生物活性化合物的再生方法技术

本发明专利技术涉及一种对来源于蔬果材料的生物活性化合物进行分离的方法。本发明专利技术还涉及一种从蔬果材料中提取生物活性化合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种对从蔬果材料获得的生物活性化合物进行分离的方法。本专利技术同 样涉及一种从蔬果材料提取生物活性化合物的方法。
技术介绍
植物和蔬果物质含有一些在人体内具有生物活性的化合物，这些化合物能够提供 有益的生理效应，包括降低发生癌症、心脏疾病和关节炎的风险。在大量的植物和蔬果原料中都可以找到一些生物活性化合物。例如，柑橘类水果 所含有的生物活性化合物可以包括在两大类中柠檬苦素类化合物和黄酮类化合物。柠檬苦素类化合物属于三萜类化合物，通常存在于柑橘类水果中。柠檬苦素类化 合物可以以苷元的形式存在，或者链接于一个葡萄糖分子(葡萄糖苷)。最近发现，柠檬苦 素类葡萄糖苷在动物体内具有强大的抗癌性能。黄酮类化合物是一组苯并吡喃衍生物，广泛存在于植物中。典型地，黄酮类化合物 是由一个苯环并上一个含氧原子的六元杂环组成的。许多黄酮类化合物也可以以糖苷的形 式存在。在柑橘类水果中，最主要的黄酮类化合物是黄烷酮、芸香柚皮苷以及橘皮苷(橘子 中)和柚皮苷(柚子中)。这些化合物能够降低高血脂个体的血液胆固醇水平。柑橘中的黄酮类化合物同样包括多甲氧基黄酮。这组化合物以甲氧基取代黄酮为 代表，并且只存在于柑橘中。多甲氧基黄酮具有广泛的生理效应，包括非常高的抗氧化能 力，这提示了人们研究其作为有效的抗癌剂和抗炎剂的潜在用途。多酚类化合物，如柑橘的柠檬苦素类化合物和黄酮类化合物，与其在能够提取果 汁的内果皮中的浓度相比，其在果皮组织中具有极高的浓度。这些化合物在果皮组织中具 有较高的浓度，有助于形成植物抵御细菌、真菌、酵母菌和昆虫的保护机制的基础。柑橘皮是苦的，这通常是因为柠檬苦素类化合物以其苷元形式存在，而榨汁操作 中除去的果皮通常会用石灰水处理、并通过压榨、脱水、制粒，用作原料进给。最近，使用一些设备从柑橘类水果的果皮中提取水溶性化合物的柑橘加工行业已 经在商业实践中兴起。所得到的稀释的水提取物(“果汁”)是苦的，通过流经一个合成的 聚合物吸附剂进行净化(或部分净化)后，果汁可脱去苦味。这样，被聚合物吸附了的苦素 能够与未被聚合物吸附的天然的糖类、酸性物质和一些风味化合物分离开。然而，大多数的 柠檬苦素类化合物和黄酮类化合物同样可以与这些苦素一起被聚合物优先吸附。使用苛性 钠溶液对聚合物进行处理，可以使这些化合物解吸附，从而使聚合物再生。然而，这种处理 同样会破坏这些生物活性化合物，与没用的苛性钠溶液一起作为废液排走。国际专利申请PCT/AU01/01113(W0 02/20112)已经公开了一种从柑橘类水果中 提取生物活性化合物的方法。在该方法中，原始的柑橘提取物流经一个聚苯乙烯一二乙烯 基苯聚合物，原料中的生物活性化合物会吸附在聚合物上。随后通过醇一水混合物的连续 梯度洗脱，将这些生物活性化合物从脱苦味聚合物吸附剂上洗脱下来。由此可以从聚合物 吸附剂上收集到三种不同的醇提取物，分别含有柠檬苦素类葡萄糖苷、黄烷酮糖苷和多甲氧基黄酮。虽然这种方法能够从吸附剂聚合物中回收有价值的生物活性化合物，但是洗脱馏 分中的生物活性化合物可能会发生混合，导致不同的生物活性化合物之间，特别是柠檬苦 素葡萄糖苷与黄烷酮糖苷之间，没有完全分离开。这会引致较低的纯度，令配方困难。解决这些问题中的部分或全部，并提供一种改进的方法用以从蔬果材料，如柑橘 类水果中获得生物活性化合物，成为一种迫切的需要。
技术实现思路
本专利技术一方面涉及一种选择性分离生物活性化合物的方法，该方法包括以下步 骤(a)使若干种生物活性化合物与一种聚合物吸附剂接触，其条件是至少一种生物 活性化合物吸附在该吸附剂上，而至少一种生物活性化合物不吸附在该吸附剂上；以及(b)收集含有至少一种未被该吸附剂吸附的生物活性化合物的溶液。本专利技术另一方面涉及一种纯化生物活性化合物的方法，包括使生物活性化合物与 一种离子交换树脂接触的步骤，其条件是生物活性化合物与该树脂之间发生离子相互作 用，从而使生物活性化合物吸附在该树脂上。本专利技术再一方面还涉及一种从蔬果材料中选择性提取生物活性化合物的方法，该 方法包括使蔬果材料与一种溶剂接触的步骤，其条件是从蔬果材料中提取至少一种水溶性 的生物活性化合物，由此提供一种含有该水溶性生物活性化合物的提取物以及含有至少一 种水不溶性生物活性化合物的蔬果残渣。本专利技术的又一方面是提供由上述方法制得的生物活性化合物。本专利技术的再一方面是提供一种混合物，该混合物包括纯度在10%、50%或70%以 上的柠檬苦素糖苷。