Ｃ２ＯＲＦ１８作为癌症治疗和诊断的靶基因制造技术

本文描述了用于检测或诊断发生癌症（特别是胰腺癌）的倾向的客观方法。在一个实施方案中，该诊断方法涉及利用抗－Ｃ２ｏｒｆ１８抗体确定Ｃ２ｏｒｆ１８表达水平的步骤。本发明专利技术进一步提供了筛选可用于治疗Ｃ２ｏｒｆ１８相关疾病（例如癌症，如胰腺癌）的治疗剂的方法，抑制细胞生长和治疗或减轻其症状的方法。本发明专利技术还提供产品，例如多核苷酸、多肽、和载体双链分子、抗体、载体和由它们构成的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及检测和诊断癌症(特别是胰腺癌)的存在或者发生癌症的倾向 (predisposition)的方法。本专利技术还涉及治疗和预防癌症(特别是胰腺癌)的方法。特别 地，本专利技术涉及C2orfl8，一种在癌症中被特异上调的基因，以及其作为癌症治疗靶标和 诊断标志的用途。
技术介绍
癌症是主要的死亡原因，全世界每年有数百万人死于癌症。特别地，胰腺癌是 恶性肿瘤中致死率最高的癌症之一，患者的5年存活率为4%。每年有大约28000名患 者被诊断患有胰腺癌，并且几乎所有患者均因病死亡(Greenlee，R.T.，etal.，(2001)CA Cancer J Clin, 51: 15-36)。这种恶性肿瘤的不良预后是由于其难以早期诊断和对现在 的治疗方法响应差所导致的(Greenlee，R.T.，et al. (2001) CA Cancer J Clin, Ji: 15-36， Klinkenbijl, J.H., et al. (1999) Ann Surg，230 776-82; discussion 782-4.)。胰腺导管腺癌(PDAC)是西方国家中位列第四的癌症致死原因，也是普通恶 性肿瘤中具有最高致死率的癌症之一，患者的5年存活率仅为5% (DiMagno EP，et al.Gastroenterology. 1999 Dec ； 117(6) 1464-84.1, WrayCJ, etal.Gastroenterology.2005 May； 128(6) 1626-41.2)。2007年，美国预计有大约37,170名新患者被诊断患有胰 腺癌，并且接近 33,370 名将死于胰腺癌(JemalA，et al.CA Cancer J Clin.2007 Jan-Feb ； 57(1) : 43-66.3)。目前，PDAC唯一可治愈的方法是手术切除。然而，因为大多 数PDAC是在很晚期的阶段才被诊断出来，所有在诊断出时只有15% -20%的患者可 进行手术切除。在接受了有治愈可能的手术的患者中，大多数患者最终会复发并死于 该疾病(WrayCJ，et al.Gastroenterology.2005 May ； 128 (6) 1626-41.2)。某些方法 结合手术和化疗(包括吉西他汀或5-FU)，进行或不进行放射，能改善患者的生活质 量(DiMagno EP，et al.Gastroenterology.1999 Dec ； 117 (6) 1464-84.1，Wray CJ, etal. Gastroenterology.2005 May ； 128(6) 1626-41.2)。然而，这些治疗对 PDAC 患者长期生 存的效果非常有限，因为PDAC的侵袭性极高，并且对化疗有抵抗性。为了应对这种严峻的状况，通过鉴定分子靶标开发PDAC的新型分子治疗方 法是现在亟待解决的问题。前人已经使用了基因组范围的cDNA阵列，结合使用激光 显微解剖，获得了用于检测的纯化癌细胞群体，生成了精细的PDAC细胞表达谱(见 Nakamura T，et al.0ncogene.2004 Mar25 ； 23(13) 2385-400，本文引用作为参考)。线粒体对于细胞生物能学至关重要，在决定细胞凋亡过程中发挥核心作用 (Taniuchi K，et al.Cancer Res.2005 Jan 1 ； 65(1) 105-12.)。癌相关的细胞代谢变化会影响线粒体功能(Warburg effect, Galluzzi L, et al.Oncogene.2006Aug 7 ； 25 (34) 4812-30.)，并可能参与癌的存活能力，特别是在低毒性条件下。