制备基于功能两亲分子或者大分子的纳米颗粒的方法和其用途技术

本发明专利技术涉及任选地在至少一种共类脂存在下，制备基于功能两亲分子或者大分子的纳米颗粒的方法，其可以包封治疗剂，特别为抗肿瘤剂，和其用于治疗剂，特别地抗肿瘤剂的运送或者载体化的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备基于功能两亲分子或者大分子的纳米颗粒的方法和其用途本专利技术涉及制备基于功能两亲分子或者大分子的纳米颗粒的方法和其用于治疗 剂(特别地抗肿瘤剂)的运送或者载体化(vectorisation)的用途。在抗肿瘤剂中，顺钼为广泛使用的抗肿瘤剂，特别地用于治疗实体瘤。然而，由于 其毒性以及出现获得抗药性，它的使用受到限制。为了克服这些缺点，现有技术已经提出不同配制剂例如专利US5178876描述了 用于在脂质体中封装的疏水络合物形式的钼衍生物。专利US 6001817描述了包含顺钼的组合物和包含至少一种核苷或者脱氧核苷的 载体(vecteur)的组合物。专利US 7908160涉及与配体连接的顺钼衍生物，其活性根据与配体的结合是可 逆的。申请WO 01/32139描述了在亲脂性纳米颗粒中封装的顺钼的组合物，所述纳米颗 粒通过重复的加热和冻结周期、基于带负电荷的天然脂类(特别地二油基磷脂酰丝氨酸) 获得。在该申请中指出，在水中顺钼形成具有比不带电荷的物种更高的溶解度的带正电荷 的聚集体，这可以使它们与带负电荷的类脂膜相互作用和使顺钼聚集体周围的类指膜的重 新组织。然而，仍然需要解决与治疗剂(特别地抗肿瘤剂)的载体化有关的问题。特别地，寻求一种方法，该方法可以将治疗剂(特别地顺钼和/或它的衍生物)以 具有高活性地快速地运送至肿瘤细胞内部，同时保护健康细胞，即降低神经毒性、肾毒性、 听觉毒性、消化毒性等等，同时限制对这种治疗剂的抗药性出现的现象。还设法提供在足够的时间中具有足够稳定性的载体以避免过早释放治疗剂和与 在生物培养基中游离治疗剂的存在有关的缺点，特别地在活性损失和毒性方面。现在已经发现使用由功能两亲分子(compos6amphiphile fonctionnel)或者大分 子形成的纳米颗粒可以获得治疗剂的有效并且快速的细胞内递送并且显示出改善的稳定 性性能，特别地在37°C时，这可以获得所述治疗剂随着时间延长的载体化。“治疗剂”表示例如用于(M或者D病状的预防或治疗或者生物功能的恢复 的天然或者合成的分子，特别地在动物中，包括人类，或者在孤立的细胞上，除了核酸或者 其碎片外。这种分子可以例如选自药物的活性成分，特别地选自抗肿瘤剂，如-钼络合物，其中特别地可以提到顺钼、卡钼、奥沙利钼(oxaliplatine)、奈达钼、 洛钼(Iobaplatine)等等。或者-能够与钼络合物连接的钌，或者-不含钼的基于钌II和/或III、钛的无机络合物，例如二氯化二茂钛，或者镓，例如 镓盐，如硝酸镓、氯化镓、KP46，或者-铁的衍生物，如ferrocenium盐、包含铁的核苷类似物、包含基于的吡啶基-五齿 配体(ligands pyridyl-pentadentate)的铁(II )络合物，或者-钴的衍生物，如六羰基_二钴络合物，炔-钴络合物，包含氮芥配体的Co (III)络 合物，或者-金的衍生物，如Auranofin、金(I )、( III)和(III)络合物、硫代葡糖金等等。有利地，由式(I )的功能两亲分子或者大分子形成的纳米颗粒用于封装这些化 合物并且确保它们在细胞内的递送的用途可以限制对这些化合物的抗药性的现象。钼的络合物，特别地顺钼，是用于本专利技术目的的优选治疗剂。