作为酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶抑制剂、巨噬细胞-脂质复合物在动脉壁上累积的抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及桔皮提取物或桔皮粉末在哺乳动物中抑制酰基ＣｏＡ－胆固醇－Ｏ－酰基转移酶（ＡＣＡＴ）的活性、抑制巨噬细胞－脂质复合物在动脉壁上的累积、以及预防或治疗肝病的应用。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及桔皮提取物在哺乳动物中抑制酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶(ACAT)的活性、抑制巨噬细胞-脂质复合物在动脉壁上的累积、以及预防或治疗肝病的应用。
技术介绍
近些年来，冠状心血管循环疾病，例如动脉粥样硬化和高胆固醇血症，已逐渐成为主要的致死原因。已有报道称，血浆胆固醇浓度增高导致脂肪、巨噬细胞和泡沫细胞沉积在血管壁上，此等沉积则导致斑块形成，并由此引发动脉粥样硬化(Ross，R.，Nature，362，801-809(1993))。降低血浆胆固醇浓度的方法之一是饮食料法，以降低胆固醇和脂质的摄入。另一种方法是通过抑制其中所涉及的酶来抑制胆固醇的吸收。酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶(ACAT)促进血液中胆固醇的酯化。泡沫细胞是在ACAT的作用下形成的，并包含大量的由低密度脂蛋白携带的胆固醇酯。泡沫细胞在动脉壁上的形成随ACAT的活性而增加，因此ACAT的抑制剂也可以是防止动脉粥样硬化的药剂。另外，已有人报道LDL-胆固醇的血浓可通过抑制ACAT的活性来降低(Witiak，D.T.和D.R.Feller(eds.)，Anti-Lipidemic DrugsMedicinal，Chemical and Biochemical Aspects，Elsevier，pp 159-195(1991))。另一方面，由于过度摄入酒精或具有高脂质含量的食品、或者感染肝炎B或C病毒有可能发生肝功能的损坏，并有可能发展为肝炎、肝硬变或肝癌。具体而言，过量摄入含脂肪的食品和酒精导致脂肪肝，其中在肝组织中沉积了大量的脂质类物质，而且血清GOT(谷氨酸-草酰乙酸转氨酶)、GPT(谷氨酸-丙酮酸转氨酶)和γ-GTP(γ-谷氨酰基转肽酶)升高(T.Banciu等人，Med.Interne.，20，69-71(1982)；以及A.Par等人，Acta.Med.Acad.Sci.Hung.，33，309-319(1976))。已进行了许多努力来研制可以抑制ACAT活性的药物；其结果是已有几种从各种微生物的培养物中分离出的化合物。此等化合物的例子包括从Aspergillus fumigatus的培养物中分离出的pyripyropenes(S.Omura等人，J.Antibiotics，46，1168-1169(1993)；以及从Pseudomonas sp.中分离出的Acaterin(S.Nagamura等人，J.Antibiotics，45，1216-1221(1992))。另外，作为高胆固醇血症的治疗剂，Merck Co.，USA已研制并销售称为Lovastatin的HMG-CoA还原酶抑制剂。但是，已知该药物会诱发肝脏中肌酸激酶增加的副作用。因此，仍有必要继续研制无毒性的ACAT和巨噬细胞-脂质复合物在动脉上皮上累积的抑制剂、以及肝病治疗剂。本专利技术的专利技术者努力由天然物质研制新型且强效的ACAT抑制剂、巨噬细胞-脂质复合物累积抑制剂以及肝病治疗剂，其结果是发现桔皮提取物具有强效ACAT抑制活性、巨噬细胞-脂质复合物累积抑制活性、以及对肝病的预防或治疗活性。目前，桔皮都被丢弃或者仅用于制造动物饲料或有机肥料。干燥的桔皮包括50-60重量％的非醇溶性聚合物，如果胶、半纤维素和纤维素；30-50重量％的醇溶性固体物质(其重量的百分之八十由葡萄糖、果糖和蔗糖组成)；以及少量或痕量的生物类黄酮、维生素、柠檬苦素类化合物、酚化合物和油。