抗Ａβ（２０－４２）球聚体的人源化抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及结合蛋白以及特别是可例如在阿尔茨海默病和相关病症的诊断、治疗和预防中使用的人源化抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及可用于例如诊断、治疗和预防阿尔茨海默病和有关病症的抗体。背景信息阿尔茨海默病(AD)是一种神经变性疾病，具有如下特点进行性丧失认知能力 和包含淀粉样蛋白沉积物的特有的神经病理学特征、神经纤维缠结以及在脑的某些区域 中神经元丢失(参见 Hardy 和 Selkoe (Science297, 353 (2002) ；Mattson Nature 431, 7004(2004)。淀粉样蛋白沉积物的主成分是淀粉样蛋白肽(A0)，具有42个氨基酸长 度类型A0 (1-42)是最主要的。具体而言，淀粉样蛋白0 (1-42)蛋白是一种具有42个氨基酸的多肽，其来源于淀 粉样蛋白前体蛋白(APP)的蛋白酶解加工。除人变体之外，其还包括存在于非人生物(具 体而言其他哺乳动物，特别是大鼠)中的淀粉样蛋白0 (1-42)蛋白的同种型。该蛋白由于 在水相环境中倾向于聚合，因此可以非常不同的分子形式存在。已证明不溶蛋白的沉积与痴呆病症如阿尔茨海默病的发生或进展的简单相关是 不可信的(Terry 等，Ann. Neurol. 30. 572-580 (1991) ；Dickson 等，Neurobiol. Aging 16， 285-298(1995))。与此相反，突触和认知感觉的丧失似乎与A 0 (1_42)的可溶形式更相关 (Lue 等，Am. J. Pathol. 155，853-862 (1999) ；McLean 等，Ann. Neurol. 46，860-866 (1999))。尽管在过去已出现抗A0 (1-42)的多克隆和单克隆抗体，但没有一种被证明产生 期望的疗效并且还没有在动物和/或人中引起严重的副作用。例如，由每周一次持续5个 月接受针对N-端的抗-A0 (1-42)抗体的非常老的APP23小鼠的临床前研究引起的被动免 疫显示了治疗相关的副作用。具体而言，与盐水处理的小鼠相比，这些小鼠显示在微出血 (microhaemorrhages)量和严重程度上的增加(Pfeifer 等，Science 2002298:1379)。还 针对非常老(> 24个月)的Tg2576和PDAPP小鼠描述了相似的出血增加(ffilcock等，J Neuroscience 2003,23 3745-51 ；Racke 等，J Neuroscience 2005,25 629-636) 。 种小鼠中，抗-A3 (1-42)注射导致了明显增加的微出血。因此，对于开发预防或减缓疾病 进展而不诱导针对人体的消极效应和可能的致死效应的生物制剂而言，存在着巨大的、未 满足的治疗需求。鉴于一般人群渐增的寿命，并且随着寿命的增加，每年诊断有阿尔茨海默 病或相关病症的患者数量也连带增加，因此这样的需求格外明显。此外，这样的抗体可供在 经历阿尔茨海默病症状的患者(目前仅可通过尸体解剖来确诊)中正确诊断阿尔茨海默病 之用。此外，这样的抗体可供阐明引起该使人虚弱的疾病的蛋白和其他生物因素的生物学 特性之用。所有在本文中引用的专利和出版物以其全文在此并入作为参考。专利技术概述本专利技术涉及能结合存在于阿尔茨海默病患者脑中的可溶性寡聚体例如 Αβ (20-42)球聚体的结合蛋白，尤其是人源化抗体(如对于带有野生型IgGl恒定区的人源 化7C6抗体，那些在此可交换地称为“人源化7C6”或“7C6hum7wt”的抗体，以及对于带有突 变的IgGl恒定区的人源化7C6抗体，那些在此称为“7C6hum7mut”的抗体，和对于带有野生 型IgGl恒定区的人源化7C6抗体，那些在此可交换地称为“人源化5F7”和“5F7hum8”的抗 体，以及那些在此称为“5F7hum8mut”的抗体)。应当指出本专利技术的抗体还可与除在此描述 的Αβ球聚体以外的Αβ形式起反应(即与之结合)。这些抗原可以是或可以不是寡聚化 或球聚化的。因此，本专利技术的抗体结合的抗原包括任何包含与本专利技术的抗体起反应的球聚 体表位的A β形式。这样的A β形式包括截短和未截短的A β (X-Y)形式(具有在此定义的 X 和 Y)，例如 A β (20-42), A β (20-40), A β (12-42), A β (12-40), A β (1-42)禾口 A β (1-40) 形式，前提是所述形式包含球聚体表位。此外，本专利技术还提供了生产和使用这些结合蛋白或 其部分的方法。具体而言，本专利技术包括包含结合淀粉样蛋白-β (20-42)球聚体的抗原结合域的 结合蛋白，所述抗原结合域包含至少一个包含选自如下的氨基酸序列的CDR CDR-VH1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID NO. :5)，其中父1是丁或S;父2是？