具有延长目标肽的血浆半衰期作用的肽制造技术

以下的（Ｉ）或（ＩＩ）的肽，（Ｉ）该肽由式Ｂ、Ａ－Ｂ、Ｂ－Ｃ、或Ａ－Ｂ－Ｃ表示，式中，Ａ、Ｂ和Ｃ分别为以下的（１）、（２）、和（３）所表示的物质，该肽在与其他目标肽结合时，能够保持该目标肽的生理活性，同时与该目标肽相比能够延长血浆中的半衰期；（ＩＩ）该肽由如下序列构成：与（Ｉ）的肽反向的序列，在（Ｉ）中由Ａ－Ｂ表示且Ａ或Ｂ反向的序列，在（Ｉ）中由Ｂ－Ｃ表示且Ｂ或Ｃ反向的序列，或在（Ｉ）中由Ａ－Ｂ－Ｃ表示且Ａ、Ｂ、Ｃ、Ａ和Ｂ、Ｂ和Ｃ、或Ａ和Ｃ反向的序列；（１）Ａ为由１～１４个任意的氨基酸构成的肽，（２）Ｂ为由式１：（Ｗｋ－Ｘｌ－Ｙ－Ｚｍ－Ｗｎ）－（Ｗｏ－Ｘｐ－Ｙ－Ｚｑ－Ｗｒ）ｓ所表示的肽，式１中，Ｗ为碱性氨基酸，Ｘ和Ｚ为任意的氨基酸，Ｙ为酸性氨基酸，ｋ＝１或２，ｌ为整数且４≥ｌ≥０，ｍ为整数且２≥ｍ≥０，４≥ｌ＋ｍ≥０，ｎ＝１或２，ｏ＝１或２，ｐ为整数且４≥ｐ≥０，ｑ为整数且２≥ｑ≥０，４≥ｐ＋ｑ≥０，ｒ＝１或２，ｓ＝０或１，（３）Ｃ为由２～１４个任意的氨基酸构成的肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种肽，其通过改善目标肽的体内动态而赋予适于治疗目的的体内动态，从而在治疗上有用，另外涉及体内动态被改善且具有目标肽的生理活性的复合肽、包含 该复合肽的药物组合物、和该复合肽的制造方法。
技术介绍
即便存在能作为药物应用的生理活性肽，在该肽中具有血浆半衰期较短的物质， 在应用于治疗目的时，需要通过向静脉内或皮下持续投与、或投与持续释放型DDS制剂等 而得以实现。因此，在实际应用中需要长期花费大量的时间和费用。例如，作为延长生理活性肽的血浆半衰期而作为药物开发的例子，已知胰高血糖 素样肽-KGlucagon-like Peptide-1)的例子(非专利文献1)。用于明确生理活性肽的 作用的临床研究大多使用了持续静脉内投与(非专利文献2)，为了治疗II型糖尿病创制 了能够皮下快速浓注的延长了半衰期的肽。这样，为了作为实际的治疗药而进行开发，开发 延长了半衰期的衍生物是必要的，存在这样的例子，该例子中，生理活性肽衍生物被化学合 成，或者虽然是异种的天然的肽但开发了半衰期长的物质(非专利文献3 5)。另外，在将半衰期短的生理活性肽作为药物而进行应用时，尝试了通过与半衰期 长的蛋白质结合，而使生理活性肽的半衰期与该蛋白质的半衰期接近，例如在血清白蛋白 上介由具有结合基的间隔物(spacer)而使目标生理活性肽与该蛋白质结合等方法正处于 试验阶段(非专利文献6)。因此，为了将半衰期短的生理活性肽供于实用，期待通过附加能够延长其半衰期 的物质而改善体内动态，将现有技术中无法显示治疗效果的生理活性肽在医疗中应用。至今为止广泛进行了改变短半衰期的生理活性肽，而使其作为药物应用的尝试， 例如尝试了使肽稳定化、对制剂进行钻研而使其具有持续性等，已知也有实用化中成功的 例子。另一方面，生长素释放肽(Ghrelin)为1999年在胃中发现的一种激素，其具有由 28残基构成的氨基酸序列，其为具有该序列的氨基末端起第3位的氨基酸被脂肪酸酰基化 的极其少见的化学结构的肽(非专利文献6，专利文献1)。生长素释放肽作用于生长激素促 分泌素受体 la (Growth Hormone Secretagogue-Receptor la :GHS_Rla)(非专利文献 7)， 为使来自垂体的生长激素(GH)的分泌亢进的内源性的脑-消化道激素(非专利文献7)。另外，生长素释放肽作为针对GHS-Rla的内源性的GHS，首先在大鼠中被分离纯 化，在大鼠以外的脊椎动物、例如人、小鼠、猪、鸡、兔、牛、马、绵羊、青蛙、虹鳟鱼、狗等中也 分离出了具有类似一级结构的生长素释放肽，它们的氨基酸序列是已知的(专利文献1，非 专利文献8)。上述生长素释放肽均为具有第3位的丝氨酸残基或苏氨酸残基的侧链羟基被 辛酸、癸酸等脂肪酸酰基化而成的特异结构的肽，除生长素释放肽以外，不存在从生物体中 分离具有这种疏水性修饰结构的生理活性肽的例子。在最近的研究中，明确了生长素释放肽具有亢进食欲、通过皮下投与而增加体重和体脂肪(非专利文献9 11)、以及改善心脏功能等作用(非专利文献12 14)。