一种混合标记物质和标记方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种混合标记物质，包括标记物和被标记物，标记物包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两种。优选的，标记物包括其中两种物质，如胶体金颗粒和乳胶颗粒。本发明专利技术还涉及了一种标记混合标记物质的方法，包括标记物和被标记物的结合。不同的标记物可以和相同的被标记物共同标记，也可以和相同的标记物分别标记再混合，不同的标记物还可以和不同的被标记物分别标记。另外，本发明专利技术还涉及一种检测试剂条，这种检测试剂条上包括如上所述的混合标记物质。本发明专利技术取得的有益效果是：通过混合标记物质在检测试剂条中的应用，可以有效提高检测的灵敏度和特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种混合标记物质和标记混合标记物质的方法以及其应用，属于免疫 领域中所用的标记物质，尤其是快速诊断领域中应用于检测样本中是否含有被分析物质的 检测试剂条。
技术介绍
快速诊断领域内，用于检测样本中是否含有被分析物质的工具，常常首选检测试 剂条。检测试剂条可以包括样本接受区域，标记区域，检测区域和吸收区域。一般来说，可 以直观显示检测结果的带颜色颗粒会和特定的抗原或者抗体标记并固定在标记区域上。在 检测过程中，这种标记结合物可以和样本中的物质结合(如果有)，然后顺着样本到达检测 区域，并和检测区域中的和特定的抗原或者抗体对应的抗体或者抗原结合，并且通过显示 是否有颜色来判断样本中是否含有被分析物。1971年Faulk和Taytor将胶体金引入免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种 新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。而今，胶体金是一种常用的标 记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独 特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用 其标记。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法(immimochromatogra-phy)和快速免 疫金渗滤法(Dot-immuogoldfiltration assay DIGFA)，用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链 DNA 抗体等，具有简单、快速、准确和无污染等优点。同样，乳胶标记也具有相类似的功能，不同 的是，乳胶和抗原或抗体之间的结合是依靠偶联作用的共价键作用而非静电作用的。
技术实现思路
本专利技术涉及一种混合标记物质，包括标记物和被标记物。优选的，标记物包括选自 胶体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两种。优选的，标记物包括其中两种物质， 如胶体金颗粒和乳胶颗粒。其中优选的，这两种标记物可以分别标记被标记物，然后按照比 例混合在一起。这种形式的混合标记物，可以在检测中互不干扰，增加样本中被分析物质的 结合位点，提高检测的特异性。另外优选的，这两种标记物可以先后标记同一种被标记物， 形成胶体金_被标记物_乳胶这样的结合物。这种结合物，可以具有较高的灵敏度，既在 弱阳性的情况下可以显示较强的信号，在弱阴性的情况下也可以显示阴性，因此在cut-off 值附近具有较好的分辨作用。另外优选的，标记物还可以包括其中另外两种标记物或者三 种标记物。本专利技术还涉及了一种标记混合标记物质的方法，包括标记物和被标记物的结合。 优选的，标记物至少包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，以及水溶性标记物的两种或者三种。 不同的标记物可以和相同的被标记物共同标记，也可以和相同的标记物分别标记再混合， 不同的标记物还可以和不同的被标记物分别标记。在具体的优选的实施例中，将胶体金颗 粒和被标记物集合在一起形成胶体金_被标记物结合物；乳胶颗粒和被标记物结合在一起形成乳胶-被标记物结合物；最后将这两种结合物混合在一起。在另外一个优选的实施例 中，标记混合标记物质的方法包括，将胶体金颗粒和被标记物结合形成胶体金_被标记物 结合物；将乳胶颗粒和胶体金_被标记物结合物结合形成胶体金_被标记物_乳胶结合物。 另外，本专利技术还涉及一种检测试剂条，这种检测试剂条上包括如上所述的混合标记物质。本专利技术取得的有益效果是通过混合标记物质在检测试剂条中的应用，可以有效 提高检测的灵敏度和特异性。附图说明图1是本专利技术一个实施例标记物和被标记物的结合示意图，其中， 表示一种标 记物，〈>表示另一种标记物，——〈表示被标记物。图2是本专利技术另一个实施例标记物和被标记物的结合示意图。图3是本专利技术一个实施例的实验结果比较图。其中，C表示控制线，T表示测试线。 