土壤微生物数量精确测定的方法技术

本发明专利技术公开了一种土壤可培养微生物数量精确测定的方法，其步骤是：（１）土壤前处理：去除土壤样品中的植物残体和动物以及小石子，再将土壤样品混合均匀；（２）测定土壤含水量：先将铝盒放在烘箱中烘干，取出铝盒置于下部放有部分干燥硅胶的干燥器中冷却至室温，称量烘干土壤＋铝盒的重量；（３）土壤悬浮液制备：称取烘干重的新鲜土壤样品，置于经灭菌的杯中，得到土壤悬浮液；（４）土壤悬浮液稀释：用经灭菌的电动移液器稀释法土壤悬浮液依次稀释；（５）培养基配制；（６）接种与培养；（７）计数与计算。该方法操作简便、快速，测定结果精密度和准确度高、重复性好，适合于大批量土壤样品的各种可培养微生物数量的精确测定。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种土壤微生物数量精确测定的方法，其步骤是：（１）土壤前处理：去除土壤样品中的植物残体和动物以及小石子，再将土壤样品混合均匀；（２）测定土壤含水量：先将铝盒放在烘箱中于１０３℃下烘干８－１０小时，取出铝盒置于下部放有部分干燥硅胶的干燥器中冷却至室温，称量铝盒重量，取１０－２０克新鲜土壤样品放入上述烘干后的铝盒中，称量新鲜土壤＋铝盒的重量，将其放入烘箱中在１０３℃下烘干２０－２４小时，取出置于上述干燥器中冷却至室温，然后称量烘干土壤＋铝盒的重量，采样下列公式计算土壤含水量：土壤含水量％＝　新鲜土壤＋铝盒ｇ－铝盒ｇ／烘干土壤＋铝盒ｇ－铝盒ｇ′１００％；（３）土壤悬浮液制备：称取１０克烘干重的上述新鲜土壤样品，置于经灭菌的２５０－３２５毫升乐扣杯中，再加入经灭菌的直径为０．５厘米的玻璃珠５－７粒，然后加入无菌水，使加入的无菌水与土壤中水之和为９０毫升，将装有土壤悬浮液的乐扣杯置于振荡器中震荡，使土壤分散，即得到１０－１土壤悬浮液；（４）土壤悬浮液稀释：用经灭菌的电动移液器按１０倍稀释法将上述土壤悬浮液依次稀释成１０↑［－２］－１０↑［－６］土壤悬浮液；（５）培养基配制：分别配置土壤可培养细菌培养基和土壤可培养真菌培养基，将培养基在１２１℃下灭菌３０分钟，冷却至４０－５０℃后，在细菌培养基中加入真菌抑制剂，真菌培养基中加入细菌抑制剂，然后将培养基倒入培养皿中制备平板培养基；（６）接种与培养：用经灭菌的电动移液器分别取上述１０↑［－３］－１０↑［－６］土壤悬浮液０．１毫升，置于土壤可培养细菌培养基或土壤可培养真菌培养基中，每个稀释度重复３－４次，用经酒精灯火焰灭菌的刮铲将培养基表面悬浮液涂抹均匀，置于２５－３０℃下培养２－４天；（７）计数与计算：选择培养皿中生长的菌落数为２０－１００个菌落的稀释度进行计数，采用下列公式计算土壤可培养细菌或真菌：土壤可培养细菌或土壤可培养真菌（ｃｆｕ／克）＝（菌落平均数′稀释倍数′１０）／土样烘干质量；其中，“１０”为换算系数，即将０．１毫升悬土壤浮液换算为１．０毫升。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖和艾，张洪霞，谭周进，吴金水，盛荣，
申请(专利权)人：中国科学院亚热带农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]