多肽－聚合物偶联物和其使用方法技术

本发明专利技术提供多肽－聚合物偶联物。也提供主题多肽－聚合物偶联物的各种应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】交叉参考本申请要求2008年3月观日提交的美国临时专利申请61/040，556的优先权，通 过引用将该申请全文纳入本文。
技术介绍
使用化学系链产生固相形式的生物学活性物质是各种医疗和生物学应用中的广 泛主题。可使用化学系链将生物学活性肽或蛋白质连接于表面、将生物学活性赋予多孔性 或水凝胶植入物、或用于药物递送应用。固相递呈可改变生物学活性分子在生物环境中的 作用方式。专利技术_既述本专利技术提供多肽-聚合物偶联物。也提供主题多肽-聚合物偶联物的各种应用。 附图说明图1描绘了将重组蛋白(Sih，sonic hedgehog)嫁接于聚合物透明质酸(HyA)的 生物偶联物方案。图2A和2B描绘了 Sih以及它与聚(丙烯酸)(pAAc)(图2A)和HyA (图2B)的偶 联产物的凝胶电泳。图3描绘了 Shh信号转导途径和提出的Shh的多价性影响其生物学活性的机理的 示意图。图4描绘了可溶性Sih ( ，粗线)，可溶性Shh和可溶性HyA ( ■，虚线)，以及化学 计量比为 0. 6 1 ( Δ )、3· 5 1 (〇)、7 1 ( )、14 1 ( □)禾口 22 1 (χ)的 Shh-HyA 偶联物的C3H10T1/2生物学活性结果。图5A-C代表阴性对照样品(图5Α)、游离的可溶性Shh (图5Β)和14 IShh/HyA 多价形式(图5C)的鸡胚尿囊膜(CAM)反应的一系列显微照片。图6描绘了通过对CAM实验的显微照片进行图像分析获得的血管新生定量结果。图7描绘了在C3H10T1/2细胞中Shh-HyA偶联物的生物学活性的数值模型结 果。上图代表在掺入空间相互作用的模型中，活性与Shh浓度的关系，其中化学计量比为 1 1-30 1。下图代表在两个模型和实验组中，EC5tl与取代水平的关系图。定义术语“肽” “多肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，指任何长度氨基酸的多聚形 式，可包含编码和非编码氨基酸，化学或生物化学修饰或衍生的氨基酸以及具有修饰的肽 主链的多肽。术语“多肽”包括融合蛋白，包括但不限于具有异源氨基酸序列的融合蛋白， 具有异源和同源前导序列的融合蛋白，具有或不具有N末端甲硫氨酸残基的融合蛋白；免 疫学标记的蛋白质等。术语“多肽”包括含有一个或多个脂肪酸部分、脂质部分、糖部分和 碳水化合物部分的多肽。术语“多肽”包括翻译后修饰的多肽。本文所用术语“共聚物”指含有多于一种亚基类型的聚合物。该术语包括具有两种、三种、四种、五种或六种亚基类型的聚合物。术语“对象”、“个体”、“宿主”或“患者”在本文中可互换使用，指任何哺乳动物或非 哺乳动物物种的一个或多个成员。因此，对象和患者包括但不限于，人、非人灵长动物、犬、 猫、有蹄类(如马、牛、猪(如家猪))、禽类、啮齿类(如大鼠、小鼠)和其他对象。非人动物 模型，特别是哺乳动物，例如非人灵长动物、鼠科动物(如小鼠、大鼠)、兔类动物等可用于 实验研究。“治疗”病症和疾病包括(1)预防该病症的至少一种症状，即使得可能暴露于或倾 向于发生该疾病，但尚未经历或显示该疾病的症状的哺乳动物不显著发生该疾病的症状， (2)抑制该疾病，即阻滞或降低该疾病或其症状的发展，或C3)缓解该疾病，即引起该疾病 或其临床症状的消退。“治疗有效量”或“有效量”指在一个或多个剂量中，与其它药物联合给予或单独给 予哺乳动物或其它对象治疗疾病时，足以治疗这种疾病的化合物的用量。“治疗有效量”取 决于化合物、疾病及其严重程度、所治疗对象的年龄、体重等。本文所用术语“单位剂型”指适合作为单一剂量用于人或动物对象的物理上独立 的单位，各单位含有预定量的本专利技术化合物和药学上可接受的稀释剂、载体或运载体，该预 定量经计算足以产生所需效果。本专利技术新型单位剂型的规格依赖于所用的具体化合物和要 达到的效果，以及各化合物在宿主中的相关药效学性质。