包含结核分枝杆菌多肽及其融合的免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术涉及含有至少两种分枝杆菌抗原的组合物和融合蛋白，以及编码所述组合物和融合蛋白的多核苷酸。本发明专利技术还涉及它们在结核病感染的治疗、预防和／或诊断中的使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般性地涉及包含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)抗原的抗原性和/或免疫原性组合的组合物，及其在结核病的诊断、治疗和预防中的用途。 相关现有技术的描述 结核是一种由感染结核分枝杆菌和分枝杆菌的其他种引起的慢性传染病。它在发展中国家是一种严重的疾病，在世界上的发达地区也成为越来越严重的问题，每年新增几百万病例。虽然感染可能在相当长一段时间内没有症状，该病最常见的表现为急性肺部炎症，导致发烧和干咳。如果不给予治疗，一般会导致严重的并发症和死亡。 虽然采用长期的抗生素疗法通常可以控制结核病，这类治疗并不能有效地防止疾病的扩散。被感染的个体可能在一段时间内没有症状，但是有传染性。此外，虽然依从治疗方案是非常关键的，但很难监控患者的行为。某些患者不完成疗程，这就造成治疗无效和形成抗药性。 为了控制结核病的扩散，有效的接种和对疾病的准确的早期诊断非常重要。目前，接种活细菌是最广泛用于诱发保护性免疫的方法。最常用于这一目的的分枝杆菌是卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin)(BCG)，它是牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)的一种无毒力菌株。但是，对BCG的安全性和有效性很有争议，在诸如美国的一些国家不给普通公众接种该药剂。 结核病的诊断一般是采用皮试来进行，包括皮下接触结核菌素PPD(纯化蛋白的衍生物)。抗原特异的T细胞反应导致注射后48-72小时在注射部位产生可测量的硬块，这表明接触过分枝杆菌抗原。但是，这种方法的敏感度和特异性一直是个问题，而且无法将接种过BCG的个体和被感染的个体区分开来。 因此，需要诊断、预防和治疗结核病的改进药剂和方法。本专利技术满足了这些需求，并能提供其他相关优势。 概述 本专利技术一般性地涉及包含至少两种异源抗原的组合物、包含所述抗原的融合多肽以及编码所述抗原的多核苷酸，其中所述抗原来自分枝杆菌的种，特别是结核分枝杆菌。本专利技术还涉及利用本专利技术所述的多肽和多核苷酸来诊断、治疗和预防分枝杆菌感染的方法。本专利技术的抗原在如文中所述联用时和/或作为融合多肽或多核苷酸时，提供提高的和意想不到的免疫原性水平，使得肺部细菌负荷下降，因此在疫苗开发方面尤其有用。 例如，本专利技术的一个方面提供了组合物，所述组合物包含免疫刺激剂和两种或多种结核分枝杆菌抗原或其免疫原片段的组合，其中所述抗原选自Rv0164(SEQ ID NO1)、Rv0496(SEQ ID NO6)、Rv2608(SEQ ID NO26)、Rv3020(SEQ ID NO36)、Rv3478 SEQ ID NO41)、Rv3619(SEQ ID NO46)、Rv3620(SEQ ID NO51)、Rv1738(SEQ IDNO11)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3810(SEQ ID NO56)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv2866(SEQ ID NO31)、Rv3876(SEQ ID NO61)、Rv0054(SEQ ID NO100)、Rv0410(SEQ ID NO106)、Rv0655(SEQ IDNO112)、Rv0831(SEQ ID NO115)、Rv1009(SEQ ID NO118)、Rv1099(SEQ ID NO121)、Rv1240(SEQ ID NO124)、Rv1288(SEQ IDNO127)、Rv1410(SEQ ID NO130)、Rv1569(SEQ ID NO133)、Rv1789(SEQ ID NO136)、Rv1818(SEQ ID NO139)、Rv1860(SEQ IDNO142)、Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv1908(SEQ ID NO148)、Rv2220(SEQ ID NO154)、Rv2032(SEQ ID NO151)、Rv2623(SEQ IDNO160)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv3310(SEQ ID NO169)、Rv3881(SEQ ID NO178)、Rv0577(SEQ IDNO184)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv2520(SEQ ID NO193)、Rv1253(SEQ ID NO196)、Rv1980(SEQ IDNO199)、Rv3628(SEQ ID NO202)、Rv1884(SEQ ID NO205)、Rv3872(SEQ ID NO208)、Rv3873(SEQ ID NO211)、Rv1511(SEQ IDNO214)和Rv3875(SEQ ID NO292)以及与上述序列具有至少80％、90％或95％同一性的抗原。 在某些实施方案中，两种或多种抗原的组合选自 (a)包含Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)和Rv2608(SEQ ID NO26)的组合； (b)包含Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合；以及 (c)包含Rv3478(SEQ ID NO41)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合。 在一个具体实施方案中，上述包含Rv2608(SEQ ID NO26)、Rv1813(SEQ ID NO16)和Rv3620(SEQ ID NO51)的(a)组合物，还包含一种或多种选自下述的抗原Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv3478(SEQ ID NO41)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv2220(SEQ ID NO154)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv0577(SEQ IDNO184)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv3619(SEQ ID NO46)和Rv3020(SEQ ID NO36)。 在更具体的实施方案中，所述组合物包含Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)、Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv2389(SEQID NO21)。 在相关具体实施方案中，所述组合物包含Rv2608(SEQ ID NO26)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)和Rv3619(SEQID NO46)。 