具体而言，在桔皮中存在有表1中所列的各种生物类黄酮(Horowitz，R.M.等人，J.Org.Chem.，25，2183-2187(1960))。在这些生物类黄酮中，橙皮苷是橙、柠檬和柑桔中的主要成分；柚苷是葡萄柚中的主要成分；而在枸橼中橙皮苷和柚苷的量几乎相同。表1 <p>已有报道称，从桔皮中分离的生物类黄酮物质具有抗氧、抗癌、抗病毒和降低血压的活性(Saija，A.等人，Free Radical Biol.Med.，19，481-486(1995)；Matsubara，Y.等人，Japan Organic Synthesis Chem.Association Journal，52，318-327(1994，Mar.)；Galati，E.M.等人，Farmaco.，51(3)，219-221(1996，Mar.)；Felicia，V.等人，Nutr.Cancer，26，167-181(1996)；EP 0352147 A2(1990.1.24)；以及Kaul，T.N.等人，J.Med.Viol.，15，71-75(1985))。另外，有人报道称在桔皮中存在的柠檬苦素类化合物具有抗癌活性(Lam，L.K.T.等人，Inhibition of Chemically InducedCarcinogenesis by Citrus Limonoids，In Food Phytochemicals for CancerPreventin，Vol.I，ACS Symposium series No.546，M.T.Huang，O.Osawa，C.T.Ho，R.Rosen(eds.)，1993)。但是，目前尚没有人报道桔皮提取物的ACAT抑制活性、巨噬细胞-脂质复合物累积抑制活性、以及对肝病的预防或治疗活性。专利技术简述因此，本专利技术的目的是提供桔皮提取物抑制哺乳动物中ACAT活性的新用途。本专利技术的另一个目的是提供桔皮提取物抑制哺乳动物中巨噬细胞-脂质复合物在动脉内皮壁上累积的新用途。本专利技术的再一个目的是提供桔皮提取物预防或治疗哺乳动物中肝病的新用途。附图简述参考以下附图及描述，本专利技术的上述和其他目的及优点将更为显而易见，在附图中附图说明图1A、1B、1C和1D显示了分别给药1％胆固醇、1％胆固醇及1mg/kg Lovastatin、1％胆固醇及0.1％橙皮苷、以及1％胆固醇及0.1％柚苷的兔动脉；以及图2A、2B、2C和2D代表分别给药1％胆固醇、1％胆固醇及1mg/kgLovastatin、1％胆固醇及0.1％橙皮苷、以及1％胆固醇及0.1％柚苷的兔肝脏的显微特征。专利技术详述根据本专利技术的一个方面，其提供桔皮提取物抑制哺乳动物中酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶(ACAT)活性的新用途。根据本专利技术的另一个方面，其提供桔皮提取物抑制哺乳动物中巨噬细胞-脂质复合物在动脉内皮壁上累积的新用途。根据本专利技术的再一个方面，其提供桔皮提取物预防或治疗哺乳动物中肝病的新用途。柑桔属植物可为柑桔、橙、柠檬、葡萄柚和枸橼等。优选使用经有机农业技术不使用化学杀虫剂而生产的桔属水果的皮。本专利技术的桔皮提取物可通过任何常规方法使用水或合适的溶剂如醇、氢氧化钙和氢氧化钠来制备。例如，将3-30升的20-95％乙醇加至1kg干燥桔皮中，然后使混合物在25-80℃下静置1-12小时。过滤所得的提取物，然后例如通过真空来浓缩滤液，以得到浓缩桔皮提取物。另一方面，将5-30升的0.1-2％氢氧化钙和氢氧化钠添加至1kg的干燥桔皮中，混合物在25-60℃下静置1-5小时。过滤所得的提取物，然后通过添加1N盐酸将滤液的pH调节为4.0-7.0。所得滤液在1-10℃下静置10-48小时。回收得到的沉淀物，然后干燥，由此制得桔皮提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
桔皮提取物或桔皮粉末在抑制哺乳动物中酰基ＣｏＡ－胆固醇－Ｏ－酰基转移酶（ＡＣＡＴ）活性中的应用。

