一种利用微生物发酵法从红豆杉中提取紫杉醇的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用微生物发酵法从红豆杉中提取紫杉醇的方法，首先将红豆杉的枝叶粉碎成粉末状，然后将用酵母菌发酵好的发酵液浸泡红豆杉的枝叶粉末数天后，对浸泡液进行浓缩，喷雾干燥即得到高含量的紫杉醇干品。本发明专利技术方法，紫杉醇的提取时间短，纯度高，不污染环境。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用微生物发酵法从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于利用微生物发酵法从红豆杉里提取紫杉醇，具体包括以下步骤：（１）将红豆杉枝叶破碎呈粉末状；（２）ＬＢ培养基的配制：按配方比例分别称取下列物质：粉末状的红豆杉枝叶２８－３１ｇ、蛋白胨０．５－１．５ｇ、酵母膏１．５－２．５ｇ、琼脂粉１３－１６ｇ、ＮａＣｌ１８－１２ｇ，放入烧杯中，加入１０００ｍｌ蒸馏水并加热溶解，用ＮａＯＨ溶液或ＨＣｌ溶液调整溶液ｐＨ至７．０－７．５；然后高温灭菌、搁置斜面，在温度为２８－３２℃下，培养２４－４８小时后，转入３－４℃冰箱里保存备用；（３）将酵母菌接种到斜面培养基中，进行活化处理；（４）种子培养基：在１０００ｍｌ蒸馏水中，加入酵母膏１．５－２．５ｇ、ＭｇＳＯ４·７Ｈ↓［２］Ｏ０．１５－０．２５ｇ、柠檬酸０．４０－０．４４ｇ、ＫＨ↓［２］ＰＯ４２．５－３．５ｇ，ＮＨ４Ｃｌ　１．５－２．５ｇ、ＣａＣｌ↓［２］０．０８－０．１２ｇ、粉末状的红豆杉枝叶２８－３２ｋｇ进行混合作为种子培养基；（５）发酵培养基：在１０００ｍｌ蒸馏水中，加入酵母膏０．５－１．５ｇ、ＭｇＳＯ↓［４］·７Ｈ↓［２］Ｏ０．１５－０．２５ｇ、柠檬酸０．４０－０．４４ｇ、ＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］　０．５－１．５ｇ、ＮＨ↓［４］Ｃｌ　５．３－５．５ｇ、ＣａＣｌ↓［２］０．０８－０．１２ｇ、粉末状的红豆杉枝叶３８－４２ｇ、ＭｎＣｌ↓［２］　０．０１－０．０１２ｇ混合制得发酵培养基；（６）种子制备：取步骤（３）活化后的酵母菌适量接入到步骤（４）培养的种子培养基中进行摇床培养，培养液的温度为３０～４０℃，转速８０～１１０ｒｐｍ，培养２４～４８小时，转入二代培养基中，调节ｐＨ为７．５～９．０，３０～４０℃培养５～１２小时，制备二级种子，备用；（７）发酵培养：将发酵液装入发酵罐内，装载量为５０－８５％，将步骤（６）制备的二级种子接入其中，接种量为１０～２０％，再将粉末状的红豆杉枝叶装入其中，温度３０～４０℃，搅拌速率８０～１１０ｒｐｍ条件下进行发酵，控制发酵液的ｐＨ值为６～８，发酵４－７天；（８）将发酵好的发酵液通过离心分离，收集上层液体；（９）将收集的液体进行低温浓缩，喷雾干燥，得到高含量的紫杉醇干品。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李民生，
申请(专利权)人：李民生，
类型：发明
国别省市：34