此外生长素释放肽具有GH分泌促进作用和食欲亢进作用，期待介由GH的作用燃烧脂肪而使其 转变为能量的作用，或者通过食欲亢进进一步有效引出表现GH的合成代谢作用而增强肌 肉的效果(非专利文献15)。然而，已经表明生长素释放肽的活性中心为具有酰基的N末端部分(专利文献1)， 目前对于C末端部分的生理学意义还有许多问题不明确。现有技术文献专利文献专利文献1 :W001/07475非专利文献非专利文献1 :Mojsov S，Weir GC, Habener JF. J Clin Invest. 1987,79(2) 616-619.非专禾Ij 文献 2 :Nauck MA, Heimesaat MM, Orskov C, HolstJJ, Ebert R, Creutzfeldt W. , J Clin Invest. 1993，91(1) 301-307.非专利文献 3 0' Harte FP, Mooney ΜΗ, Lawlor A, Flatt PR.，Biochim Biophys Acta. 2000,6 ；1474(1) :13_22·非专禾O文献 4 :Madsbad S, Schmitz 0, Ranstam J, Jakobsen G, Matthews DR,. Diabetes Care. 2004,27(6) : 1335-1342.5 =DeFronzo RA, Ratner RE, Han J, Kim DD, Fineman MS, Baron AD.， Diabetes Care. 2005,28(5) :1092_1100.非专利文献6 :Kim JG, Baggio LL, Bridon DP, Castaigne JP, Robitaille MF, Jette L, Benquet C,Drucker DJ.，Diabetes. 2003，；52 (3) :751_759·非专禾丨J文献 7 Kojima M, Hosoda H, Date Y, Nakazato Μ, Matsuo H, Kangawa K., 1 =Nature. 1999,9 ；402(6762) :656_660.非专利文献8 児島将康，寒川賢治，生化学，第79卷，第9号，pp. 853-867，2007年非专利文献9 =Choi K, Roh SG, Hong YH, Shrestha YB, Hishikawa D, Chen C, Kojima Μ, Kangawa K, Sasaki S. ,Endocrinology. 2003,144(3) :754_9·非专利文献10 =Neary 匪，Small CJ, Wren AM, Lee JL, Druce MR, Palmieri C, Frost GS, Ghatei MA, Coombes RC, Bloom SR. ， J Clin Endocrinol Metab. 2004,89(6) 2832-6非专利文献 11 Akamizu Τ, Iwakura H, Ariyasu H, Hosoda H,Murayama Τ, Yokode Μ, Teramukai S, Seno H, Chiba Τ, Noma S, Nakai Y, Fukunaga Μ, Nakai Y, Kangawa K, FD Clinical StudyTeam. Eur J Endocrinol. 2008,158(4) :491_812 Nagaya N, Kojima Μ, Uematsu Μ, Yamagishi Μ, Hosoda H, Oya H, Hayashi Y,Kangawa K. ,Am JPhysiol Regul Integr Comp Physiol. 2001,80(5) :R1483_7.非专禾Ij文献 13 =Nagaya N, Miyatake K, Uematsu Μ, Oya H, Shimizu W, Hosoda H, Kojima Μ, Nakanishi N, Mo本文档来自技高网...

