通过ＣＬＥＣ－６激活人抗原呈递细胞制造技术

本发明专利技术包括利用新的抗ＣＬＥＣ－６抗体及其片段用于调控免疫细胞的活性的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
一般而言，本专利技术涉及抗原呈递和免疫细胞激活领域，具体地，涉及通 过CLEC-6 C型凝集素激活免疫细胞。
技术介绍
不限制本专利技术的范围，描述与树突细胞相关的专利技术背景。 树突细胞通过提供可溶性细胞间信号继而病原菌识别而在控制先天性 和获得性免疫的界面中起着关键作用。树突细胞的这些功能主要依赖于特定 的表面受体，"模式识别受体(PRR)"，最为典型的例子是toll样受体(TLR)和 C型凝集素或凝集素样受体(LLR)(l-3)。在目前的模式中，TLR的主要作用 是提醒DC以产生白细胞介素12 (IL-12)和其它炎症细胞因子以起始免疫应 答。C-型LLR作为巨噬细胞和DC中强大的抗原捕获和摄取机制的组成部分 发挥作用(l)。然而，与TLR相比，LLR可能具有更宽泛的生物功能，包括 细胞迁移(4)、细胞间相互作用(5)。 LLR的这些多重功能可以是由于不同于 TLR, LLR能够识别自身和非自身的事实。然而，LLR的复杂性，包括免疫 细胞中表达的众多LLR的冗余性，是对各个LLR的详细功能理解的主要障 碍之一。此外，大多数这些受体的天然配体仍然没有被鉴定出来。虽然如此， 最近研究的证据表明LLR与TLR协同在微生物感染过程中可以对激活免疫 细胞起作用(6-14)。专利技术概述本专利技术包括利用抗人CLEC-6单克隆抗体(mAb)以及鉴定它们的生物功 能的组合物和方法，其中这些生物功能是预期的抗CLEC-6 mAb及其替代物 的治疗应用的基础。本专利技术包括接触抗原呈递细胞，例如树突细胞(DC),所 述细胞表达CLEC-6并在与特定的DC激活相关的摄取抗原而导致改变的体 液和细胞免疫应答中发挥作用。本专利技术的专利技术人开发并鉴定了特异的能够激 活具有CLEC-6的细胞的试剂(agent),以及在接受这些信号的细胞中导致的 变化对免疫系统中其它细胞的影响。这些影响(单独，或者与其它信号协同(即共激活))高度预测对特定疾病状态的治疗效果或者在接种免疫中增强的保 护性效果。发现作为LLR成员之一 的CLEC-6单独或与其它细胞信号协作在激活细 胞(包括DC)方面发挥功能。CLEC-6介导的细胞激活受抗CLEC-6 mAb的诱 导，因而抗人CLEC-6 mAb或其替代物在开发针对疾病的试剂中是有用的。本专利技术包括用于增加表达CLEC-6的抗原呈递细胞的抗原呈递效力的组进行，其中抗原呈递细胞被激活。所述抗原^it细胞可以是分离的树突细胞: 外周血单核细胞、单核细胞、髓样树突细胞及它们的组合。在一个具体实施 方案中，抗原呈递细胞是已在体外与GM-CSF和IL-4、干扰素a、抗原及其 组合一起培养的分离的树突细胞、外周血单核细胞、单核细胞、B细胞、髓 样树突细胞及这些细胞的组合。所述方法还可包括用GM-CSF和IL-4激活 抗原呈递细胞的步骤，其中与CLEC-6特异性抗体或其片段的接触增加抗原 呈递细胞上的CD86和HLA-DR的表面表达。发现可以使用本专利技术用CLEC-6特异性抗体或片段激活抗原呈递细胞， 以增加抗原呈递细月包上的CD86、 CD80和HLA-DR的表面表达。如果抗原 呈递细胞是树突细胞(CD)，用CLEC-6特异性抗体和GM-CSF和IL-4激活 的DC具有图4的基因表达谱。用CLEC-6特异性抗体激活的抗原呈递细胞 分泌IL-6、 MIP-la、 MCP-1、 IP-IO、 TNFa及其组合，而如果APC是树突细 胞，则它们分泌IL-6、 MIP-la、 MCP-1、 IP-IO、 TNFa、 IL-12p40、 IL-la、 IL-lb及其组合。当激活已与GM-CSF和IL-4或干扰素a接触的树突细胞时， CLEC-6特异性抗体或其片段以及CD40配体进一步增强对树突细胞的激活。 当与GM-CSF和IL-4或干扰素a以及CLEC-6特异性抗体或其片段4妻触时， DC增加其共刺激活性。