ＦＡＭ３Ｂ基因的抑制剂和组合物及抑制方法以及脂肪肝的疗法和抑制剂的制药用途技术

本发明专利技术涉及一种抑制剂，其中，该抑制剂能够抑制ＦＡＭ３Ｂ基因的表达，以降低ＦＡＭ３Ｂ基因的表达产物的水平；或者该抑制剂能够与ＦＡＭ３Ｂ基因的表达产物结合，以降低ＦＡＭ３Ｂ基因的产物的促进脂质生成的活性。本发明专利技术还涉及一种含有所述抑制剂的抑制剂组合物、抑制ＦＡＭ３Ｂ基因的表达或抑制ＦＡＭ３Ｂ基因产物的促进脂质生成活性的方法、治疗脂肪肝的方法、以及所述抑制剂在制备用于预防和／或治疗脂肪肝的药物中的应用。本发明专利技术提供的抑制剂以及抑制剂组合物和方法为治疗脂肪肝提供了一种新的有效途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于FAM3B基因的抑制剂和抑制方法以及治疗脂肪肝的方法和该抑制 剂在制药中的应用，更确切地说，本专利技术涉及一种FAM3B基因的抑制剂、含有该抑制剂的抑 制剂组合物和抑制FAM3B基因的表达或抑制FAM3B基因产物的促进脂质生成活性的方法， 以及预防和/或治疗脂肪肝的方法和所述抑制剂在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药物 中的应用。
技术介绍
脂肪肝又称肝内脂肪变性，是指由各种原因引起的肝细胞内脂肪蓄积过多的病 变。脂肪含量超过肝重量(湿重)的5% (最高可达40%-50%)，或在组织学上超过肝实 质30%时称为脂肪肝。脂肪肝可由多种疾病和原因导致，最常见的诱因为肥胖、酒精中毒、 糖尿病，此外还包括营养失调、药物中毒、妊娠等。随着人们物质生活水平的不断提高，饮食 结构和生活方式的改变，脂肪肝的发病率逐年升高，已达到平均人口的10%，在肥胖、嗜酒 和糖尿病人群中可高达50-60%。以往认为脂肪肝为良性病变，进展缓慢。但是近年研究发 现约25%的患者发生肝脏纤维化，1.5-8%的患者发展为肝硬化。而非酒精性脂肪肝患者有 20%进展为肝硬化，其中30-40%死于肝相关性疾病，部分发生亚急性肝衰竭和肝癌。因此 脂肪肝的防治对阻止慢性肝病进展和改善预后十分重要。目前，对脂肪肝的防治尚无有效药物，在临床治疗中，仍以去除病因、积极治疗原 发病和坚持合理饮食制度为主，而药物仅起辅助作用。常用药物主要针对降血脂、肝细胞保 护等方面，缺乏直接作用于肝脏脂质沉积的有效治疗手段。因此，开拓一种治疗脂肪肝的有效途径成为迫切需要解决的问题。
技术实现思路
FAM3B因子是一种在胰腺的胰岛β细胞中特异性高表达的细胞因子。人FAM3B基 因在染色体上定位于21q22染色体，含有至少8个外显子，编码含235个氨基酸的蛋白。最 初于2002年由美国科学家克隆得到，FAM3B是一种可能在糖尿病病理生理过程中发挥作用 的新细胞因子。本专利技术人在研究糖尿病的病理过程中对FAM3B因子进行了深入的研究，意外地发 现，FAM3B因子除了可能在糖尿病病理生理过程中发挥作用以外，FAM3B基因还在肝脏中弥 漫性表达，说明FAM3B基因可能在肝脏功能调节中发挥作用。因此，本专利技术人对FAM3B基因进行了进一步的研究，使用携带FAM3B基因的腺病毒 处理野生型小鼠，可观察到肝脏发生明显的脂肪性变化，并且该肝脏切片的油红染色显示 出大量的脂肪聚积，肝脏组织中甘油三酯、胆固醇酯含量显著增加。并且肝细胞系中FAM3B 基因的过表达增加了中性脂肪在肝细胞内的聚积。