用于检测ＩＬ－１６生物活性、检测对ＩＬ－１６生物活性的调节以及诊断ＩＬ－１６相关疾病存在情况和／或易感性的方法，包括测量和比较真核细胞所产生的ＲＡＮＴＥＳ代表物水平，其中所述真核细胞例如为ＣＤ４↑［＋］和ＣＤ９↑［＋］细胞系、外周血单核细胞、ＨｕＴ－７８细胞和／或ＴＨＰ－１细胞。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于检测IL-16的生物活性及检测对IL-16生物活性 的调节的方法。此外，本专利技术涉及直接诊断IL-16相关疾病存在和/ 或易感性的方法。
技术介绍
白介素-16 (IL-16; SEQ ID NO: 3)是一种诱导T淋巴细胞、单核 细胞、嗜酸性粒细胞和树突状细胞的正趋化作用的促炎性细胞因子 (67 J. Leukocyte Biol. 757 (2000))。在应答IL-16的真核细胞中，IL-16 刺激物还增加IL-lb表达、增加IL-6表达和增加IL-15表达(67 J. Leukocyte Biol. 757 (2000》。IL-16肽链单体是通过胱天蛋白酶(caspase)-3介导的对一种更大 的14 kDa前体分子的蛋白水解加工而形成(273 J. Biol. Chem. 1144 (1998))。 IL-16单体形成四聚体肽链复合物。这些四聚体IL-16复合 物被认为是IL-16的生物活性形式(67 J. Leukocyte Biol. 757 (2000))。 产生IL-16的真核细胞包括表达CD4或CD8的细胞，如T细胞、月巴 大细胞、嗜酸性粒细胞、树突状细胞、上皮细胞、成纤维细胞以及 小脑的细胞(67 J. Leukocyte Biol. 757 (2000))。应答IL-16的真核细胞 表达CD4和CD9肽链，但对IL-16的应答也可能不依赖这些肽链(参 见例如164 J. Immunol. 4429 (2000))。有报告指出，IL-16在如下疾病中发挥重要作用，如哮喘、特应 性皮炎、类风湿性关节炎等等(参见例如162 Am. J. Respir. Crit. Care Med. 105 (2000); 109 J. Allergy Clin. Immunol. 681 (2002); 31 J.Rheumatol. 35 (2004))。例如，在人类患者中，IL-16已被证明负责诱 集哮喘诱导细胞至肺部，并在触发患者的哮喘应答中发挥关键作用 (162 Am. J. Respir. Crit. Care Med. 105 (2000))。显然，对激活或抑制 IL-16的分子的检测和鉴定的能力，是开发有效地治疗IL-16介导疾 病的方法的关键。因此，需要开发用于检测IL-16的生物活性、IL-16生物活性的 激活物和IL-16生物活性的抑制物的新方法。附图简述附图说明图1图示，与对照比较，IL-16生物活性降低外周血单核细胞 (PBMC)的RANTES细胞因子分泌。图2图示，与对照比较，IL-16生物活性降低HuT-78细胞的 RANTES细胞因子分泌。图3显示，与对照比4支，IL-16生物活性的抑制物增加PBMC的 RANTES细胞因子分泌。专利技术概述本专利技术的一方面是检测样本中IL-16生物活性的方法，其包括下 述步骤向被培养基包围着且应答IL-16生物活性的第一真核细胞群 提供第一测试样本；向被培养基包围着且应答IL-16生物活性的第二 真核细胞群提供阴性对照样本；测量由第 一和第二真核细胞群产生 的RANTES代表物(proxy)的量；且比较由第一和第二真核细胞群产 生的RANTES代表物的量，其中，相对于第二真核细胞群产生的 RANTES代表物水平而言，由第一真核细胞群产生的RANTES代表 物的量减少则表明在测试样本中^^测到IL-16生物活性。本专利技术的另一方面是^r测样本中增强IL-16生物活性的分子的方 法，其包括下述步骤向被培养基包围着且应答IL-16生物活性的第 一真核细胞群提供第一测试样本；向被培养基包围着且应答IL-16生6物活性的第二真核细胞群提供含有生物活性IL-16的阳性对照样本； 测量由第一和第二真核细胞群产生的RANTES代表物的量；并且比 较由第一和第二真核细胞群产生的RANTES代表物的量，其中，相 对第二真核细胞群产生的RANTES代表物水平而言，由第一真核细 胞群产生的RANTES代表物的量较少则表明测试样本中存在增强IL-16 生物活性的分子。