用于检测生物分子的相互作用的方法和单元技术

本发明专利技术涉及一种单元，所述单元是用于在使用固定有生物分子的载体检测生物分子的相互作用中使用的单元，其具备一端具有开口部另一端封闭的中空支架和固定有载体的可插入中空支架的载体支撑构件，所述载体固定有生物分子，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下，载体支撑构件的后端部和中空支架开口部的边缘咬合，由此中空支架被密封，同时，载体支撑构件和中空支架被定位，在以定位姿势沿包括中空支架轴心的面切开的剖面图中，由中空支架的内侧和固定有载体的载体支撑构件的外侧所构成的面积在载体支撑构件的自载体固定部至前端部的区域，在轴心的左右是大致相同的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使用固定有生物分子(生体関連分子)的载体检测生物分子的相互作 用的方法以及用于在该方法中使用的单元。
技术介绍
随着基因组解析的发展，参与各种生物的生理反应的生物分子被明确。这些生物 分子包括DNA、蛋白质、糖链、细胞等，功能和结构等已明确的分子被用于药物开发或临床检 验、食品检验、环境检测等各种产业用途中。在以临床检验为首的检验中，通常采用以下的方法。即，如果使检体与载体上固定 有与要检测的生物分子(以下称为分析物)特异性结合的探针分子(以下称为配体)的器 件接触，当检体上存在分析物时，由于和配体结合，分析物在载体上被捕获，从而该被捕获 的分析物被检测到。如上所述的检验方法近年来也要求高速化、自动化，从而迫切希望研究出同时综 合地计测几百 几万的生物分子的检测方法，使用固定生物分子的集成技术、所谓的MEMS 技术的器件设计成为可能，其是作为所谓的微阵列用于药物开发研究和生物研究中的综合 解析。作为器件的微阵列根据被固定在载体上的探针分子的种类，包括DNA微阵列(也 称之为DNA芯片)、蛋白质微阵列(也称之为蛋白质芯片)、细胞微阵列(也称之为细胞芯 片)等。解析是使预先用例如荧光物质进行了荧光标记的检体接触微阵列上，然后洗涤微 阵列，然后检测测定荧光物质发出的荧光信号，从而鉴定或定量检体中所含的分析物(特 表 2006-515065 号公报)。DNA芯片等的微阵列通常被制成载玻片那样的大小，专门在其上滴上检体，用标本 覆盖使之反应。今后，根据用途大量自动处理微阵列是必要的。这种情况下希望将微阵列 小型化，并且希望开发出用于自动处理小型化微阵列的有效的手段。专利技术概述本专利技术人等为了自动处理小型化了的微阵列，而将微阵列固定在支撑构件上，将 其插入容纳有检体的中空支架(holder)中，使之反应，结果发现由于检体的容积为微量 (几μ 几百μ )，所以受表面张力影响，检体与微阵列的接触进行得不充分，导致反应不 充分。因而，本专利技术的课题是提供一种在小型化微阵列的自动处理中，用于使微量的检 体与微阵列的接触充分进行的手段。本专利技术人通过在将微阵列固定在支撑构件上后将其插入容纳有反应液的中空支 架中使之反应之际，进行定位，使支撑构件不偏斜地插入到中空支架内，发现检体与微阵列 的接触得以充分进行，从而完成了本专利技术。S卩，本专利技术包含以下的专利技术。(1)单元，所述单元是使用固定有生物分子的载体检测生物分子的相互作用中使 用的单元，其具备一端具有开口部另一端封闭的中空支架和固定有载体的可插入中空支架 的载体支撑构件，所述载体固定有生物分子，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下， 载体支撑构件的后端部和中空支架开口部的边缘咬合，由此中空支架被密封，同时，载体支 撑构件和中空支架被定位，在以定位姿势沿包括中空支架轴心的面切开的剖面图中，由中 空支架的内侧和固定有载体的载体支撑构件的外侧所构成的面积在载体支撑构件的自载 体固定部至前端部的区域，在轴心的左右是大致相同的。(2) (1)所述的单元，载体支撑构件中的载体固定部是具有底面和侧面的凹部，载 体被配置于凹部的底面。(3) (2)所述的单元，载体支撑构件凹部的至少后端部一侧的侧面是倾斜面。(4) (3)所述的单元，倾斜面的表面粗糙度在IOym以下，倾斜面与底面所成的角 度在75°以下。(5) (2) (4)任一项所述的单元，在载体支撑构件凹部的自前端部一侧的侧面至 前端部形成有排液槽。(6) (1) ( 任一项所述的单元，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下， 在载体支撑构件的自载体固定部至前端部一侧的区域，载体支撑构件的体积占中空支架容 积的比例为60%以上。