由此可以看出，FAM3B因子可能参与了 脂肪肝形成的过程，因此，FAM3B基因有可能是预防和/或治疗脂肪肝的关键因素。基于上 述发现，本专利技术人完成了本专利技术。本专利技术的第一个目的是提供FAM3B基因的抑制物。本专利技术的第二个目的是提供一种含有所述抑制物的抑制剂组合物。本专利技术的第三个目的是提供一种抑制FAM3B基因的表达或抑制FAM3B基因产物的 促进脂质生成活性的方法。本专利技术的第四个目的是提供一种预防和/或治疗脂肪肝的方法。本专利技术的第五个目的是提供所述抑制剂在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药 物中的应用。为了实现本专利技术的第一个目的，本专利技术提供了一种抑制剂，其中，该抑制剂能够抑 制FAM3B基因的表达，以降低FAM3B基因的表达产物的水平；或者该抑制剂能够与FAM3B基 因的表达产物结合，以降低FAM3B基因的产物的促进脂质生成的活性，其中，所述FAM3B基 因的核苷酸序列与SEQID No 1所示的核苷酸序列具有98%以上的序列同一性。为了实现本专利技术的第二个目的，本专利技术还提供了一种抑制剂组合物，该抑制剂组 合物含有本专利技术提供的抑制剂作为活性成分。为了实现本专利技术的第三个目的，本专利技术还提供了一种抑制FAM3B基因的表达或抑 制FAM3B基因产物的促进脂质生成活性的方法，其中，该方法包括使用本专利技术提供的抑制 剂或抑制剂组合物，以降低FAM3B基因的表达产物的水平；或者使FAM3B基因的产物的促进 脂质生成的活性降低。为了实现本专利技术的第四个目的，本专利技术还提供了一种预防和/或治疗脂肪肝的方 法，其中，该方法包括抑制患者的FAM3B基因的表达，以降低FAM3B基因的表达产物的水 平；或者使FAM3B基因的产物的促进脂质生成的活性降低。为了实现本专利技术的第五个目的，本专利技术还提供了所述抑制剂在制备用于预防和/ 治疗脂肪肝的药物中的应用。本专利技术揭示了 FAM3B基因在脂肪肝形成中的重要作用，从而为预防和/或治疗脂 肪肝提供一种有效的途径。具体实施例方式本专利技术人对FAM3B基因进行了详细的研究，发现FAM3B基因的产物可能参与了脂 肪肝形成的过程；并对FAM3B基因的序列进行了研究，发现FAM3B基因的核苷酸序列与SEQ ID No 1所示的核苷酸序列的同一性可以为98%以上。基于上述发现，本专利技术提供了一种 抑制剂，其中，该抑制剂能够抑制FAM3B基因的表达，以降低FAM3B基因的表达产物的水平； 或者该抑制剂能够与FAM3B基因的表达产物结合，以降低FAM3B基因的产物的促进脂质生 成的活性，其中，所述FAM3B基因的核苷酸序列与SEQ ID Nol所示的核苷酸序列具有98% 以上的序列同一性。本专利技术中，对能够抑制FAM3B基因的表达或者能够与FAM3B基因的表达产物结合 的抑制剂的种类没有特别的限制，只要能够实现沉默FAM3B基因的表达或抑制FAM3B基因 的促进脂质生成的功能即可。例如，所述抑制剂的例子包括但不限制于小干扰核酸、反义 寡核苷酸、抗体、活性有机化合物、以及能够抑制FAM3B基因的表达或能够与FAM3B基因的 表达产物结合的其他抑制剂种类。根据本专利技术的一个方面，所述抑制剂可以为一种或多种反义寡核苷酸，反义寡核 苷酸为长度为14_30bp的单链结构，并且所述反义寡核苷酸与SEQID No 1所示的核苷酸序 列中相配对的核苷酸序列具有90%以上同一性。