本发明专利技术提供了用于治疗、改善和／或预防登革热的组合物、疫苗组合物和药物组合物。本发明专利技术的组合物、疫苗组合物和药物组合物包含ＲＮＡ噬菌体的病毒样颗粒和至少一种抗原，其中所述至少一种抗原是登革热抗原。当施用给动物、优选人类时，所述组合物、疫苗组合物和药物组合物诱导有效的免疫应答，特别是抗体应答，其中典型地和优选地，所述抗体应答针对登革热病毒，优选针对血清型１到４中任一种的登革热病毒。因而，本发明专利技术进一步提供了通过针对登革热病毒包膜蛋白质Ｅ的结构域ＩＩＩ、或针对其抗原片段的主动免疫法来治疗、改善和／或预防登革热病毒感染的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于医学、公共健康、免疫学、分子生物学和病毒学领域。本专利技术提供 了用于治疗、改善和/或预防登革热的组合物、疫苗组合物和药物组合物。本专利技术的组 合物、疫苗组合物和药物组合物包含RNA噬菌体的病毒样颗粒和至少一种抗原，其中所 述至少一种抗原是登革热抗原。当施用给动物、优选人类时，所述组合物、疫苗组合物 和药物组合物诱导有效的免疫应答，特别是抗体应答，其中典型地和优选地，所述抗体 应答针对登革热病毒，优选针对血清型1到4的任一种的登革热病毒。因而，本专利技术进 一步提供了通过针对登革热病毒包膜蛋白质E的结构域III、或针对其抗原片段的主动免 疫法来治疗、改善和/或预防登革热病毒感染的方法。
技术介绍
登革热感染是主要的公共健康难题。每年有约5千万-1亿例登革热、500,000 例登革热出血热(DHF)和登革热休克综合征(DSS)，超过20,000例死亡。大多数感染 是无症状的，或引起非致命的虚弱性疾病，但是特别是儿童常常经历更为致命的DHF和 DSS形式。如果通过输液来替代失去的体液，死亡率可以降低到低于1%。主要的登革 热载体是蚊子(Aedes aegypti，埃及伊蚊)，其在整个热带中存在。由于没有特异性的治 疗，控制登革热的仅有方法是消灭蚊子。登革热病毒属于黄病毒科(Flaviviridae)。存在四种紧密相关的登革热血清型 (血清型1到4)。黄病毒具有50nm的直径，且含有单链RNA基因组，该单链RNA基 因组被两种糖蛋白组成的颗粒表面上的衣壳、脂双层和二十面体壳围绕。单个开放阅读 框编码长的多聚蛋白，其被切成三种结构蛋白(核衣壳蛋白C、膜前体蛋白prM和包膜蛋 白 E)和七种非结构蛋白(NSl、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5)。prM 和 NSl 已经成为中和抗体的靶点(Kauftnan 等人 I989 Am.J.Trop.Med.Hyg.41(5) 576-580 ； Henchal 等人 1988J.Gen.Virol.69 2101-2107 ； Wu 等人 2003Vaccine 21 3919-3929)，但 是许多研究也集中于包膜蛋白E。在成熟病毒粒中，E是膜相关的同型二聚的糖蛋白， 其介导病毒附着和与目标细胞上的细胞受体的相互作用。解析了 E的可溶的胞外结构域 的晶体结构(Modis 等人 2003 Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 100 6986-6991)，显示了包含三个 结构域结构域I位于中央，结构域II含有融合肽和二聚作用区域，结构域III赋予受体 结合活性。已经提出登革热包膜结构域III含有中和表位(Roehrig等人1990Virology 177 668-675 ； Megret 等人 Virology 187 480-491 ； Trirawatanapong 等人 Gene 116 139-150)。由于没有特异性的治疗，疫苗接种仍然是控制登革热感染的最有前途的 途径(Ray 和 Shi, 2006 Recent PatentsAnti-Infect Drag Disc.l 45-55)。Sugrue 等人 1997 (J.Gen.Virol.78 1861-1866)已经在巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)中表达了登革热病毒结构蛋白(C-prM-E)。通过SDS-PAGE和透射电子显微术 来检查出芽病毒样颗粒，其中它们观察球状构造，其形态类似于登革热病毒粒。病毒样 颗粒在动物中是免疫原性的，能够诱导中和抗体。带有DEN-2-特异性表位的细小病毒B19 (非包膜的、单链DNA病毒)病毒样 颗粒(VLP)被用作抗原载体(Amexis 和 Young，2006J.Infect.Dis. 194 790-794)。包膜 糖蛋白的结构域III的两种肽(残基352-368和386-397)和全长结构域III作为B19 VLP 上的重组融合物来展示。在另一项研究中，显示的是，登革热包膜蛋白(残基1-395)可以在酵母中作为 与乙型肝炎表面抗原的融合蛋白来表达(Bisht等人2002J.Biotechnol.99 97-110)。