血管发生和血管通透性调节剂及抑制剂制造技术

本发明专利技术描述调节组织中血管通透性（ＶＰ）的方法，其中使用Ｓｒｃ或修饰的Ｓｒｃ蛋白、Ｙｅｓ蛋白或修饰的Ｙｅｓ蛋白、Ｓｒｃ家族酪氨酸激酶蛋白抑制剂和可表达Ｓｒｃ或修饰Ｓｒｃ蛋白的核酸。本发明专利技术也描述抑制ＶＰ的方法，其中使用无活性Ｓｒｃ或Ｙｅｓ蛋白或其混合物、或ＣＳＫ蛋白或修饰ＣＳＫ蛋白、或编码这些蛋白的核酸，或者使用Ｓｒｃ家族酪氨酸激酶化学抑制剂如：ＰＰ１、ＰＰ２、ＰＤ１７３９５５、ＡＧＬ１８７２、ＰＤ１６２５３１、根赤壳素Ｒ２１４６和格尔德霉素，或增强ＶＰ的方法，其中使用活性Ｓｒｃ或Ｙｅｓ蛋白或其混合物、或编码这些蛋白的核酸。相关组合物和制造物也在此公开。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及医学领域，并具体地涉及调节和抑制血管通透性(VP)的方法和组合物。
技术介绍
血管发生是组织血管生成的过程，其中包括新生血管生长入组织内，又被称作新血管生成。该过程由内皮细胞和平滑肌细胞的浸润介导，据信以三种方式中的任一种进行可从已有血管出芽形成，由前体细胞从头发育形成新血管(血管生成(vasculogenesis))，或已有小血管扩大直径。Blood et al.，Bioch.Biphys.Acta，103289-118(1990)。要启动血管发生，首先内皮细胞必须解离并穿过血管基膜，其方式类似于肿瘤细胞在浸润和转移形成中使用的方式。尽管在伤口愈合和黄体生长周期中也能看到，在成年或成熟组织中一般没有血管发生。见，例如，Moses et al.，Science，2481408-1410(1990)。在新生儿生长中血管发生是一个重要过程，同时在伤口愈合中也很重要，另外它还在许多临床疾病的发病机理中起作用，包括组织炎症、关节炎、肿瘤生长、糖尿病视网膜病、视网膜新血管生成引起的黄斑变性等。这些伴随血管发生的临床表现被称为血管发生性疾病。Folkman et al.，Science，235442-447(1987)。已有建议抑制血管发生对限制肿瘤生长将是一种有益的疗法。已有建议通过以下途径抑制血管发生(1)抑制“血管发生分子”如bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)的释放，(2)中和血管发生分子，如用抗βbFGF抗体，(3)使用玻连蛋白受体的抑制剂αvβ3，和(4)抑制内皮细胞对血管生成刺激的应答。后一种策略已经引起注意，Folkmanet al.，Cancer Biology，389-96(1992)，描述了几种内皮细胞应答抑制剂，包括胶原酶抑制剂，基膜更新抑制剂，angiostaticsteroids，真菌源的血管发生抑制剂，血小板因子4，血小板反应素，关节炎药物如D-青霉胺和gold thiomalate，维生素D3类似物，α-干扰素等，它们可用于血管发生。其它建议的血管发生抑制剂见Blood etal，.Bioch.Biophys.Acta.，103289-118(1990)，Moses et al.，Science，2481408-1410(1990)，Ingber et al.，Lab.Invest.，5944-51(1988)，和美国专利No.5,092,885，No.5,112,946，No.5,192,744，No.5,202,352，No.5,753,230和No.5,766,591。然而，前述参考文献中所描述的血管发生抑制剂不包括Src蛋白。已有报道血管发生依赖于血管整合素和细胞外基质蛋白间的相互作用。Brooks et al.，Science，264569-571(1994)。进一步，已有报道血管生成性血管细胞的程序性细胞死亡(凋亡)由这种相互作用引发，它将被血管整合素αvβ3的某种拮抗剂抑制。Brooks et al.，Cell，791157-1164(1994)。近期有报道基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与玻连蛋白受体(αvβ5)的结合可用αvβ5拮抗剂抑制，并由此抑制蛋白酶的酶促功能。Brooks et al.，Cell，85683-693(1996)。已经鉴定αv整合素是血管生成性血管中存活的内皮细胞中的重要成分。特定整合素αv的整合素拮抗剂阻断不同生长因子诱导的血管发生途径。