而且，细胞凋亡失效已 经与线粒体外膜透化(permeabilization) (MOMP)被抑制联系起来。在理论上，开发靶 定线粒体蛋白的特异治疗干预方法是吸引人的(Taniuchi K，et al.Cancer Res.2005 Jan 1 ； 65(1) 105-12.)。许多实验性的治疗剂能够直接靶定线粒体，从而诱导细胞凋亡。这 些试剂的实例包括被设计成模拟Bcl-2样蛋白Bcl-2同源域3的试剂(Walensky LD, et al.Science.2004 Sep 3 ； 305(5689) 1466-70.),外周型苯并二氮卓受体配体(Decaudin D, etal.CancerRes.2002 Mar 1 ； 62(5) 1388-93.),和两性阳离子(Ellerby HM，et al.Nat Med. 1999 Sep ； 5(9) 1032-8.)。这些MOMP诱导剂或促进剂能够自身诱导细胞凋亡， 或者在联合治疗中促进细胞凋亡的诱发，从而克服任何针对DNA损伤剂的化疗耐受性 (Taniuchi K, et al.Cancer Res.2005 Jan 1 ； 65(1) 105-12.)。本专利技术通过发现一种新的在胰腺癌细胞中特异上调的基因靶标，C2orfl8(染色 体2开放阅读框18)，解决了本领域对改进胰腺癌诊断和治疗的需求。专利技术的公开专利技术概要 鉴于前述，本专利技术的一个目的是提供用于检测、诊断、预后评估和/或治疗癌 症(特别是胰腺癌)的新方法。在完成本专利技术的过程中，通过微阵列分析鉴定了一个新基 因C2orfl8，其在胰腺癌细胞(特别地，PDAC细胞)中特异过表达，并且其在癌细胞中 的过表达被RT-PCR和免疫组织化学分析所证实。因为C2orfl8在成年正常器官中局限性 地表达，所以它可能是具有极小副作用的新型治疗方法的合适而有前景的分子靶标。功 能上，通过SiRNA敲低胰腺癌细胞系中的内源C2orfl8可急剧抑制胰腺癌细胞的生长，表 明它在保持胰腺癌细胞生存能力中方面起着至关重要的作用。免疫细胞化学分析和细胞 分级分离(cell fractionation)随后进行western印迹分析的结果显示C2orfl8位于线粒体， 提示C2orfl8在癌细胞中可能参与细胞凋亡或能量内稳平衡。因此，本专利技术的一个目的是通过确定受试者来源生物样品(例如活组织检查)中 C2orfl8的表达水平来提供检测或诊断对象体内癌症、确定发生癌症的倾向、和/或监视 癌症(特别是胰腺癌)的治疗过程的方法。C2orfl8的表达水平与正常对照水平相比增 力口，表明对象罹患或者具有发生癌症(特别是PDAC)的危险。在本专利技术的方法中，可以 利用合适的探针检测C2orfl8基因，或者可以利用抗_C2orfl8抗体检测C2orfl8蛋白。本专利技术进一步提供了鉴定可抑制C2orfl8基因表达或其基因产物活性的作用剂的 方法。如在本文中将更详细讨论地，本专利技术涉及下述发现C2orfl8与ANT2之间的相互 作用，及该作用参与线粒体膜电位保持以及细胞凋亡。因此，本专利技术的一个目的是提供 鉴定可抑制C2orfl8与ANT2之间相互作用的作用剂的方法。本专利技术的一个进一步的目的 是提供鉴定用于治疗或预防C2orfl8相关疾病，例如癌症如胰腺癌，更特别地是PDAC， 的候选作用剂的方法，或者鉴定用于在这些疾病状态下抑制细胞生长的候选作用剂的方 法。本专利技术的方法可以在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测或诊断受试者中癌症的方法，包括确定受试者来源的生物样品中Ｃ２ｏｒｆ１８的测试表达水平的步骤，其中所述水平与Ｃ２ｏｒｆ１８正常对照水平相比的增加表明所述受试者罹患癌症或者具有发生癌症的危险，其中Ｃ２ｏｒｆ１８的测试表达水平通过选自下组的任何一种方法确定：　　（ａ）检测Ｃ２ｏｒｆ１８的ｍＲＮＡ，　　（ｂ）检测由Ｃ２ｏｒｆ１８编码的蛋白，和　　（ｃ）检测由Ｃ２ｏｒｆ１８编码的蛋白的生物活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：中村佑辅，中川英刀，中鹤修一，
申请(专利权)人：肿瘤疗法科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：JP[日本]