检测样本中降低IL-16生物活性的分子的方法，其包括下述步 骤向被培养基包围着且应答IL-16生物活性的第一真核细胞群提供 第一测试样本；向被培养基包围着且应答IL-16生物活性的第二真核 细胞群提供含有生物活性IL-16的阳性对照样本；测量由第一和第二 真核细胞群产生的RANTES代表物的量；并且比较由第一和第二真 核细胞群产生的RANTES代表物的量，其中，相对第二真核细胞群 产生的RANTES代表物水平而言，由第一真核细胞群产生的 RANTES代表物的量增加则表明测试样本中存在降低IL-16生物活性 的分子。本专利技术的另一方面是诊断受试者中IL-16相关疾病存在或易感性 的方法，其包括下述步骤提供源自受试者的真核细胞样本；测量 由该真核细胞样本产生的RANTES代表物的量；将该样本产生的 RANTES代表物的量与参考标准(即来自无IL-16相关疾病或不易感 IL-16相关疾病的受试者的细胞)作比较，其中，相对于标准品产生的 RANTES代表物水平而言，由受试者样本产生的RANTES代表物的 量增加则表明存在或易感IL-16相关疾病。专利技术详述在本说明书中引用的所有出版物，包括但不限于专利和专利申 请，在此引入作为参考，如同全文叙述一样。除非另有明确规定，否则本文和权利要求书中所用的单数形式 "一"、"和，，以及"该"或"所述"包括了其复数形式。例如，提到的7"一个细胞"是指一个或一个以上的细胞，且包括本领域技术人员熟知 的等同物。除非另有规定，否则用于本文的所有科技术语具有本专利技术所属 领域的一般技术人员通常理解的相同涵义。虽然，在实施或检验本 专利技术时，可以使用与本文所述类似或等同的任何组合物和方法，但 本文所述是示范性的组合物和方法。术语"抗体"是指免疫球蛋白或抗体分子，包括多克隆抗体、单 克隆抗体(包括鼠、人、人源化和嵌合性单克隆抗体)和抗体的片段、 部分或变体。抗体是由浆细胞组成性表达和分泌的分泌蛋白。抗体 还可以由永生化的浆细胞产生，其中浆细胞通过诸如产生杂交瘤的 标准方法或将抗体重链和/或轻链基因转染入永生化B细胞(如骨髓瘤 细胞)或其他细胞类型(诸如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、植物细胞和昆 虫细月包)而7:K生4匕。术语"生物活性"是指生物系统对分子的反应。这类生物系统可以 是例如细胞、可复制的核酸(如病毒或质粒)、细胞或可复制核酸的分 离成分、或掺入一种或多种这些成分的体外系统。术语"CD4"是指一种肽链，其与SEQ ID NO: 1的1至433位残 基至少有50°/。的同一性，并且对IL-16有应答。两种肽《连间的同一性 可利用Vector NTI v.9.0.0 (Invitrogen Corp" Carslbad, CA)的AlignX才莫 块的默认设置进行氨基酸序列比对而确定。AlignX使用CLUSTALW 算法进行成对的氨基酸序列比对。"CD4，，是"抗原决定簇4 (Cluster of Determinant antigen 4)"的首字母缩略词。术语"CD9"是指一种肽链，其与SEQ ID NO: 2的1至228位残 基至少有90%的同一性本文档来自技高网...
【技术保护点】
检测样本中ＩＬ－１６生物活性的方法，包括以下步骤：ａ）向被培养基包围着且应答ＩＬ－１６生物活性的第一真核细胞群提供第一测试样本； ｂ）向被培养基包围着且应答ＩＬ－１６生物活性的第二真核细胞群提供阴性对照样本； ｃ）测量由第一和第 二真核细胞群产生的ＲＡＮＴＥＳ代表物的量；和 ｄ）比较由第一和第二真核细胞群产生的ＲＡＮＴＥＳ代表物的量，其中，相对于第二真核细胞群产生的ＲＡＮＴＥＳ代表物水平而言，由第一真核细胞群产生的ＲＡＮＴＥＳ代表物的量减少则表明在测试样本中检 测到ＩＬ－１６生物活性。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：WG格拉斯，
申请(专利权)人：森托科尔公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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