本发明专利技术涉及具有降低的免疫原性的人工程化抗Ｂ－因子抗体及其抗原结合片段。所述人工程化抗Ｂ－因子抗体及其抗原结合片段源自鼠单克隆抗体１３７９，其在第三个短共有重复序列（“ＳＣＲ”）结构域内结合Ｂ因子，并且通过防止Ｃ３ｂＢｂ复合物的形成而选择性抑制补体旁路活化。本发明专利技术也涉及治疗补体旁路活化在其中起作用的疾病或病症的方法，和在需要其的个体中选择性抑制补体旁路活化的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
0004本专利技术涉及结合补体蛋白B因子并选择性抑制补体旁路(途径)的新型 工程改造形式的单克隆抗体及其抗原结合片段。本专利技术也总体上涉及使用这种抗 体及其抗原结合片段治疗补体旁路在其中起作用的疾病。特别是，本专利技术涉及使 用这种抗体及其抗原结合片段抑制补体旁路活化，和治疗涉及补体旁路活化的疾 病。这样的病症包括但不限于，气道高反应性和气道炎症，缺血-再灌注损伤以及 在包括人在内动物中的相关病症。
技术介绍
0005免疫系统中的某些细胞对存在于体内的外源蛋白质如细菌或病毒蛋 白质反应，产生被称为抗体或免疫球蛋白("Ig")的蛋白质。抗体结合并中和体内 的外源蛋白质。0006抗体通常牢固并特异地结合其靶蛋白抗原，从而使它们成为潜在有 用的治疗剂，用于治疗广泛的、以改变的蛋白质表达为特征的疾病。应用非人抗 体分子，已经鉴定了许多适合用于抗体-介导的疾病治疗的蛋白质耙标。然而，对 于许多治疗性应用，非-人抗体的效力和安全受到损害，因为非人Ig分子本身具有 免疫原性(即，能够诱导免疫反应)。因此，在抗体能够被批准用于治疗用途之 前，通常必须对它们进行修饰以减少或消除它们的免疫原性。抗体HumaneeringTM5产生这样的抗体，所述抗体被修饰以减少免疫原性而同时保持特异性结合其革巴抗 原的能力。0007本申请描述了可结合B因子并选择性阻止补体旁路的鼠单克隆抗体 的"人工程化"。补体旁路通常由细菌、寄生虫、病毒或真菌激活，虽然已报道IgA 抗体和某些Ig轻链也可激活该补体旁路。当循环中的B因子结合到活化的C3(C3b 或C3H20)时，旁路途径活化开始。然后这种复合物被循环中的D因子切割，产 生酶促活性片段，其或是C3bBb或是C3(H20)Bb。这两种酶可以切割循环中的C3 产生C3b，这引发炎症并同样进一歩放大了活化过程，产生正反馈环。需要B因 子来使所述旁路途径被激活。0008近来的研究显示补体的旁路途径在几种疾病的动物模型的发病机理 中发挥了重要作用。缺血/再灌注损伤后的肾内的补体活化作用几乎完全由旁路途 径介导，并且所述旁路途径在关节炎的发展中起着关键作用。也许最令人惊讶的 是，已经显示狼疮性肾炎的MRL/lpr模型中的旁路途径缺陷的小鼠受到保护，不 发生肾炎和抗磷脂介导的胎儿死亡，所述疾病模型在传统上被假定由经典补体途 径所介导。0009通过用包含融合到免疫球蛋白的B因子的第二和第三短共有重复序 列("SCR")结构域的融合蛋白注射B因子缺陷小鼠("ffi'")，产生本文描述的 获得人工程化变体的鼠抗B因子抗体。然后筛选小鼠，以得到针对B因子的抗体。 根据本领域中已知的标准程序，将来自产生抗B因子抗体的注射小鼠的脾细胞与 骨髓瘤细胞融合。得到的杂交瘤细胞之一，第1379号，产生了可在体外和体内完 全抑制补体旁路活化的IgGl抗体("mAb 1379" ) 。 mAb 1379的抗原结合Fab' 片段也完全抑制补体旁路的活化作用。产生mAb 1379的杂交瘤细胞系已经被保藏 在美国菌种保藏中心("ATCC"),保藏号为PTA-6230。0010表位作图显示mAbl379与B因子在第三SCR结构域内结合。进一 步的实验证明mAb 1379通过防止C3bBb复合物的形成来抑制补体旁路的活化。 最后，mAB 1379结合在多个哺乳动物物种中保守的表位，如由其抑制来自许多不 同物种的血清中的补体旁路活化的能力所显示的，所述不同的物种包括小鼠、大 鼠、人、狒狒、恒河猴、食蟹猴、猪、兔和马。抗B-因子抗体mAb 1379的生产 和表征被更详细地描述在美国专利公开号US 2005/0260198 Al中，其通过引用被 并入本文。