(7) (1) (6)任一项所述的单元，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下， 载体支撑构件的体积占中空支架容积的比例为25 70%。(8) (1) (7)任一项所述的单元，具有分别固定有载体的多个载体支撑构件，载 体支撑构件的后端部分别被固定于表面材料，具有对应于各个支撑构件的多个中空支架。(9)使用固定有生物分子的载体检测生物分子的相互作用的方法，包括将固定 有生物分子的载体固定于载体支撑构件，将该载体支撑构件插入到一端具有开口另一端封 闭的容纳有反应液的中空支架中，由此使载体上生物分子与反应液中已被荧光标记的生物 分子进行相互作用的相互作用工序；通过洗涤载体除去没有和载体上固定的生物分子发生 相互作用的生物分子的洗涤工序和对载体照射激发光，通过检测器检测荧光的检测工序； 在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下，载体支撑构件的后端部和中空支架开口部的 边缘咬合，由此中空支架被密封，同时，载体支撑构件和中空支架被定位，在以上述定位姿 势沿包括中空支架轴心的面切开的剖面图中，由中空支架的内侧与固定有载体的载体支撑 构件的外侧所构成的面积在载体支撑构件的自载体固定部至前端部的区域，在轴心的左右 是大致相同的。(10) (9)所述的方法，载体支撑构件中的载体固定部是具有底面和侧面的凹部，载 体被配置于凹部的底面。(11) (10)所述的方法，载体支撑构件凹部的至少后端部一侧的侧面是倾斜面。(12) (11)所述的方法，倾斜面的表面粗糙度在IOym以下，倾斜面与底面所成的 角度在75°以下。(13) (10) (1 任一项所述的方法，在载体支撑构件凹部的自前端部一侧的侧 面至前端部形成排液槽。(14) (9) (1 任一项所述的方法，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势5下，在载体支撑构件的自载体固定部至前端部一侧的区域，载体支撑构件的体积占中空支 架容积的比例为60%以上。(15) (9) (14)任一项所述的方法，在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势 下，载体支撑构件的体积占中空支架容积的比例为25 70%。(16) (9) (15)任一项所述的方法，具有分别固定有载体的多个载体支撑构件， 载体支撑构件的后端部分别被固定于表面材料，具有对应于各个支撑构件的多个中空支架。根据本专利技术，可提供一种在小型化微阵列的自动处理中，用于使微量的检体与微 阵列的接触充分进行的手段。本说明书包含作为本申请优先权基础的特愿2008-141155号的说明书、权利要求 书和附图中记载的内容。附图说明图1给出了本专利技术的一个实施方式。图2给出了本专利技术的一个实施方式。图3给出了本专利技术的一个实施方式。图4给出了本专利技术的一个实施方式。图5给出了本专利技术的一个实施方式。图6给出了载体支撑构件的后端部和中空支架开口部的边缘咬合的情况(a)和不 咬合的情况(b)的比较结果。图7给出了具有排液槽的载体支撑构件(a)、不具有排液槽的载体支撑构件(b)和 中空支架(C)的一个实施方式。图8给出了使用具有排液槽的载体支撑构件和不具有排液槽的载体支撑构件时 的检测结果。图9给出了在插入到中空支架的姿势下，载体支撑构件的体积占中空支架的容积 的比例为80%的载体支撑构件(a)和50%的载体支撑构件(b)分别插入到容纳有反应液 的中空支架中的结果。具体实施例方式本专利技术中，生物分子包括DNA和RNA等核酸、肽、糖链和细胞、它们的复合体以及它 们与其他分子的复合体等。本专利技术中，肽包括寡肽、多肽和蛋白质。载体上固定的生物分子 是肽时，通常1 lOOOk本文档来自技高网...

【技术保护点】
单元，所述单元是在使用固定有生物分子的载体检测生物分子的相互作用中使用的单元，其中，　　具备一端具有开口部另一端封闭的中空支架和固定有载体的可插入中空支架的载体支撑构件，所述载体固定有生物分子，　　在载体支撑构件被插入至中空支架的姿势下，载体支撑构件的后端部和中空支架开口部的边缘咬合，由此中空支架被密封，同时，载体支撑构件和中空支架被定位，　　在以定位姿势沿包括中空支架轴心的面切开的剖面图中，由中空支架的内侧和固定有载体的载体支撑构件的外侧所构成的面积在载体支撑构件的自载体固定部至前端部的区域，在轴心的左右是大致相同的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：山野博文，龟井修一，丹花通文，
申请(专利权)人：东洋钢钣株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]