器官保护溶液制造技术

本发明专利技术涉及含有聚硫酸化糖胺聚糖类的器官保护溶液。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及具有至少12.5％的硫含量的聚硫酸化糖胺聚糖类在制备用于抑制干扰素γ诱导的增量调节MHC I型、MHC II型蛋白质和ICAM1的药物制剂中的用途。本专利技术进一步涉及含有聚硫酸化糖胺聚糖类的器官保护溶液和保护体内移植器官的方法。糖胺聚糖类且特别是肝素和类肝素在制备用于治疗循环障碍的药物制剂中的用途是众所周知的。最近以来，已经描述了用于一系列其它疾病的糖胺聚糖类的用途。因此，US5,236,910中要求保护糖胺聚糖类在治疗糖尿病性肾病和神经病中的用途。van der Pijl等已经描述了低分子量肝素在相同适应症中的用途(J Americ Soc Nephrol，1997，8456-462)。US5,032,679中要求保护糖胺聚糖类在抑制平滑肌细胞增殖和相关疾病中的用途。在US4,966,894中要求保护聚硫酸化肝素在治疗由逆转录病毒导致的疾病。Gralinski等已经描述了用聚硫酸化肝素调制补体系统。在Clin Exp Immunol(1997，107578-584)中，Douglas等已经研究了用肝素、硫酸乙酰肝素或肝素样分子拮抗γ干扰素的炎症促进作用。肝素能够影响γ干扰素的免疫原性作用。当移植器官时，不需要的排斥反应时常发生。为了预防这类排斥反应，已经采用了大量不同的途径。因此且最重要的是，已经比较了供体和受体的组织相容性抗原。仅将供体和受体最大程度相同或具有极为相似组织相容性抗原的那些器官进行移植。尽管如此，但是不合需要的器官排斥仍然持续发生。例如，发生急性肾异源移植排斥，其中由T淋巴细胞识别异源-MHC抗原是需要裂解管状细胞的主要作用。进一步需要使用植入了器官的所谓“移植物抗宿主反应”即一种对来自供体免疫细胞的受体的强烈反应。形成细胞毒性T细胞和抗体以抵抗宿主生物体。为了进一步降低移植排斥的危险，在将器官摘除后立即将其冷冻并在器官保护溶液中贮存。此外，给该受体服用抑制受体免疫防御的药物。在文献中，已经描述了完整系列的器官保护溶液。因此，Collins等(Lancet，vol 2，19691219)描述了用于保存器官的胞内电解质溶液。Sacks SA(Lancet，vol 1，19731024)描述了具有渗透稳定作用的溶液。已经描述了ATP-MgCl2、AMP-MgCl2和肌苷在这类溶液中作为合适试剂(Siegel，NJ等，Am J Physiol，254F530，1983；Belzer等，Transpl Proc 16161，1984)。US4,920,004要求保护含有甘露糖醇、腺苷和ATP-MgCl2的溶液。US4,798,824和US4,873,230要求保护含有羟乙基淀粉的器官保护溶液。在US4,879,283中要求保护含有KH2PO4、MgSO4、腺苷、别嘌呤醇、棉子糖和羟乙基纤维素的溶液。它也称作威斯康星大学溶液(＝UW溶液)。据记载该溶液可用于成功保存肝、肾和心脏(Jamieson等，Transplantation，vol46，1988517；Ploeg等Transplantation，vol 46，1988191；和Wicomb WN，Transplantation，vol 47，1988733)。在US5,200，398中描述了在这类保护溶液中使用葡糖醛酸、其盐和酯类作为其它的添加剂。尽管在保护移植器官和抑制不合需要的器官排斥方面获得了成功，但是仍然存在对进一步对其进行改进的需求。因此目的是在移植之前的器官保护方面和在移植过程中以及在进一步降低器官排斥的危险方面获得进一步改进。通过使用制备用于抑制γ干扰素诱导的增量调节MHC I型、MHC II型蛋白质和ICAM 1的药物制剂的硫含量为至少12.5％(重量)的聚硫酸化糖胺聚糖类已经实现了这一目的。本专利技术还涉及含有一定量的聚硫酸化糖胺聚糖的器官保护溶液，其中所述的聚硫酸化糖胺聚糖具有至少12.5％的硫含量，该器官保护溶液适于有效维持细胞完整性和细胞存活力的药物制剂。例如，也包括器官保护溶液在内的为本专利技术用途所制备的药物制剂可以含有上述化合物作为其生理活性盐或酯类形式的游离化合物、其互变异构体和/或异构体形式或游离化合物及各种盐的组合形式。