一种叶酸偶联抗体药物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ－ＩｇＧ偶联物、其制备方法以及其在治疗肿瘤及自身免疫性疾病中的应用。ＦＯＬＡＴＥ意指叶酸（Ｆｏｌａｔｅ）或其类似物，将ＦＯＬＡＴＥ与谷胱甘肽（ＧＳＨ）通过酰胺键生成ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ；同时，对ＩｇＧ末端的氨基进行活化，或通过将ＩｇＧ还原处理为半抗体或重链抗体，这两种活化的ＩｇＧ与ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ偶联后形成ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ－ＩｇＧ。所述的ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ－ＩｇＧ偶联物在叶酸受体高表达类型的癌症患者或自身免疫性疾病患者体内，能特异性地与疾病细胞表面高表达的叶酸受体结合，然后通过ＩｇＧ激活抗体或补体系统介导细胞毒作用，并增强生物应答调节，而对于叶酸受体几乎无表达的正常细胞并不会产生细胞毒作用。这一发明专利技术提高了抗体药物和免疫增强剂的靶向性，解决了现有技术中癌症和自身免疫性疾病治疗药物对正常细胞的损害问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，具体的说，涉及一种叶酸偶联抗体药物 (FOLATE-GSH-IgG偶联物)、其制备方法以及其在治疗肿瘤及自身免疫性疾病中的应用。
技术介绍
叶酸(Folate)是1941年由米切尔(H.K.Mitchell)从菠菜中提取纯化的，由喋啶，对氨基苯甲酸和谷氨酸残基组成的一种水溶性B族维生素，其分子式为C19H19N7O6，化学 结构式如下所示权利要求1.一种FOLATE-GSH-IgG偶联物，其结构如式(I)、(II)或(III)所示2.根据权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物，其特征在于，所述的IgG为 IgGl、IgG2、IgG3 或 IgG4。3.根据权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物，其特征在于，所述的偶联物具 有式(D-(IO)之一所示的结构4.权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物的制备方法，包括如下步骤 (1)、将FOLATE与羟基琥珀酰亚胺酯(N-hydroxysuccinimide，NHS)反应生成活化 的 NHS-FOLATE ；(2)、将NHS-FOLATE与GSH反应生成FOLATE-GSH，两者通过酰胺键相连；(3)、对IgGN-末端的氨基进行活化，反应式如下所示5.权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物的制备方法，包括如下步骤(1)、将FOLATE与羟基琥珀酰亚胺酯(N-hydroxysuccinimide，NHS)反应生成活化 的 NHS-FOLATE ；(2)、将NHS-FOLATE与GSH反应生成FOLATE-GSH，两者通过酰胺键相连；(3)、以还原剂处理IgG分子，使IgG成为具有反应活性巯基(-SH)的IgG半抗体或IgG重链；通过巯基连接物对其进行活化，所述的巯基连接物选自1， 8-bis-Maleimidodiethyleneglycol (BM (PEG) 2)、BM (PEG) η PEG Crosslinkers、1， 4-bismaleimidobutane (BMB)、1, 4bismaleimidyl-2, 3-dihydroxybutane (BMDB)、 bismaleimidohexane (BMH)、Bis-Maleimidoethane (BMOE)、1, 4_Di_amine(TMEA)及其结构类似物，反应后生成如下结构的偶联物6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述方法中步骤(3)中，以弱还原 剂7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述方法中步骤(3)中，以强还原 剂1，4-Dithiothreitol(DTT)将IgG还原为重链型IgG，其反应式为8.—种药物组合物，其包含有效剂量的权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物 和药学上可接受的载体或辅料。9.权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在制备治疗肿瘤药物中的用途。10.权利要求1所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在制备治疗自身免疫性疾病药物中的 用途。全文摘要本专利技术涉及一种FOLATE-GSH-IgG偶联物、其制备方法以及其在治疗肿瘤及自身免疫性疾病中的应用。FOLATE意指叶酸(Folate)或其类似物，将FOLATE与谷胱甘肽(GSH)通过酰胺键生成FOLATE-GSH；同时，对IgG末端的氨基进行活化，或通过将IgG还原处理为半抗体或重链抗体，这两种活化的IgG与FOLATE-GSH偶联后形成FOLATE-GSH-IgG。所述的FOLATE-GSH-IgG偶联物在叶酸受体高表达类型的癌症患者或自身免疫性疾病患者体内，能特异性地与疾病细胞表面高表达的叶酸受体结合，然后通过IgG激活抗体或补体系统介导细胞毒作用，并增强生物应答调节，而对于叶酸受体几乎无表达的正常细胞并不会产生细胞毒作用。这一专利技术提高了抗体药物和免疫增强剂的靶向性，解决了现有技术中癌症和自身免疫性疾病治疗药物对正常细胞的损害问题。文档编号A61K47/48GK102008732SQ20101053435公开日2011年4月13日 申请日期2010年11月8日 优先权日2010年11月8日专利技术者刘颖 申请人:武汉华耀生物医药有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＦＯＬＡＴＥ－ＧＳＨ－ＩｇＧ偶联物，其结构如式（Ⅰ）、（Ⅱ）或（Ⅲ）所示：＊＊＊其中：ＦＯＬＡＴＥ表征叶酸或叶酸类似物，所述的叶酸类似物为Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ、Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ或Ｄｉｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ等；ＧＳＨ表征谷胱甘肽或具有游离的巯基（－ＳＨ）及氨基（－ＮＨ↓［２］）的化合物，所述的化合物选自Ｃｙｓｔｅａｍｉｎｅ，Ｃｙｓｔｅｉｎｅ等；式（Ⅰ）和式（Ⅱ）中ＩｇＧ代表动物来源的ＩｇＧ、人源ＩｇＧ、重组人源ＩｇＧ或上述ＩｇＧ的Ｆｃ段，或是经还原得到的ＩｇＧ半抗体或重链；式（Ⅲ）中ＩｇＧ代表具有反应活性巯基（－ＳＨ）的动物来源的ＩｇＧ、人源ＩｇＧ或重组人源ＩｇＧ的半抗体或ＩｇＧ重链；式（Ⅰ）中，Ｒ１选自如下的基团：＊＊＊式（Ⅱ）中，Ｒ２选自如下的基团：＊＊＊式（Ⅲ）中，Ｒ３选自如下的基团：＊＊＊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘颖，
申请(专利权)人：武汉华耀生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：83