来自 免疫的小鼠的血清显示了其结合到包膜蛋白和登革热感染的细胞。在又一项研究中，在小鼠中单独地和作为四价疫苗候选物，评估了含有融合 到大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)的登革热病毒血清型1-4的B结构域的重组蛋白质 (Simmons 等人 2OOl Am.J.Trop.Med.Hyg.65 159-161)。专利技术概述我们发现，分别地包含或由登革热病毒包膜蛋白E的结构域III或其抗原片 段组成的本专利技术的组合物和疫苗组合物不仅能够诱导针对登革热病毒包膜蛋白E的免 疫应答，以及在此特别是抗体应答，此外，而且能够在如Russell等人1967 (Journal of Immunology 99, 291-296)所描述的噬菌斑减少中和测试(PlaqueReductionNeutralization test) (PRNT50)中中和登革热病毒。因而，本专利技术的一个方面是一种组合物，包含(a)具有至少一个第一附着位点 的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒是RNA噬菌体的病毒样颗粒；和(b)具有至少一个 第二附着位点的至少一种抗原，其中所述至少一种抗原是登革热抗原，其中所述登革热 抗原至少包含登革热病毒包膜蛋白E的结构域III的位置9到99 ；和其中(a)和(b)通过 所述至少一个第一附着位点和所述至少一个第二附着位点连接。在非常优选的实施方式 中，所述具有所述至少一个第二附着位点的至少一种抗原包含或优选地由SEQ ID NO 22、25、28和31的任一个组成，和其中优选地所述登革热病毒包膜蛋白E的结构域III选 自以下构成的组G)登革热病毒血清型-1的登革热病毒包膜蛋白E的结构域III; (ii)登 革热病毒血清型_2的登革热病毒包膜蛋白E的结构域III ； (iii)登革热病毒血清型_3的 登革热病毒包膜蛋白E的结构域III ；和(iv)登革热病毒血清型_4的登革热病毒包膜蛋白 E的结构域III。在本专利技术的优选的实施方式中，所述登革热抗原包含、或优选地由至少登革热 病毒血清型-1的登革热病毒包膜蛋白E的结构域III的位置9到99组成。在本专利技术的另 一个优选的实施方式中，所述登革热抗原包含、或优选地由至少登革热病毒血清型_2的 登革热病毒包膜蛋白E的结构域III的位置9到99组成。在本专利技术的进一步优选的实施 方式中，所述登革热抗原包含、或优选地由至少登革热病毒血清型_3的登革热病毒包膜 蛋白E的结构域III的位置9到99组成。在本专利技术的另一个优选的实施方式中，所述登 革热抗原包含、或优选地由至少登革热病毒血清型_4的登革热病毒包膜蛋白E的结构域 III的位置9到99组成。在本专利技术的优选的实施方式中，所述登革热抗原包含、或优选地由登革热病毒 包膜蛋白E的结构域III的位置9到109或位置9到112组成。在本专利技术的另一个优选 的实施方式中，所述登革热抗原包含或优选地由SEQ ID NO: 21、24、27、30和32的任 一个的位置9到99组成。在本专利技术的进一步优选的实施方本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种组合物，包含：（ａ）具有至少一个第一附着位点的病毒样颗粒，其中所述病毒样颗粒是ＲＮＡ噬菌体的病毒样颗粒；和（ｂ）具有至少一个第二附着位点的至少一种抗原，其中所述至少一种抗原是登革热抗原，其中所述登革热抗原包含至少登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ的位置９到９９；其中（ａ）和（ｂ）通过所述至少一个第一附着位点和所述至少一个第二附着位点连接，其中优选地所述登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ选自以下构成的组：（ｉ）登革热病毒血清型－１的登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ；（ｉｉ）登革热病毒血清型－２的登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ；（ｉｉｉ）登革热病毒血清型－３的登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ；和（ｉｖ）登革热病毒血清型－４的登革热病毒包膜蛋白Ｅ的结构域Ⅲ。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：M巴克曼，A休伯，L伊瓦诺瓦，
申请(专利权)人：赛托斯生物技术公司，
类型：发明
国别省市：CH
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。