作为合适的生理上有效的盐值得注意的是例如Na、Ca或Mg盐。同样，与类似于二乙胺、三乙胺或三乙醇胺这样的有机碱形成的盐是合适的。所述药物制剂可以有利地含有至少一种游离物质或至少一种其盐形式的化合物或它们的混合物。用于本专利技术的聚硫酸化糖胺聚糖类(＝粘多糖类)是带负电荷的多糖类(＝聚糖类)，它们由二糖类的不同连接单元组成，例如，其中类似于D葡糖醛酸或L艾杜糖醛酸这样的所谓糖醛酸的一个分子以糖苷方式与类似于葡糖胺或半乳糖胺这样的氨基糖的第3或4位连接。在二糖中至少有一种糖带有可以通过氧原子或氮原子结合的带负电荷的羧酸酯或硫酸酯基团。与糖醛酸类以及与硫酸酯基团的糖胺聚糖类的反应是强酸性的。这些酸性反应基团实际上已经部分存在而是有价值的以便例如通过以合成方式将硫酸化引入化合物而达到本专利技术所需的硫酸化程度。作为硫酸化方法，文献中描述了作为实例的用硫酸和硫-氯酸的硫酸化(US4,727,063，US，4,948,881)、用硫-氯酸吡啶溶液的硫酸化(Wolfrom等，J Am Chem Soc，1953，75，1519)或用亚硝酸的硫酸化(Shively等，Biochemistry，vol 15 no 18，19763932)。其它的方法是本领域技术人员众所周知的。实例是类似于肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、软骨素或硫酸软骨素这样的天然糖胺聚糖类的硫酸化用途。硫酸乙酰肝素的结构符合肝素的结构，与后者对比其差异在于它具有较少的N和O硫酸酯基和多个正乙酰基。糖胺聚糖类可以容易地分离自诸如肠粘膜这样的动物组织或分离自猪和牛的耳。例如，使用于分离糖胺聚糖类的组织自溶并将其用强碱提取。接下来蛋白质产生凝结物且例如将其通过酸化沉淀。在施用所述沉淀的类似于乙醇或丙酮这样的极性非水溶液后，通过用有机溶剂提取而除去脂肪。通过蛋白水解消化最终将蛋白质除去而由此回收了糖胺聚糖类。例如，Charles等(Biochem J，vol 30，19361927-1933)和Coyne E在Chemistry and Biology of Heparin(Elsevier Publishers，North Holland，NY，Lunblad RL，ed 1981)中描述了用于分离肝素的方法。优选可以对分离自然来源的这些糖胺聚糖类通过如在US5,013,724中作为实例所述或如上所述将其聚硫酸化而进行另一种衍生化。通过这类聚硫酸化，糖胺聚糖类由此具有的硫含量为6-15％(重量)。为了用于本专利技术或用于药物制剂，选择硫含量至少为12.5％(重量)的聚硫酸化糖胺聚糖类。优选这类聚硫酸化糖胺聚糖类具有的硫含量为13-16％(重量)、优选13-15％(重量)、特别良好的是13.5-14.5％(重量)。将这些物质用于制备适合于抑制γ干扰素诱导的增量调节MHC I型、MHC II型蛋白质和ICAM 1的药物制剂。优选的是使用生理有效量的这类物质用于治疗和预防与γ干扰素诱导的增量调节MHC I型、MHC II型蛋白质和I本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有一定量下列成分的用于有效维持细胞完整性和细胞存活力的器官保护溶液：ａ）１０ｍｇ／ｌ－１０，０００ｍｇ／ｌ的硫含量为至少１２．５重量％的聚硫酸化糖胺聚糖类；ｂ）５－１００ｇ／ｌ羟乙基淀粉。

【技术特征摘要】
DE 1999-1-20 29900874.61.含有一定量下列成分的用于有效维持细胞完整性和细胞存活力的器官保护溶液a)10mg/l-10,000mg/l的硫含量为至少12.5重量％的聚硫酸化糖胺聚糖类；b)5-100g/l羟乙基淀粉。2.根据权利要求1所述的器官保护溶液，它含有a)10mg/l-10,000mg/l的硫含量为至少12.5重量％的聚硫酸化糖胺聚糖类；b)5-100g/l羟乙基淀粉；c)5-100mmol棉子糖。3.根据权利要求1和2所述的器官保护溶液，它含有a)10mg/l-10,000mg/l的硫含量为具有至少12.5重量％的聚硫酸化糖胺聚糖类；b)5-100g...

【专利技术属性】
技术研发人员：FJ范德伍德，B雅德，D赫尔，V劳克斯，CP劳伦兹，
申请(专利权)人：诺尔股份公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]