在本专利技术的某些其他实施方案中，上述包含Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv3619(SEQ ID NO46)的(b)组合物，还包含一种或多种选自下述的抗原Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv1813(SEQ IDNO16)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv2220(SEQ IDNO154)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv3620(SEQ IDNO51)、R本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含免疫刺激剂，以及两种或多种结核分枝杆菌抗原或其免疫原性片段的组合的组合物，其中所述抗原选自Ｒｖ０１６４（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１）、Ｒｖ０４９６（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６）、Ｒｖ２６０８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６）、Ｒｖ３０２０（ＳＥＱ 　ＩＤＮＯ：３６）、Ｒｖ３４７８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４１）、Ｒｖ３６１９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４６）、Ｒｖ３６２０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５１）、Ｒｖ１７３８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１）、Ｒｖ１８１３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６）、Ｒｖ３８１０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５６）、Ｒｖ２３８９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１）、Ｒｖ２８６６（ＳＥＱ　ＩＤＮＯ：３１）、Ｒｖ３８７６（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６１）、Ｒｖ００５４（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１００）、Ｒｖ０４１０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０６）、Ｒｖ０６５５（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１２）、Ｒｖ０８３１（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１５）、Ｒｖ１００９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１８）、Ｒｖ１０９９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２１）、Ｒｖ１２４０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２４）、Ｒｖ１２８８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２７）、Ｒｖ１４１０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３０）、Ｒｖ１５６９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３３）、Ｒｖ１７８９（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３６）、Ｒｖ１８１８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３９）、Ｒｖ１８６０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４２）、Ｒｖ１８８６（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４５）、Ｒｖ１９０８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４８）、Ｒｖ２２２０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５４）、Ｒｖ２０３２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５１）、Ｒｖ２６２３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６０）、Ｒｖ２８７５（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６３）、Ｒｖ３０４４（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６６）、Ｒｖ３３１０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６９）、Ｒｖ３８８１（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７８）、Ｒｖ０５７７（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８４）、Ｒｖ１６２６（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８７）、Ｒｖ０７３３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９０）、Ｒｖ２５２０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９３）、Ｒｖ１２５３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９６）、Ｒｖ１９８０（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９９）、Ｒｖ３６２８（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０２）、Ｒｖ１８８４（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０５）、Ｒｖ３８７２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０８）、Ｒｖ３８７３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１１）、Ｒ...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-4-4 60/910,1691.包含免疫刺激剂，以及两种或多种结核分枝杆菌抗原或其免疫原性片段的组合的组合物，其中所述抗原选自Rv0164(SEQ ID NO1)、Rv0496(SEQ ID NO6)、Rv2608(SEQ ID NO26)、Rv3020(SEQ IDNO36)、Rv3478(SEQ ID NO41)、Rv3619(SEQ ID NO46)、Rv3620(SEQ ID NO51)、Rv1738(SEQ ID NO11)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3810(SEQ ID NO56)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv2866(SEQ IDNO31)、Rv3876(SEQ ID NO61)、Rv0054(SEQ ID NO100)、Rv0410(SEQ ID NO106)、Rv0655(SEQ ID NO112)、Rv0831(SEQ ID NO115)、Rv1009(SEQ ID NO118)、Rv1099(SEQ ID NO121)、Rv1240(SEQ ID NO124)、Rv1288(SEQ ID NO127)、Rv1410(SEQ ID NO130)、Rv1569(SEQ ID NO133)、Rv1789(SEQ ID NO136)、Rv1818(SEQ ID NO139)、Rv1860(SEQ ID NO142)、Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv1908(SEQ ID NO148)、Rv2220(SEQ ID NO154)、Rv2032(SEQ ID NO151)、Rv2623(SEQ ID NO160)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv3310(SEQ ID NO169)、Rv3881(SEQ ID NO178)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv2520(SEQ ID NO193)、Rv1253(SEQ ID NO196)、Rv1980(SEQ ID NO199)、Rv3628(SEQ ID NO202)、Rv1884(SEQ ID NO205)、Rv3872(SEQ ID NO208)、Rv3873(SEQ ID NO211)、Rv1511(SEQ ID NO214)和Rv3875(SEQ ID NO292)以及与上述序列具有至少90％同一性的抗原。