离心分离,真空浓缩,步骤如下3000r/min,将浸提浊液离心15 30分钟,分离液于90 95°C真空浓缩1 2小时。所述步骤(6 )中的吸附,条件为吸光度0. 325Abs,浓缩液流速1. 3 1. 5ml/min,柱温!35°C,波长350士 lnm,灵敏度 0.IAUFS。所述步骤(6)中的水洗,步骤如下对NKA柱用无离子水以1. 5 2. Oml/min的流速水洗4小时。所述步骤(6)中的洗脱分离,步骤如下对水洗后的NKA柱用体积分数为70%的乙醇溶液以2. 2 3. Oml/min的流速洗脱分离, 收集分离液。所述步骤(7)中的真空干燥,条件为 温度70 90°C,干燥时间2 3小时。上述操作方法及工艺条件如无特别说明,均采用本领域常用操作方法及工艺条 件。本专利技术的有益效果如下(1)石榴皮碱具有极高的医学药用价值,纯化出来的石榴皮碱可有效抑制病毒的复制, 提高促兴奋性药物及天然抗病毒药物药效。(2)将酶合超声破壁处理与醇合超声浸提有效结合,既促进了石榴皮碱从细胞中 释放,又增强了石榴皮碱的浸提效果。(3)该工艺的制备过程简单、收率高,拓宽了石榴皮碱的制备途径。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步阐述,但本专利技术所保护范围不限于此。实施例中的纤维素酶(酶活20000U/g)购自Sigma公司,乙醇(体积分数95%)、无水 乙醚与丙酮购自天津市河东区红岩试剂厂。实施例1将无霉烂的石榴皮(含水率12. 5%)粉碎,50目过筛;取200g石榴皮粉末按质量体积比 1:4的比例加入无离子水,每升悬浊液中添加0. 6g纤维素酶(酶活20000U/g),混合均勻, 60°C、250W超声破壁50分钟;用定性滤纸(孔径50 μ m)过滤悬浊液,无离子水洗涤吸附在 滤纸表面的湿固态物料5次,75°C干燥3小时;向干固态物料中按质量体积比为1 5的比例 加入体积分数为95%的乙醇,每升悬浊液中添加0. 03mol/L硫酸溶液5ml,混合均勻,70°C, 400W超声浸提60分钟;3000r/min离心15分钟,分离液于90°C真空浓缩1小时,获得浓缩 液;在柱温35°C、波长350士 lnm、灵敏度0. IAUFS条件下,将浓缩液以1. 3ml/min的速流进 NKA柱,当吸光度在0. 325Abs时,用无离子水以1. 5 ml/min的流速水洗4小时;对水洗后 的NKA柱用体积分数为70%的乙醇溶液以2. 4ml/min的流速洗脱分离,收集分离液;将分离 液于75°C真空干燥2小时,获得150mg石榴皮碱,经计算得,石榴皮碱得率为75mg/100g。实施例2 将无霉烂的石榴皮(含水率13. 8%)粉碎,50目过筛;取200g石榴皮粉末按质量体积比 1 4的比例加入无离子水,每升悬浊液中添加1. Og纤维素酶(酶活20000U/g),混合均勻,50°C、350W超声破壁60分钟;用定性滤纸(孔径50 μ m)过滤悬浊液,无离子水洗涤吸附在 滤纸表面的湿固态物料4次,85°C干燥2小时;向干固态物料中按质量体积比为1:5的比例 加入体积分数为95%的乙醇,每升悬浊液中添加0. 03mol/L硫酸溶液10ml,混合均勻,80°C, 500W超声浸提70分钟;3000r/min离心20分钟,分离液于95°C真空浓缩2小时,获得浓缩 液;在柱温35°C、波长350士 lnm、灵敏度0. IAUFS条件下,将浓缩液以1. 4ml/min的速流进 NKA柱,当吸光度在0. 325Abs时,用无离子水以1. 8ml/min的流速水洗4小时;对水洗后的 NKA柱用体积分数为70%的乙醇溶液以2. 6ml/min的流速洗脱分离,收集分离液;将分离液 于80°C真空干燥3小时,获得178mg石榴皮碱,经计算得,石榴皮碱得率为89mg/100g。 实施例3 将无霉烂的石榴皮(含水率14. 3%)粉碎,50目过筛;取200g石榴皮粉末按质量体积比 1:4的比例加入无离子水,每升悬浊液中添加1. 5g纤维素酶(酶活20000U/g),混合均勻, 45°C、400W超声破壁70分钟;用定性滤纸(孔径50 μ m)过滤悬浊液,无离子水洗涤吸附在 滤纸表面的湿固态物料5次,95°C干燥1小时;向干固态物料中按质量体积比为1:5的比例 加入体积分数为95%的乙醇,每升悬浊液中添加0. 03mol/L硫酸溶液15ml,混合均勻,90°C, 450W超声浸提80分钟;3000r/min离心30分钟,分离液于95°C真空浓缩2小时,获得浓缩 液;在柱温35°C、波长350士 lnm、灵敏度0. IAUFS条件下,将浓缩液以1. 5ml/min的速流进 NKA柱,当吸光度在0. 325Abs时,用无离子水以2. Oml/min的流速本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从石榴皮中提取石榴皮碱的方法,其特征在于:将酶合超声破壁处理与醇合超声浸提有效结合,从石榴皮中提取石榴皮碱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王超萍李敬龙李敬爱马玲琪栾同青邱怡筠时伟孙晋芳
申请(专利权)人:山东轻工业学院山东豪利生物工程科技有限公司
类型:发明
国别省市:88[中国|济南]

网友询问留言 已有1条评论
  • 来自[山东省济南市联通] 2014年12月08日 11:10
    石榴皮为石榴科植物石榴的果皮秋季石榴果实成熟顶端开裂时采摘除去种子及隔瓤切瓣晒干或微火烘干干燥的果皮呈不规则形或半圆形的碎片状厚2~3毫米外表面暗红色或棕红色粗糙具白色小凸点顶端具残存的宿萼基部有果柄内面鲜黄色或棕黄色并有隆起呈网状的果蒂残痕质脆而坚易折断气微弱味涩以皮厚实色红褐者为佳
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