蛋白质UK114或其片段在治疗和预防内毒素性休克中的用途制造技术

本发明专利技术描述了蛋白质ＵＫ１１４或其片段在治疗和预防内毒素性休克中的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质UK114或其片段的应用，用于治疗和预防内毒素性休克。休克是一种临床综合征，其特征是组织灌注不足和多种临床症状如焦虑、精神错乱、昏迷、通气过度、少尿、无尿、低血压、血管收缩和血管舒张。这些症状可以非常严重以导致高死亡率(Beal A.等，JAMA，1990，271226-233)。败血症是出血和心肌梗塞之后的第三常见休克病因。尤其是，革兰氏阴性细菌是败血症性休克的主要病因，尽管真菌、立克次氏体和病毒的感染也可起作用(Beal A.等，JAMA，1990，271226-233)。在40岁以下的健康个体中内毒性休克的发作是罕见的，但糖尿病、内窥镜手术、慢性肝病、血液病和免疫抑制性药物如皮质类固醇和环孢素A的长期使用可导致其频率升高。直到现在都还没有治疗内毒性休克的治疗方法。这意味着入院患者的高死亡危险，尤其是对于革兰氏阳性感染患者，可达到约50-80％(Beal A.等，JAMA，1990，271226-233)。现在发现蛋白质UK114(在WO 96/02567和WO 00/63368中公开，此处引入作为参考)可有利地用于治疗内毒性休克，到现在为止已研究了该蛋白质的一系列治疗应用，包括治疗瘤形成(WO 96/02567)、自身免疫性疾病(WO 98/1 1909)、TNF诱导的疾病(WO 98/42366)、AIDS(WO98/11137)、以及治疗和预防移植器官排斥(WO 00/78329)。此外，发现具有10到20个氨基酸、优选12到18个氨基酸并具有相应于天然UK114蛋白第1-20位序列(N端)和第55-95位序列的序列的肽有着相同的药理学活性。因此，本专利技术还涉及所述肽和含有它们的药物组合物。本专利技术优选的肽具有下面的序列，它们分别相应于天然蛋白的第1-15位、第61-75位和第76-90位。Met-Ser-Ser-Leu-Val-Arg-Arg-Ile-Ile-Ser-Thr-Ala-Lis-Ala-Pro(SEQ ID No.1，肽1-15)Asn-Ile-Gly-Glu-Ile-Leu-Lys-Ala-Ala-Gly-Cys-Asp-Phe-The-Asn(SEQ ID No.2，肽61-75)Val-Val-Lys-Ala-Thr-Val-Leu-Leu-Ala-Asp-Ile-Asn-Asp-Phe-Ser(SEQ ID No.3，肽76-90)。尤其优选相应于第76-90位序列的肽。本专利技术还包括上面所定义的肽的功能等价肽。术语“功能等价肽”指和未修饰的肽具有同等活力的肽，该肽和所述序列相比具有保守氨基酸替代和/或缺失和/或插入和/或具有相应D型氨基酸替代和/或在氨基、羟基和硫代基团上具有衍生和/或具有逆向反转氨基酸(retro-inverted amino acid)。所述修饰在熟练技术人员的技术范围内并且可以产生对酶水解作用具有更大稳定性和/或具有不同药物动力学特征的肽。这些肽可以用常规方法制备，优选根据Merrifield法或类似方法固相合成。对于所考虑的治疗应用，UK 114蛋白和相应肽以适宜的药物组合物形式进行胃肠外给药，剂量可以由临床医生根据UK114蛋白或所用肽的药物动力学和毒理学特征并根据疾病的严重性和患者的状况(体重和年龄)很容易地确定。日剂量通常为0.1到10mg UK114或肽，以肌内或皮下的途径给药，并可任选地分成多次给药。在LPS诱导的鼠科动物休克模型上研究了本专利技术的UK114和肽的药学活性，公开于下面的实施例中。实施例给6-8周龄Balb/c小鼠施用500mcg LPS之前24小时及1小时，用溶于100μl PBS的30mcg UK114(组B)或4mcg肽76-90(组C)进行腹腔注射处理。根据与组C和B所用方案相同的方案用100μl PBS处理对照组的小鼠(组A)。另一组在施用LPS后1小时只用UK114处理(组D)。该实验方法更接近于临床实践，其中很难进行预防性干预。从LPS注射后每12小时记录每组动物的死亡率，直到第3天。如表所示，在观察期间(LPS后72小时)LPS的腹腔注射施用导致大多数对照动物(用PBS处理)的死亡。用UK114或肽76-90预防处理的动物明显受到保护而免于LPS的致命性影响，并且其死亡率显著低于对照组。该保护效果也存在于LPS给药后1小时仅用UK114药物处理的小鼠中，尽管效果不那么明显。UK114的保护效果不是简单的短暂性的，因为在随后的跟踪调查月中没有一个存活的小鼠死亡。这些数据表明施用UK114不仅能防止而且能“治愈”已知内毒性休克动物模型中LPS注射的致命作用。所得到的数据有力地暗示UK114在预防易感个体的内毒性休克和治疗已经受内毒性休克影响的个体中的重要角色。表UK114和肽76-90对小鼠中LPS诱导的内毒性休克的治疗效果。组别(n) 治疗 频率和时间*死亡率(72小时时)A(50) PBS -24，-140/50(80％)B(50) UK114-24，-114/50(28％)**C(50) 肽76-90 -24，-125/50(50％)***D(50) UK114+1 25/50(50％)****距LPS给药的小时数**p＜0.0001，对组A***p＝0.003，对组A(用卡方统计分析)。序列表<110>泽特希斯有限公司(ZETESIS S.P.A.)<120>UK 114蛋白质或其片段在治疗和预防内毒性休克中的用途<130>690pct<160>3<170>PatentIn version 3.1<210>1<211>15<212>PRT<213>山羊(Capra hireus)<400>1Met Ser Ser Leu Val Arg Arg Ile Ile Ser Thr Ala Lys Ala Pro1 5 10 15<210>2<211>15<212>PRT<213>山羊<400>2Asn Ile Gly Glu Ile Leu Lys Ala Ala Gly Cys Asp Phe Thr Asn1 5 10 15<210>3<211>15<212>PRT<213>山羊<400>3Val Val Lys Ala Thr Val Leu Leu Ala Asp Ile Asn Asp Phe Ser1 5 10 1权利要求1.蛋白质UK114或其片段在治疗和预防内毒素性休克中的用途。2.具有10到20个氨基酸并具有相应于天然UK114蛋白第1-20位序列(N端)和本文档来自技高网...

【技术保护点】
蛋白质ＵＫ１１４或其片段在治疗和预防内毒素性休克中的用途。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：A巴尔托雷利，P尼科莱蒂，A帕内拉伊，
申请(专利权)人：泽特希斯有限公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]