例如，血管内皮生长因子(VEGF)诱导的血管发生被整合素αvβ5拮抗剂阻断，而碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的血管发生被整合素αvβ3拮抗剂阻断。脑血管系统的特征是具有高度限制性的血脑屏障，阻止小分子渗入周围脑组织。哺乳动物血脑屏障的特性受到药理学研究的特别关注，由于高度限制性的血脑屏障，常规条件下很多药物不能穿过血管系统进入脑组织。本专利技术中意外发现，通过血管渗漏血量的测量发现，VP可以受Src或Yes的调节。进一步，VP与血管发生及其它病理症状相关。炎症诱导的血管通透性增加与水肿和肿胀有关。VEGF诱导的血管发生需要Src酪氨酸激酶活性，但bFGF诱导的血管发生则不需要，表明这两种途径中的调节和活化信号存在显著差异，鸡胚和小鼠模型中都是如此。Eliceiri et al.，Molecular Cell，4915-924(1999)。由肿瘤细胞血管生成信号引起的血管通透性改变提供了一个检验癌症相关信号途径的模型，然而，由损伤、疾病或其它血管创伤引起的血管通透性改变是组织损伤相关血管渗漏及水肿的主要原因。例如，与脑血管意外(CVA)或其它脑或脊髓组织中的血管损伤相关的脑血管疾病是神经疾病的最常见原因，也是残疾的主要来源。典型地，在CVA区域中脑或脊髓组织的破坏包括血管渗漏和/或水肿。典型地，CVA可以包括脑缺血、正常脑血流中断引起的损伤；由于血流瞬间干扰引起的脑供血不足；由于颅内或颅外动脉血管栓塞引起的梗死；出血；和动静脉畸形。缺血性中风和脑出血可突然发生，该事件的影响一般反映了脑损伤的面积。(见The Merck Manual，16thed.Chp.123，1992)。除CVA之外，中枢神经系统(CNS)感染或疾病也能影响脑和脊髓中的血管，并能引起炎症和水肿，正如以下例子，细菌性脑膜炎，病毒性脑炎和脑脓肿形成。(见The Merck Manual，16thed.Chp.125，1992)。全身性疾病状况也能弱化血管并导致血管渗漏和水肿，如糖尿病、肾病、动脉硬化等。因此，血管渗漏和水肿是关键的病理表现，这不同于并独立于癌症，它需要与多种损伤、创伤或疾病状况相关的有效的特异性治疗干预。我们发现，选择性抑制Src家族酪氨酸激酶活性可减少与组织中VP增加相关的损伤或创伤，同时导致与血管渗漏和/或水肿相关的病理学改善。专利技术概述本专利技术目的是通过酪氨酸激酶Src调节血管通透性(VP)，酪氨酸激酶Scr此处也一般称作Src，或酪氨酸激酶Yes，此处也一般地称作Yes，或通过选择性抑制Src家族酪氨酸激酶活性调节血管通透性。从而，本专利技术的一个方面包括调节哺乳动物靶组织中VP的药物组合物。本专利技术的组合物含有有治疗效果的VP调节量的酪氨酸激酶蛋白Src和Yes的混合物，它们处于可药用载体中。在含有活性Src和Yes激酶蛋白的组合物中，预期的调节是加强或增加靶组织中血管的通透性。当所需的Src蛋白为活性激酶时，优选的Src是Src-A。另一种优选的活性Src蛋白中，其527位氨基酸残基是除了酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸以外的任一种氨基酸残基。优选的活性Yes蛋白具有野生型人Yes如Yes-1蛋白的激酶活性。另一种优选的活性Yes蛋白中，其中使激酶失活的磷酸化位点被突变，使之消除或最小化磷酸化失活，这与Src的527位氨基酸残基突变成除酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸以外的任一种氨基酸残基相似。当组合物中含有无激酶活性的Src和Yes蛋白时，预期的调节是抑制或降低靶组织中血管通透性。当需要无活性Src蛋白时，优选的Src是Src 251。进一步优选的无活性Src是Src K295M。与野生型蛋白相比，优选的无活性Yes蛋白其激酶活性降低。本专利技术进一步的方面是一种药物组合物，其中含有有治疗效果的VP调节量的核本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，其中含有酪氨酸激酶蛋白Ｓｒｃ和Ｙｅｓ，同时含可药用载体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：DA彻雷斯，B埃利塞里，R保罗，
申请(专利权)人：斯克里普斯研究学院，
类型：发明
国别省市：US[美国]