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K88大肠杆菌不同血清型的PCR特异性检测和分型鉴别方法技术

技术编号:5361620 阅读:490 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及K88大肠杆菌不同血清型的检测方法。该方法是先对待测样本进行PCR特异性检测,出现750bp条带的为待测样本为K88大肠杆菌,再分别用3对特异性引物对K88大肠杆菌DNA进行PCR扩增,根据扩增产物的500bp条带判断血清型。本发明专利技术的方法不仅分型结果准确无误,且没有假阳性和相互交叉反应的发生,还具有操作简便,可同时检测多个样品,成本较低的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种K88大肠杆菌不同血清型的PCR特异性检测和分型鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:  (1)K88大肠杆菌PCR特异性检测:以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的序列为引物,对待测样本DNA模板进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,出现750bp 条带的为待测样本为K88大肠杆菌;  (2)分型鉴别:以步骤1确定为K88大肠杆菌的待测样本的DNA为模板,分别用下述3对引物进行PCR扩增:  第1对:上游引物序列如SEQ ID NO:1,下游引物序列如SEQ ID NO:3;  第2对:上游引物序列如SEQ ID NO:1,下游引物序列如SEQ ID NO:4;  第3对:上游引物序列如SEQ ID NO:1,下游引物序列如SEQ ID NO:5;  扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,根据出现500bp 条带所对应的引物来判断待测样本血清型:  由第1对引物扩增出500bp条带的,待测样本血清型为K88ab;  由第2对引物扩增出500bp条带的,待测样本血清型为K88ac;  由第3对引物扩增出500bp条带的,待测样本血清型为K88ad。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:朱国强郁磊吴圣龙包文斌朱春红羊扬王建业姚丰华朱军舒燕朱晓芳
申请(专利权)人:扬州大学
类型:发明
国别省市:32[]

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