附图说明图1是从橙皮中获得的一种典型原始提取物的HPLC色谱图，说明了其所含的化合 物。图2是橙皮提取物流经本专利技术的一个实施例所述的丙烯酸类聚合物吸附剂后，所 收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有糖类和有机酸类化合物。图3是所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有柠檬苦素葡萄糖苷 (LG)。图4是所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有柠檬苦素葡萄糖苷、 相关的柠檬苦素、诺米林葡萄糖苷和黄柏酮葡萄糖苷。图5是所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有黄酮类橙皮苷和芸香 柚皮苷。图6是所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有黄酮类橙皮苷、芸香 柚皮苷和新枳属苷。图7是含有柠檬苦素类葡萄糖苷的溶液流经本专利技术的另一个实施例所述的阴离 子交换树脂后，所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其并不含有柠檬苦素类葡萄糖苷。图8是用一种盐溶液将阴离子交换树脂上的柠檬苦素类葡萄糖苷置换出来后，所 收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有柠檬苦素类葡萄糖苷。图9是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，从丙烯酸类聚合物吸附剂(柱A)洗 脱得到的橙皮提取物(OPE)馏分的HPLC色谱图，说明其含有柠檬苦素类葡萄糖苷。图10是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，从丙烯酸类聚合物吸附剂(柱A) 洗脱得到的各个OPE馏分中，所获得的不同柠檬苦素类葡萄糖苷的相对含量曲线图。图11是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，采用40%的乙醇溶液对丙烯酸类 聚合物吸附剂(柱A)进行洗脱后，所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱图，说明其含有黄 酮类化合物。图12是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，从丙烯酸类聚合物吸附剂(柱A) 解吸附后获得的各个洗脱液馏分中，不同黄酮类化合物的相对含量曲线图。图13是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，从聚苯乙烯一二乙烯基苯聚合物 吸附剂(柱B)洗脱下一个OPE馏分后，所得到的残留果汁馏分的HPLC色谱图，说明其并不 含有黄酮类化合物和柠檬苦素类葡萄糖苷。图14是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，采用30%的乙醇溶液对聚苯乙 烯一二乙烯基苯聚合物吸附剂(柱B)进行洗脱后，所收集的一个洗脱液馏分的HPLC色谱 图，说明其含有柠檬苦素类葡萄糖苷化合物。图15是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，从聚苯乙烯一二乙烯基苯聚合物 吸附剂(柱B)解吸附后获得的各个洗脱液馏分中，不同的柠檬苦素类葡萄糖苷化合物的相 对含量曲线图。图16是在本专利技术的一个实施例所述的方法中，采用0. 5M的氯化钠溶液对一个弱 碱性阴离子交换树脂(柱C)进行洗脱后，所收集的一个洗脱液的HPLC色谱图，说明其含有柠檬苦素类葡萄糖苷。图17是在本专利技术的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物活性化合物的分离方法，该方法包括以下步骤：（ａ）使若干种生物活性化合物与一种聚合物吸附剂接触，其条件是至少一种生物活性化合物吸附在该吸附剂上，而至少一种生物活性化合物不吸附在该吸附剂上；以及（ｂ）收集含有至少一种未被该吸附剂吸附的生物活性化合物的溶液。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒂姆朗，韦恩辛普金斯，
申请(专利权)人：朗氏科技有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]