基于钌II和/或III的无机络合物可以是例如被取名为NAMI-A、RAPTA-C, KP1019 的络合物。这种不含钼的络合物描述在Ott I.和GustR.的Arch. Pharm. Chem. Life Sci. 2007,340,117-126 ；Reedijk J. ,CurrOpin Chem Biol. ,1999,3,236-40 ；Haimei Chen 等，J.Am· Chem. Soc. ,2003,125,173-186 中。包含铁的核苷类似物描述在Schlawe D.等，Angew. Chem. Int. Ed.，2004， 1731-1734)。根据第一方面，本专利技术因此涉及用于封装治疗剂，优选地抗肿瘤剂的方法，其包括 这样的步骤，该步骤在于a)制备至少一种式(I )的功能两亲化合物 其中-X表示氧或者硫原子或者亚甲基，-B表示嘌呤碱或者嘧啶碱，如尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶、次黄嘌 呤或者它们的衍生物，或者非天然的单或者双环的杂环碱，其每个环包含4-7个链节，其任 选地被取代；-L1和L2，相同或者不同的，表示氢、氧羰基-O-C (0) _、硫代氨基甲酸酯基 团-0-C(S)-NH-、碳酸酯基团-0-C(0)-0-、氨基甲酸酯基团-0-C(0)-NH-、氧原子、磷酸酯基 团、膦酸酯基团或者包含1-4个氮原子的杂芳基，该杂芳基未被取代或者被直链或支链的， 饱和或者不饱和的C2-C3tl烃链取代。或者，L1和L2 —起形成下式的缩醛基(goupement cetal) 或者L1或者L2表示氢，另一个表示羟基或者包含1-4个氮原子的杂芳基，该杂芳 基未被取代或者被直链或支链的C2-C3tl烷基链取代；-R1和R2，相同的或者不同的，表示-饱和或者部分不饱和的直链或支链的C2-C3tl，优选地C6-C25,特别地C8-C25烃链， 其任选地完全地或者部分地氟化，其未被取代或在链端的碳上被氟原子或者被苄基酯或醚 或者萘基酯或醚取代，或者- 二酰基链，其中每个酰基链是C2-C3tl链，或者-甘油二酯(diaCylglyC6rol)、鞘氨醇或者神经酰胺基团，或者-当L1或L2表示氢，另一个表示羟基或者包含1-4个氮原子的杂芳基时，R1和R2 不存在；-R3 表示-羟基、氨基、磷酸酯基团、膦酸酯基团、磷脂酰胆碱基团，0-烷基磷脂酰胆碱基 团、硫代磷酸酯基团、磷鐺、NH2-R4, NHR4R5或NR4R5R6其中R4、R5和R6,相同的或者不同的，表 示氢原子或者直链或支链的C1-C5烷基链或者羟烷基链，或者-直链或支链的C2-C3tl烷基链，其任选地被羟基取代，或者-环糊精残基，或者-残基 其中V 表示-0-、-S-或-NH-键，R7 表示 H 或 CH3,和 η = 1-500，或-(CH2)n-V-R8 基团，其中 R8 表示 C2-C3tl 烷基，和 η = 1-500，或-包含1-4个氮原子的杂芳基，其未被取代或者被以下基团取代=C2-C3tl烷基或 (CH2)m-O-(CH2)p-R9基团，其中m = 1-6和ρ = 0-10和R9表示包含5_7个碳原子的环状缩 醛基团，其未被取代或者被至少一个直链或支链WC2-C3tl烷基或者被留醇残基取代，或者-R3通过共价键与另一相同或者不同的式(I )化合物的另一相同或者不同的取 代基R3连接，以形成呈二聚物形式的式(I )化合物，禾口-治疗剂，优选地抗肿瘤剂的混合物，b)使所述混合物经受重复的加热和冻结周期，以便获得包含所述治疗剂的纳米颗 粒，和c)回收如此获得的包含所述治疗剂的纳米颗粒。