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述两种或多种抗原的组合选自(a)包含Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)和Rv2608(SEQ ID NO26)的组合；(b)包含Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合；以及(c)包含Rv3478(SEQ ID NO41)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合。3.如权利要求2(a)所述的组合物，其中所述包含Rv2608(SEQ IDNO26)、Rv1813(SEQ ID NO16)和Rv3620(SEQ ID NO51)的组合，还包含一种或多种选自以下的抗原Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv3478(SEQ ID NO41)、Rv2875(SEQ IDNO163)、Rv2220(SEQ ID NO154)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv1626(SEQ IDNO187)、Rv3619(SEQ ID NO46)和Rv3020(SEQ ID NO36)。4.如权利要求3所述的组合物，其中所述组合包含Rv1813(SEQID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)、Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv2389(SEQ ID NO21)。5.如权利要求3所述的组合物，其中所述组合包含Rv2608(SEQID NO26)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv3620(SEQ ID NO51)和Rv3619(SEQ ID NO46)。6.如权利要求2(b)所述的组合物，其中所述包含Rv2608(SEQ IDNO26)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合，还包含一种或多种选自以下的抗原Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv2220(SEQ IDNO154)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv3620(SEQ IDNO51)、Rv3478(SEQ ID NO41)和Rv3020(SEQ ID NO36)。7.如权利要求2(c)所述的组合物，其中所述包含Rv3478(SEQ IDNO41)和Rv3619(SEQ ID NO46)的组合，还包含一种或多种选自以下的抗原Rv1886(SEQ ID NO145)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv1813(SEQ ID NO16)、Rv2875(SEQ ID NO163)、Rv2220(SEQ IDNO154)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv1626(SEQ ID NO187)、Rv3620(SEQ IDNO51)、Rv2608(SEQ ID NO26)和Rv3020(SEQ ID NO36)。8.如权利要求1所述的组合物，其中所述两种或多种抗原，或其免疫原性片段以融合多肽的形式共价连接。9.如权利要求8的组合物，其中所述融合多肽包含选自ID83(SEQID NO91)、ID94(SEQ ID NO95)、ID93(SEQ ID NO226)、ID91(SEQID NO236)、ID71(SEQ ID NO245)、ID114(SEQ ID NO251)、ID125(SEQ ID NO257)或与这些序列具有至少90％同一性的序列的氨基酸序列。10.如权利要求1所述的组合物，其中所述免疫刺激剂选自GLA、AS-2、ENHANZYNTM、MPLTM、3D-MPLTM、IFA、QS21、CWS、TDM、AGPs、含有CpG的寡核苷酸、Toll样受体激动剂、LeIF、皂甙、皂甙模拟物以及生物的和合成的脂质A、咪喹莫特、gardiquimod、雷西莫特、聚IC、鞭毛蛋白或其组合。11.分离的融合多肽，其包含两种或多种共价连接的结核分枝杆菌抗原，或其免疫原性片段的组合，其中所述抗原选自Rv0164(SEQ IDNO1)、Rv0496(SEQ ID NO6)、Rv2608(SEQ ID NO26)、Rv3020(SEQ ID NO36)、Rv3478(SEQ ID NO41)、Rv3619(SEQ ID NO46)、Rv3620(SEQ ID NO51)、Rv1738(SEQ ID NO11)、Rv1813(SEQ IDNO16)、Rv3810(SEQ ID NO56)、Rv2389(SEQ ID NO21)、Rv2866(SEQ ID NO31)、Rv3876(SEQ ID NO61)、Rv0054(SEQ ID NO100)、Rv0410(SEQ ID NO106)、Rv0655(SEQ ID NO112)、Rv0831(SEQ IDNO115)、Rv1009(SEQ ID NO118)、Rv1099(SEQ ID NO121)、Rv1240(SEQ ID NO124)、Rv1288(SEQ ID NO127)、Rv1410(SEQ IDNO130)、Rv1569(SEQ ID NO133)、Rv1789(SEQ ID NO136)、Rv1818(SEQ ID NO139)、Rv1860(SEQ ID NO142)、Rv1886(SEQ IDNO145)、Rv1908(SEQ ID NO148)、Rv2220(SEQ ID NO154)、Rv2032(SEQ ID NO151)、Rv2623(SEQ ID NO160)、Rv2875(SEQ IDNO163)、Rv3044(SEQ ID NO166)、Rv3310(SEQ ID NO169)、Rv3881(SEQ ID NO178)、Rv0577(SEQ ID NO184)、Rv1626(SEQ IDNO187)、Rv0733(SEQ ID NO190)、Rv2520(SEQ ID NO193)、Rv1253(SEQ ID NO196)、Rv1980(SEQ ID NO199)、Rv3628(SEQ IDNO202)、Rv1884(SEQ ID NO205)、Rv3872(SEQ ID NO208)、Rv3873(SEQ ID NO211)、Rv1511(SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：史蒂文G里德，格雷戈里C艾尔顿，瑞N考勒尔，
申请(专利权)人：传染性疾病研究院，
类型：发明
国别省市：US[美国]