术语“生理条件”包括与活细胞相容的条件，例如温度、pH、盐度等与活细胞相容的 基本为水性的条件。“药学上可接受的赋形剂”、“药学上可接受的稀释剂”、“药学上可接受的载体”和 “药学上可接受的辅料”指用于制备通常安全、无毒、没有不良的生物学或其它性质的药物 组合物的赋形剂、稀释剂、载体和辅料，包括对于兽医应用和人体药物应用而言可接受的赋 形剂、稀释剂、载体和辅料。说明书和权利要求书中所用的“药学上可接受的赋形剂、稀释 剂、载体和辅料”包括这类赋形剂、稀释剂、载体和辅料中的一种和一种以上。在进一步描述本专利技术之前，应理解，本专利技术不限于本文所述的具体实施方式，因为 它们当然可能变化。应理解，本文所用术语的目的只是描述具体实施方式，不应为限制性， 因为本专利技术范围仅受所附权利要求书的限制。应理解，给出数值范围时，除非文中另有明确说明，该范围上下限之间、以下限单 位的十分之一为间隔的各间插数值，以及所述范围的任何其它标称或间插数值均包括在本 专利技术范围内。所述较小范围内可独立地包含这些较小范围的上下限，它们也属于本专利技术范 围，除非明确地排除所述范围的上下限。所述范围包含一个或两个限值时，排除这一个或两 个限值以外的范围也包括在本专利技术范围内。除非另有说明，本文所用的所有科技术语具有本专利技术所属领域普通技术人员所理 解的通常含义。虽然也可采用与本文所述相似或等同的任何方法和材料实施或测试本发 明，但下面描述了优选的方法和材料。本文所述的所有发表物通过引用纳入本文，以公开或 描述与所引用发表物有关联的方法和/或材料。应注意到，本文和所附权利要求书所用的单数形式“一个”、“一种”和“这种”包括 复数含义，除非另有明确说明。因此，例如，提到“一种合成基材”包括多种这类基材，提到 “一种重组多肽”包括本领域技术人员已知的一种或多种重组多肽和其等同物，等等。还注意到，权利要求书可撰写成排除任何任选要素。同样，这种说明应用作引用权利要求元素相 关地使用这类排除性术语，如“只有”、“仅仅”等，或使用“负”限制的前提基础。本文讨论的发表物只是因为其公开日期早于本申请申请日。本文中没有任何内容 可被解释为承认本专利技术因在先专利技术而不早于这篇发表物。另外，所提供的发表日期可能与 实际公开日期不同，可能需要单独验证。专利技术详述本专利技术提供多肽-聚合物偶联物，其中这类偶联物具有受控的连接化学计量性 质。也提供主题多肽-聚合物偶联物的各种应用。在一些实施方式中，主题多肽-聚合物偶联物具有下式X-(Y)n-Z,其中X是生物活性多肽；Y是任选的接头部分，以使η为0或1到约10的整数；和Z是包含约50-100，000个亚基的生物相容性聚合物。相对于可溶形式多肽的活性，如相对于未偶联于该聚合物的多肽的活性，偶联于 聚合物基材的多肽的生物学活性提高。在一些实施方式中，主题多肽-聚合物偶联物的多 肽的生物学活性比可溶(未偶联)形式多肽的生物学活性高至少约25%、至少约50%、至 少约75%、至少约2倍、至少约5倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25 倍、至少约30倍、至少约40倍、至少约50倍、至少约75倍、至少约100倍、至少约200倍、 至少约500倍或至少约1000倍或1000倍以上。在一些实施方式中，主题多肽-聚合物偶联物的多肽的生物学活性比以1 1摩 尔比偶联于聚合物的多肽的生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种下式偶联物：　　Ｘ－（Ｙ）↓［ｎ］－Ｚ，　　其中Ｘ是生物活性多肽；　　Ｙ是任选的接头部分，其中ｎ为０或１到约１０的整数；和　　Ｚ是包含约５０－１００，０００个亚基的生物相容性聚合物，　　其中所述生物活性多肽与所述聚合物的摩尔比为至少约５∶１。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：KE希利，ST沃尔，K萨哈，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：US[美国]