在另一个实施方案中，可以使用本专利技术的方法通过经TLR9受体和 CLEC-6凝集素共激活抗原呈递细胞来激活抗原呈递细胞，其中所述细胞增 加细胞因子和趋化因子的产生，甚至触发B细胞增殖。还发现在B细胞存 在下，用CLEC-6和LOX-l共激活抗原呈递细胞，诱导B细胞免疫球蛋白 类别转换。TLR9受体可被TLR9配体、抗TLR9抗体或其片段、抗TLR9-抗CLEC-6杂交抗体或其片段、抗TLR9-抗CLEC-6配体结合物所激活。 CLEC-6特异性抗体或其片段的例子可选自克隆12H7、 12E3、 9D5、 20H8 及它们的组合。用CLEC-6特异性抗体或其片段通过CLEC-6-受体激活的树 突细胞也激活单核细胞、树突细胞、外周血单核细胞、B细胞及它们的组合。本专利技术的再一个实施方案包括与粘附蛋白(Cohesin) /锚定蛋白 (Dockerin)对的一半(half)结合的CLEC-6特异性抗体或其片段。CLEC-6特异性抗体或其片段可以与粘附蛋白/锚定蛋白对的一半结合，而互补性一半(complementaryhalf)可以与抗原结合。抗原可以是分子、肽、蛋白质、核酸、 碳水化合物、脂质、细胞、病毒或其部分、细菌或其部分、真菌或其部分、 寄生虫或其部分。在另一个实施方案中，CLEC-6特异性抗体或其片段与粘 附蛋白/锚定蛋白对的一半结合，而该对的另一半与一种或多种细胞因子结 合，所述细胞因子选自白细胞介素，转化生长因子(TGF),成纤维细胞生长 因子(FGF)，血小板衍生生长因子(PDGF),表皮生长因子(EGF)，结締组织活 性肽(CTAP)，成骨因子，以及这些生长因子的生物活性类似物、片段和衍生 物，B/T细胞分化因子，B/T细胞生长因子，促有丝分裂细胞因子，趋化细 胞因子和趋化因子，集落刺激因子，血管生成因子，IFN-a， IFN-卩，IFN-y， IL1, IL2, 113, IL4, IL5, IL6, IL7, IL8,工9, IL10, ELll， IL12, IL13, IL14, IL15， IL16, IL17, IL18等，瘦素(leptin),肌肉生长抑制素(myostatin)， 巨噬细胞刺激蛋白，血小板衍生生长因子，TNF-a， TNF-(3, NGF, CD40L， CD137L/4画1BBL，人淋巴毒素-卩，G-CSF， M陽CSF, GM隱CSF， PDGF， IL-la， ILl-卩，IP-10, PF4, GRO, 9E3，促红细月包生成素，内皮抑素(endostatin)， 血管抑素(angiostatin), VEGF,包括卩转化生长因子(例如TGF-(31、 TGF-卩2、 TGF-p3)在内的转化生长因子(TGF)超基因家族；骨形态发生蛋白(例如 BMP-1、 BMP隱2、 BMP-3、 BMP-4、 BMP-5、 BMP-6、 BMP隱7、 BMP-8、 BMP-9); 肝素结合生长因子(成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮生长因子(EGF)、血小 板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子(IGF));抑制素(例如抑制素A、 抑制素B);生长分化因子(例如GDF-1);以及活化素(例如活化素A、活化 素B、活化素AB)。本专利技术还包括用于将髓样树突细胞与浆细胞样树突细胞分开的方法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于增加表达ＣＬＥＣ－６的抗原呈递细胞的抗原呈递效力的方法，所述方法包括使所述抗原呈递细胞与抗ＣＬＥＣ－６特异性抗体或其片段接触，其中所述抗原呈递细胞被激活。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JF班彻罗，S吴，G祖拉夫斯基，S祖拉夫斯基，李大鹏，
申请(专利权)人：贝勒研究院，
类型：发明
国别省市：US[美国]