或Y;X3 是 Y 或 A ；X4 是 I 或 M ；和父5是!1或 SCDR-VH2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17 (SEQ ID NO. 6)，其中父1是] 或S;X2 是 I ；X3 是 G 或 H ；X4 是 P 或 N ；X5 是 G 或 R ；X6 是 S 或 G ；X7 是 G 或 T ；X8 是 N 或 I ；X9 是 T 或 F ；X10 是 Y ；X11 是 Y 或 L ；X12 是 N 或 D ；X13 是 E 或 S ；X14 是 M 或 V ；X15 是 F 或 K ；X16 是 K 或 G ；和X17是D或不存在CDR-VHS-X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-XicTX11-X12-X13(SEQ ID NO. :7)，其中X1 是 A 或 G ；X2 是 K 或 R ；X3是S;X4 是 A 或 N ；X5 是 R 或 S ；X6 是 A 或 Y ；X7 是 A ；X8 是 W 或 M ；X9 是 F 或 D ；Xltl 是 A 或 Y ；和X11是Y或不存在CDR-VLl-X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16 (SEQ IDN0. :8)，其 中父丄是尺；X2 是 SX3 是 S 或 T ；X4 是 Q ；X5 是 S 或 T ；X6 是 V 或 L ；X7 是 V ；X8 是 Q 或 H ；X9 是 S 或 R ；X10 是 N ；X11 ^ G ；X12 是 N 或 D ；X13 是 T ；X14 是 Y ；X15 是 N 或 L ；禾口X16 是 ECDR-VI^X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEC) ID NO. :9)，其中X1 是 K ；X2 是 V ；X3 是 S ；X4 是N;X5 是 R ； X6 是 F;和X7 是 S以及CDR-VL3. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQ ID NO. 10)，其中X1 是 F ；X2 是 Q ；X3 是 G ；X4 是 S ；XjH;X6 是 V ；X7 是 P ；乂8是卩或Y;和X9 是 T。该结合蛋白对淀粉样蛋白β (20-42)球聚体具有较对至少一种选自如下的 淀粉样蛋白β肽或蛋白更大的结合亲和力淀粉样蛋白β (1-42)球聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合蛋白，包含结合淀粉样蛋白－β（２０－４２）球聚体的抗原结合域，所述抗原结合域包含至少一个包含选自如下的氨基酸序列的ＣＤＲ：　　ＣＤＲ－ＶＨ１．Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］（ＳＥＱＩＤ　ＮＯ．：５），其中：　　Ｘ↓［１］是Ｔ或Ｓ；　　Ｘ↓［２］是Ｆ或Ｙ；　　Ｘ↓［３］是Ｙ或Ａ；　　Ｘ↓［４］是Ｉ或Ｍ；和　　Ｘ↓［５］是Ｈ或Ｓ　　ＣＤＲ－ＶＨ２．　　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６Ｘ↓［４］是Ｎ；　　Ｘ↓［５］是Ｒ；　　Ｘ↓［６］是Ｆ；和　　Ｘ↓［７］是Ｓ　　以及　　ＣＤＲ－ＶＬ３．　　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：１０），其中：　　Ｘ↓［１］是Ｆ；　　Ｘ↓［２］是Ｑ；　　Ｘ↓［３］是Ｇ；　　Ｘ↓［４］是Ｓ；　　Ｘ↓［５］是Ｈ；　　Ｘ↓［６］是Ｖ；　　Ｘ↓［７］是Ｐ；　　Ｘ↓［８］是Ｐ或Ｙ；　　和Ｘ↓［９］是Ｔ　　其中所述结合蛋白对所述淀粉样蛋白β（２０－４２）球聚体具有较对至少一种选自如下的淀粉样蛋白β肽或蛋白更大的结合亲和力：淀粉样蛋白β（１－４２）球聚体、淀粉样蛋白β（１２－４２）球聚体、ｓ－淀粉样蛋白前体蛋白、淀粉样蛋白β（１－４０）单体、淀粉样蛋白β（１－４２）单体和淀粉样蛋白β（１－４２）原纤维。］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］－Ｘ↓［１４］－Ｘ↓［１５］－Ｘ↓［１６］－Ｘ↓［１７］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：６），其中：　　Ｘ↓［１］是Ｍ或Ｓ；　　Ｘ↓［２］是Ｉ；　　Ｘ↓［３］是Ｇ或Ｈ；　　Ｘ↓［４］是Ｐ或Ｎ；　　Ｘ↓［５］是Ｇ或Ｒ；　　Ｘ↓［６］是Ｓ或Ｇ；　　Ｘ↓［７］是Ｇ或Ｔ；　　Ｘ↓［８］是Ｎ或Ｉ；　　Ｘ↓［９］是Ｔ或Ｆ；　　Ｘ↓［１０］是Ｙ；　　Ｘ↓［１１］是Ｙ或Ｌ；　　Ｘ↓［１２］是Ｎ或Ｄ；　　Ｘ↓［１３］是Ｅ或Ｓ；　　Ｘ↓［１４］是Ｍ或Ｖ；　　Ｘ↓［１５］是Ｆ或Ｋ；　　Ｘ↓［１６］是Ｋ或Ｇ；和　　Ｘ↓［１７］是Ｄ或不存在　　ＣＤＲ－ＶＨ３．　　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：７），其中：...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：S巴霍恩，U埃伯特，H希伦，P凯勒，AR斯特里宾格，B拉科韦斯基，PR欣顿，VM胡安，
申请(专利权)人：雅培制药有限公司，艾博特股份有限两合公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]