根据本专利技术的另一个方面，所述抑制剂可以为一种或多种抗体，所述抗体可以为 单克隆抗体或多克隆抗体，既可以是鼠源性抗体也可以是人源化抗体。从结构上来看，既 可以是单链抗体也可以是其他抗 体类似物，例如，包括但不限于核酸适配子(aptamer)或 Affibody 等。根据本专利技术的另一个方面，所述抑制剂可以为能够抑制FAM3B基因的表达或者能 够与FAM3B基因的表达产物结合的一种或多种活性化合物。根据本专利技术的另一个方面，所述抑制剂可以包括一种或多种小干扰核酸，该小干 扰核酸可以为双链RNA分子，包括正义链和反义链，且所述正义链和反义链的长度可以为 15-27个核苷酸，所述正义链和反义链各自的3’端均可以为两个连续的脱氧胸苷酸，所述 正义链和反义链中除去3’端的两个连续的脱氧胸苷酸以外的其他核苷酸可以互补形成双 链，所述小干扰核酸的反义链能够与FAM3B基因的小核酸干扰靶位点序列碱基互补，以抑 制FAM3B基因的表达，所述FAM3B基因的小核酸干扰靶位点序列可以包括SEQ ID NOs :2_33 中之一所示的核苷酸序列，且所述小核酸干扰靶位点序列的长度可以为15-27个核苷酸。优选情况下，所述小核酸干扰靶位点序列可以如SEQ ID Nos 34-65中之一所示本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抑制剂，其特征在于，该抑制剂能够抑制ＦＡＭ３Ｂ基因的表达，以降低ＦＡＭ３Ｂ基因的表达产物的水平；或者该抑制剂能够与ＦＡＭ３Ｂ基因的表达产物结合，以降低ＦＡＭ３Ｂ基因的产物的促进脂质生成的活性，其中，所述ＦＡＭ３Ｂ基因的核苷酸序列与ＳＥＱＩＤ　Ｎｏ　１所示的核苷酸序列具有９８％以上的序列同一性。

【技术特征摘要】
1.一种抑制剂，其特征在于，该抑制剂能够抑制FAM3B基因的表达，以降低FAM3B基因 的表达产物的水平；或者该抑制剂能够与FAM3B基因的表达产物结合，以降低FAM3B基因的 产物的促进脂质生成的活性，其中，所述FAM3B基因的核苷酸序列与SEQ ID No 1所示的核 苷酸序列具有98%以上的序列同一性。2.根据权利要求1所述的抑制剂，其中，该抑制剂为小干扰核酸、反义寡核苷酸、抗体 和活性有机化合物中的一种或几种。3.根据权利要求2所述的抑制剂，其中，所述抑制剂为一种或多种反义寡核苷酸，该反 义寡核苷酸为长度为14_30bp的单链结构，并且所述反义寡核苷酸与SEQ ID No 1所示的 核苷酸序列中相配对的核苷酸序列具有90%以上的同一性。4.根据权利要求2所述的抑制剂，其中，所述抑制剂为一种或多种抗体，所述抗体为单 克隆抗体或多克隆抗体。5.根据权利要求2所述的抑制剂，其中，该抑制剂包括一种或多种小干扰核酸，该小干 扰核酸为双链RNA分子，包括正义链和反义链，且所述正义链和反义链的长度为15-27个核 苷酸，所述正义链和反义链各自的3’端均为两个连续的脱氧胸苷酸，所述正义链和反义链 中除去3’端的两个连续的脱氧胸苷酸以外的其他核苷酸互补形成双链，所述小干扰核酸的 反义链能够与FAM3B基因的小核酸干扰靶位点序列碱基互补，以抑制FAM3B基因的表达，所 述FAM3B基因的小核酸干扰靶位点序列包括SEQ ID NOs :2_33中之一所示的核苷酸序列， 且所述小核酸干扰靶位点序列的长度为15-27个核苷酸。6.根据权利要求5所述的抑制剂，其中，所述小核酸干扰靶位点序列如SEQID Nos 34-65中之一所示。7.