有利地，已经发现，构成式(I )化合物的分子和/或大分子结构可以与治疗剂 形成稳定的纳米颗粒，所述式(I )化合物包含至少一种由取代基B表示的治疗剂的配体 (核苷碱基(nuclSobase)、核苷、修饰核苷、核苷酸、低聚核苷酸、杂环等等)并具有两亲特 征，这是由于存在至少本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于封装治疗剂方法，其包括这样的步骤，该步骤在于：ａ）制备至少一种式（Ⅰ）的功能两亲化合物和治疗剂，优选抗肿瘤剂的混合物＊＊＊（Ⅰ）其中－Ｘ表示氧或者硫原子或者亚甲基，－Ｂ表示嘌呤碱或者嘧啶碱，如尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶、次黄嘌呤或者它们的衍生物，或者非天然的单或者双环的杂环碱，其每个环包含４－７个链节，其任选地被取代；－Ｌ↓［１］和Ｌ↓［２］，相同或者不同的，表示氢、氧羰基－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、硫代氨基甲酸酯基团－Ｏ－Ｃ（Ｓ）－ＮＨ－、碳酸酯基团－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－式（Ⅰ）化合物的另一相同或者不同的取代基Ｒ↓［３］连接，以形成呈二聚物形式的式（Ⅰ）化合物，ｂ）使所述混合物经受重复的加热和冻结周期，以便获得包含所述治疗剂的纳米颗粒，和ｃ）回收如此获得的包含所述治疗剂的纳米颗粒。Ｏ－、氨基甲酸酯基团－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－、氧原子、磷酸酯基团、膦酸酯基团或者包含１－４个氮原子的杂芳基，该杂芳基未被取代或者被直链或支链的，饱和或者不饱和的Ｃ↓［２］－Ｃ↓［３０］烃链取代，或者，Ｌ↓［１］和Ｌ↓［２］一起形成下式的缩醛基＊＊＊或者，Ｌ↓［１］或Ｌ↓［２］表示氢，另一个表示羟基或者包含１－４个氮原子的杂芳基，该杂芳基未被取代或者被直链或支链的Ｃ↓［２］－Ｃ↓［３０］烷基链取代；－Ｒ↓［１］和Ｒ↓［２］，相同的或者不同的，表示：－饱和或者部分不饱和的直链或支链的Ｃ↓［２］－Ｃ↓［３０］，优选地Ｃ↓［６］－Ｃ↓［２５］，特别地Ｃ↓［８］－Ｃ↓［２５］烃链，其任选地完全地或者部分地氟化，其未被取代或在链端的碳上被氟原子或者被苄基酯或醚或者萘基酯或醚取代，或者－二酰基链，其中每个酰基链是Ｃ↓［２］－Ｃ↓［３０］链，或者－甘油二酯、鞘氨醇或者神经酰胺基团，或者－当Ｌ↓［１］或Ｌ↓［２］表示氢，另一个表示羟基或者包含１－４个氮原子的杂芳基时，Ｒ↓［１］和Ｒ↓［２］不存在；－Ｒ↓［３］表示：－羟基、氨基、磷酸酯基团、膦酸酯基团、磷脂酰胆碱基团，Ｏ－烷基磷脂酰胆碱基团、硫代磷酸酯基团、磷鎓、ＮＨ↓［２］－Ｒ↓［４］、ＮＨＲ↓［４］Ｒ↓［５］或ＮＲ↓［４］Ｒ↓［５］Ｒ↓［６］其中Ｒ↓［４］、Ｒ↓［５］和Ｒ↓［６］，相同的或者不同的，表示氢原子或者直链或支链的Ｃ１－Ｃ５烷基链或者羟烷基链，或者－直链或支链的Ｃ↓［２］－Ｃ↓［３０］烷基链，其任选地被羟基取代，或者－环糊精残基，或者－残基Ｈ－（－ＣＨ↓［２］－＊－）↓［ｎ］－Ｈ其中Ｖ表...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：P巴塞莱迈，M坎普洛，N坎平斯，B乔弗特，F布耶，
申请(专利权)人：维克托谢阁兰波尔多第二大学，勃艮第大学，地中海大学，
类型：发明
国别省市：FR[法国]