0011本文引用的所有参考文献，包括专利申请和出版物因此通过引用以 其全部并入。专利技术简述0012在一方面，本专利技术提供了源自鼠单克隆抗体1379 ("mAbl379")的 人工程化(humaneered)抗B因子抗体或其抗原结合片段，其在第三个短共有重复序列(short consensus repeat) ("SCR")结构域内选择性地结合B因子，并防止C3bBb 复合物的形成，其中所述人工程化抗体或其抗原结合片段具有大约l.OxlO'8 M至 大约1.0x]0^M之间的平衡解离常数("KD")。在某些实施方式中，人工程化抗 B因子抗体或其抗原结合片段具有在大约1.0x10—9 M至9.0xl(T9 M之间、或大约 3.0xl(T9 M至7.0xl(T9M之间的KD。在某些实施方式中，人工程化抗B因子抗体 或其抗原结合片段具有大约3.7xl0-9 M或以下，大约4.5xl(r9 M或以下，大约 5.4xlO—9M或以下，或大约6.5xl(T9M或以下的KD。0013在相关方面，本专利技术提供了源自鼠单克隆抗体1379 ("mAbl379") 的人工程化抗B因子抗体及其抗原结合片段,其在第三个短共有重复序列("SCR") 结构域内选择性地与B因子结合，并且防止C3bBb复合物的形成，其中所述人工 程化抗体或其抗原结合片段具有在大约1.0xl(^M至大约1.0xl0"0M之间的KD。 在某些实施方式中，人工程化抗B因子抗体或其抗原结合片段包括Vk-区多妝和 Vh-区多妝，所述Vk-区多妝迭自SEQIDNO: 14 (TA10参考抗体)、SEQIDNO: 16 (TA101-1 Fab') 、 SEQIDNO: 18 (TA102-4 Fab')禾卩SEQIDNO: 20 (TA103-2 Fab');所述Vh-区多妝迭自SEQIDNO: 15 (TA10参考抗体)、SEQIDNO: 17 (TA101-1 Fab') 、 SEQIDNO: 19 (TA 102-4 Fab')禾卩SEQIDNO: 21 (TA103-2 Fab')。在某些实施方式中，人工程化抗B因子抗体或其抗原结合片段包括含有 SEQIDNO: 14 (TA10参考抗体)的Vr区多肽和含有SEQIDNO: 15 (TA10参考 抗体)的Vh-区多妝，并且具有6.55x1(^M或以下的Kd。在某些实施方式中，人 工程化抗B因子抗体或其抗原结合片段包括含有SEQ ID NO: 16 (TA101-1 Fab') 的Vr区多肽和含有SEQ ID NO: 17 (TA101-1 Fab')的Vh-区多妝，并且具有 4.53x10—Sm或以下的Kd。在某些实施方式中，人工程化抗B因子抗体或其抗原结 合片段包括含有SEQ ID NO: 18 (TA 102-4 Fab')的Vk-区多妝和含有SEQ ID NO: 19 (TA 102-4 Fab')的Vh-区多妝，并且具有5.40x10—9 M或以下的Kd。在某些实 施方式中，人工程化抗B因子抗体或其抗原结合片段包括含有SEQ ID NO: 20 (TA 103-2 Fab')的V^区多肽和含有SEQ ID NO: 21 (TA 103-2 Fab')的Vh-区多妝, 并且具有3.73xl(T9 M或以下的Kd。在某些实施方式中，人工程化抗B因子抗体 或其抗原结合片段包括选自Fab'、 (Fab')2、 Fv、 scFv和双抗体的抗原结合片段。在 某些实施方式中，人工程化抗-B因子抗体本文档来自技高网...
【技术保护点】
源自鼠单克隆抗体１３７９（“ｍＡｂ １３７９”）的人工程化抗Ｂ因子抗体或其抗原结合片段，其在第三个短共有重复序列（“ＳＣＲ”）结构域内选择性结合Ｂ因子并防止Ｃ３ｂＢｂ复合物的形成，其中所述人工程化抗体或其抗原结合片段具有大约１．０×１０↑［－８］Ｍ至大约１．０×１０↑［－１０］Ｍ之间的平衡解离常数（“Ｋ↓［Ｄ］”）。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：W艾米伦，VM郝勒斯，P弗林，
申请(专利权)人：泰里根治疗公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。