根据权利要求5或6所述的抑制剂，其中，所述小干扰核酸的核苷酸序列与FAM3B-1 至FAM3B-32中之一所示的核苷酸序列具有90%以上的同一性，或者所述小干扰核酸的核 苷酸序列为经过修饰的并且与FAM3B-1至FAM3B-32中之一所示的核苷酸序列具有90%以 上的同一性的核苷酸序列，其中，FAM3B-1 正义链5’ -GCCUGCUCAAG⑶GGUGUUdTdT-3’反义链5’ -AACACCACCUUGAGCAGGCdTdT-3’ ； FAM3B-2 正义链5’ -UUC⑶GGUCUUCGCCUCCUUGdTdT-3’反义链5，-CAAGGAGGCGAAGACCACGAAdTdT-3，； FAM3B-3 正义链5’ -CCUGCUCGCAGAGCUCAUUdTdT-3’反义链5’ -AAUGAGCUCUGCGAGCAGGdTdT-3’ ； FAM3B-4 正义链5’ -CCA⑶GCUGCCUAUAGCAUdTdT-3’反义链5’ -AUGCUAUAGGCAGCACUGGdTdT-3’ ； FAM3B-5 正义链5’ -UGACACCUAUGCCUACAGGUUdTdT-3’反义链5’ -AACCUGUAGGCAUAG⑶⑶CAdTdT-3’ ； FAM3B-6 正义链5’ -UACAG⑶UACUCAGCGGAG⑶dTdT-3’反义链5’ -ACCUCCGCUGAGUAACCUGUAdTdT-3’ ； FAM3B-7 正义链5’ -AUCUGCUUUGAGGAUAACCUAdTdT-3’反义链5’ -UAG⑶UAUCCUCAAAGCAGAUdTdT-3’ ； FAM3B-8 正义链5，-UGGGAGAACAGCUGGGAAAdTdT-3，反义链5’ -UUUCCCAGCUGUUCUCCCAdTdT-3’ ； FAM3B-9 正义链5，-GGAAAUGUUGCCAGAGGAAdTdT-3，反义链5’ -UUCCUCUGGCAACAUUUCCdTdT-3’ ； FAM3B-10 正义链5’ -GCCAUU⑶CAACUAUGUAAdTdT-3’反义链5’ -UUACAUAGUUGACAAUGGCdTdT-3’ ； FAM3B-11 正义链5’ -CUCUGGACCGAUGACAAAGdTdT-3’反义链5’ -CUUU⑶CAUCGGUCCAGAGdTdT-3’ ； FAM3B-12 正义链5’ -GCUCUUCAUG⑶GACCUAUdTdT-3’反义链5’ -AUAG⑶CACCAUGAAGAGCdTdT-3’ ； FAM3B-13 正义链5，-GCACAAGACUGAAUAACGAdTdT-3，反义链5’ -UC⑶UAUUCAGUCUU⑶GCdTdT-3’ ； FAM3B-14 正义链5’ -GCCAUAGAAGCACUUGGAAdTdT-3’ 反义链5’ -UUCCAAGUGCUUCUAUGGCdTdT-3’ ； FAM3B-15 正义链5，-GCACUUGGAAGUAAAGAAAdTdT-3，反义链5，-UUUCUUUACUUCCAA⑶GCdTdT-3，； FAM3B-16 正义链5，-AGUAAAGAAAUCAGGAACAdTdT-3，反义链5’ -U⑶UCCUGAUUUCUUUACUdTdT-3’ ； FAM3B-17 正义链5’ -GGUCUAGCUG...

【专利技术属性】
技术研发人员：管又飞，梁子才，
申请(专利权)人：苏州瑞博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]