【技术特征摘要】
KR 1997-10-28 1997/55580;KR 1998-3-28 1998/10888;K1.桔皮提取物或桔皮粉末在抑制哺乳动物中酰基CoA-胆固醇-O-酰基转移酶(ACAT)活性中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其中，所述哺乳动物是人。3.如权利要求1所述的应用，其中，所述桔属植物是柑桔、橙、柠檬或葡萄柚。4.如权利要求1所述的应用，其中，所述桔皮提取物是用包括以下步骤的方法制得的将3-30升的20-95％乙醇加至1kg干燥桔皮中；使混合物在25-80℃下静置1-12小时；过滤所得的提取物；然后浓缩滤液，得到桔皮提取物。5.如权利要求1所述的应用，其中，所述桔皮提取物是用包括以下步骤的方法制得的将5-30升的0.1-2％氢氧化钙和氢氧化钠添加至1kg的干燥桔皮中；使混合物在25-60℃下静置1-5小时；过滤所得的提取物；将滤液的pH调节为4.0-7.0；所得滤液在1-10℃下静置10-48小时；然后回收和干燥得到的沉淀物，制得桔皮提取物。6.如权利要求1所述的应用，其中，所述桔皮粉末是用包括以下步骤的方法制得的冻干或干燥在从桔属水果中挤出汁液后留下的固体物质；然后将该经干燥的物质粉碎为粒径为50-250μm的粉末。7.如权利要求1所述应用，其中，所述桔皮提取物或桔皮粉末以包含这些物质的组合物的形式给药于哺乳动物，所述组合物选自于以下组中药物组合物、食品组合物和饮料组合物。8.如权利要求7所述的应用，其中，在药物组合物中包含的桔皮提取物的有效量为1-1000mg/kg体重/天。9.如权利要求7所述的应用，其中，在药物组合物中包含的桔皮粉末的有效量为1-1000mg/kg体重/天。10.如权利要求7所述的应用，其中，在食品组合物中包含的桔皮提取物的含量为0.5-10重量％。11.如权利要求7所述的应用，其中，在饮料组合物中包含的桔皮提取物的含量为1-30重量％。12.如权利要求7所述的应用，其中，所述食品组合物是肉食、巧克力、小吃、糖果、意大利馅饼、由谷粉制成的食品、口香糖、乳制品、汤、肉汤、稀粥、番茄沙司、调味汁、维生素复合物、或保健食品。13.如权利要求12所述的应用，其中，所述由谷粉制成的食品是面包、蛋糕、苏打饼干、曲奇饼干、饼干、或面条。14.如权利要求7所述的应用，其中，所述饮料组合物是乳制品、蔬菜汁、果汁、茶、酒精饮料或碳酸饮料15.如权利要求7所述的应用，其中，在饮料组合物中的桔皮提取物含量为每1000ml饮料10-100g。16.桔皮提取物或桔皮粉末在抑制哺乳动物中巨噬细胞-脂质复合物累积于动脉内皮中的应用。17.如权利要求16所述的应用，其中，所述哺乳动物是人。18.如权利要求16所述的应用，其中，所述桔属植物是柑桔、橙、柠檬或葡萄柚。19.如权利要求16所述的应用，其中，所述桔皮提取物是用包括以下步骤的方法制得的将3-30升的20-95％乙醇加至1kg干燥桔皮中；使混合物在25-80℃下静置1-12小时；过滤所得的提取物；然后浓缩滤液，得到桔皮提取物。20.如权利要求16所述的应用，其中，所述桔皮提取物是用包括以下步骤的方法制得的将5-30升的0.1-2％氢氧化钙和氢氧化钠添加至1kg的干燥桔皮中；使混合物在25-60℃下静置1-5小时；过滤所得的提取物；将滤液的pH调节为4.0-7.0；所得滤液在1-10℃下静置10-48小时；然后回收和干燥得到的沉淀物，制得桔皮提取物。21.如权利要求16所述的应用，其中，所述桔皮粉末是用包括以下步骤的方法制得的冻干或干燥在从桔属水果中挤出汁液后留下的固体物质；然后将该经干燥的物...

【专利技术属性】
技术研发人员：卜成海，郑泰淑，崔明淑，文锡植，权容国，李恩淑，玄柄和，崔良圭，李哲浩，裴基焕，朴镛福，李准圣，孙光熙，权炳穆，金永国，崔度一，金成郁，黄仁奎，安贞娥，朴永培，金孝洙，崔盛俊，
申请(专利权)人：韩国科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]