【技术保护点】
以下的（Ⅰ）或（Ⅱ）的肽，　　（Ⅰ）该肽由式Ｂ、Ａ－Ｂ、Ｂ－Ｃ、或Ａ－Ｂ－Ｃ表示，式中，Ａ、Ｂ和Ｃ分别为以下的（１）、（２）、和（３）所表示的物质，该肽在与其他目标肽结合时，能够保持该目标肽的生理活性，同时与该目标肽相比能够延长血浆中的半衰期；　　（Ⅱ）该肽由如下序列构成：与（Ｉ）的肽反向的序列，在（Ⅰ）中由Ａ－Ｂ表示且Ａ或Ｂ反向的序列，在（Ⅰ）中由Ｂ－Ｃ表示且Ｂ或Ｃ反向的序列，或在（Ⅰ）中由Ａ－Ｂ－Ｃ表示且Ａ、Ｂ、Ｃ、Ａ和Ｂ、Ｂ和Ｃ、或Ａ和Ｃ反向的序列；　　（１）Ａ为由１～１４个任意的氨基酸构成的肽，　　（２）Ｂ为由式１：（Ｗｋ－Ｘｌ－Ｙ－Ｚｍ－Ｗｎ）－（Ｗｏ－Ｘｐ－Ｙ－Ｚｑ－Ｗｒ）ｓ所表示的肽，　　式１中，Ｗ为碱性氨基酸，Ｘ和Ｚ为任意的氨基酸，Ｙ为酸性氨基酸，ｋ＝１或２，１为整数且４≥ｌ≥０，ｍ为整数且２≥ｍ≥０，４≥ｌ＋ｍ≥０，ｎ＝１或２，ｏ＝１或２，ｐ为整数且４≥ｐ≥０，ｑ为整数且２≥ｑ≥０，４≥ｐ＋ｑ≥０，ｒ＝１或２，ｓ＝０或１，　　（３）Ｃ为由２～１４个任意的氨基酸构成的肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】JP 2008-5-23 2008-136106以下的(I)或(II)的肽，(I)该肽由式B、A-B、B-C、或A-B-C表示，式中，A、B和C分别为以下的(1)、(2)、和(3)所表示的物质，该肽在与其他目标肽结合时，能够保持该目标肽的生理活性，同时与该目标肽相比能够延长血浆中的半衰期；(II)该肽由如下序列构成与(I)的肽反向的序列，在(I)中由A-B表示且A或B反向的序列，在(I)中由B-C表示且B或C反向的序列，或在(I)中由A-B-C表示且A、B、C、A和B、B和C、或A和C反向的序列；(1)A为由1～14个任意的氨基酸构成的肽，(2)B为由式1(Wk-Xl-Y-Zm-Wn)-(Wo-Xp-Y-Zq-Wr)s所表示的肽，式1中，W为碱性氨基酸，X和Z为任意的氨基酸，Y为酸性氨基酸，k＝1或2，1为整数且4≥l≥0，m为整数且2≥m≥0，4≥l+m≥0，n＝1或2，o＝1或2，p为整数且4≥p≥0，q为整数且2≥q≥0，4≥p+q≥0，r＝1或2，s＝0或1，(3)C为由2～14个任意的氨基酸构成的肽。2.根据权利要求1所述的肽，其中，B为式1中s= 1的肽。3.根据权利要求2所述的肽，其中，在上述式1中，ο= 0，ρ = 0，q = 0，r = 2。4.根据权利要求1所述的肽，其中，C包含能够取得α螺旋结构的4 9个氨基酸序列。5.根据权利要求4所述的肽，其中，C在其末端与能够取得α螺旋结构的氨基酸序列 之间具有Pro序列。6.根据权利要求1所述的肽，其中，上述的A、B、和C为以下的⑴或(2)，(1)A为序列号34中与B连续的氨基酸号1 4的1个以上的氨基酸序列，或该氨基酸 序列中缺失、置换、和/或附加1个或多个氨基酸而成的氨基酸序列，B为序列号34中的氨基酸号5 9的氨基酸序列，或该...

【专利技术属性】
技术研发人员：若林直美，佐藤圣儿，
申请(专利权)人：阿斯比奥制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]