I是将胶体金-str印A抗体置于标记垫上得到的结果；II是将乳胶-str印A抗体置于标 记垫上得到的结果；III是将胶体金-Str印A抗体和乳胶-Str印A抗体共同置于标记垫 上得到的结果；IV是将胶体金-str印A抗体-乳胶置于标记垫上得到的结果。具体实施例方式下面对混合标记物质涉及的概念或这些所使用的技术术语做进一步的说明。样本本专利技术所指的样本指那些可以用来检测、化验或诊断是否存在感兴趣的被分析物 质的物质。样本可以是，例如，液体样本，液体样本可以包括血液、血浆、血清、尿液、唾液和 各种分泌液，还可以包括固体样本和半固体样本经过预先处理后形成的液体溶液。收集来 的样本可以用于免疫检测、化学检测、酶检测等方法来检测是否存在被分析物质。被标记物本专利技术中的被标记物是指免疫领域内可以和其他物质通过物理或者化学方式结 合的蛋白质类，包括抗原和抗体，以及抗体片段等。抗原是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致 敏淋巴细胞结合，发生免疫效应的物质，如病原体、异种动物血清等。在快速诊断领域内，如 测定丙肝病毒抗体(HCV)，就可以采用双抗原夹心的方法，测定样本中抗HCV总抗体。“抗体”是指免疫球蛋白，无论是天然的还是部分或者全部合成的。这个术语还包 括其中保持结合能力的抗体的衍生物，也包括任何含有与免疫球蛋白的结合域同源的或者 很大程度上同源的结合域的蛋白质。这些蛋白质可能是源自天然物质，也可能是部分或者 全部合成的。一种抗体可能是单克隆的或者是多克隆的。一种抗体可能是任何免疫球蛋 白类型中的一员，包括任何人类的免疫球蛋白类型=IgG, IgM, IgA, IgD, IgG和IgE0 “抗体 片段”是抗体的衍生物或者抗体的小于全长的一个部分。抗体片段能够保留至少一个全 长抗体的结合能力的显著位点。在一个具体的流感检测的实施例中，通常可以采用双抗体 夹心的方法，即被标记物为流感抗体，可以给合标记物，当样本中含有流感病毒时，流感抗 体_标记物结合物可以很快将流感病毒抗原捕捉到，并在检测区域以阳性有线的方式直观显示出来。在另一个具体的实施例中，被分析物质是HCG，可以采用HCG抗体和标记物质的 标记，来显示妇女的体液样本，如尿液或者血液中是否含有HCG抗体，可以判断妇女是否怀孕。标记物本专利技术中的标记物质可以是酶，非水溶性颗粒，例如金属胶体颗粒(胶体金颗 粒)，乳胶颗粒等等，或者一些水溶性标记物质，还可以荧光标记物质。混合标记物质本专利技术中的混合标记物质，是指标记物和被标记物之间通过物理或者化学结合产 生的结合物。这种混合标记物质中的标记物质，优选的，在本专利技术中，至少包括两种标记物， 以更加灵敏得捕捉信号。这两种或者两种以上的标记物，可以是选自以上所述的任意两种 标记物。如选择荧光标记物质和胶体金颗粒作为标记物，形成的混合标记物质可以包括以 下几种情况，一种是荧光物质_被标记物结合物和胶体金_被标记物质结合物的混合物，另 一种是荧光物质_被标记物_胶体金结合物。一个较佳的选择是选用胶体金颗粒和乳胶颗粒作为标记物胶体金具有很高的动 力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。胶体金在弱碱 环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结 合，所以不影响蛋白质的生物特性。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小 比较均勻、形状及颜色(紫红色)反应，故是免疫反应的一种较佳标记物。同样，乳胶颗粒 也是作为标记物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种混合标记物质，包括标记物和被标记物，其特征在于，所述的标记物包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两种。

【技术特征摘要】
1.一种混合标记物质，包括标记物和被标记物，其特征在于，所述的标记物包括选自胶 体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两种。2.如权利要求1所述的混合标记物质，其特征在于，所述的被标记物包括至少一种抗 体或抗原物质。3.如权利要求1或2所述的混合标记物质，其特征在于，所述的混合标记物质包括胶体 金_被标记物结合物，以及乳胶_被标记物结合物。4.如权利要求1或2所述的混合标记物质，其特征在于，所述的混合标记物质包括胶体 金-被标记物-乳胶结合物。5.一种带有混合标记物质的检测试剂条，其中混合标记物质包括标记物和被标记物， 其特征在于，所述的标记物包括选自胶体金颗粒，乳胶颗粒，水溶性标记物之中的至少两 种。6.如权利要求5所述的检测试剂条，其特征在于，所述的被标记物包括至少一种抗体 或抗原物质。7.如权利要求5所述的检测试剂条，其特征在于，所述的检测试剂条包括标记区域和 检测区域，所述的混合标记物质位于标记区域。8.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：高飞，吴银飞，陆维克，
申请(专利权)人：艾博生物医药杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]