【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物发酵，尤其涉及一种富含蛋白硒的发酵乳的制备方法及应用。
技术介绍
1、亚硒酸钠是我国法规允许的一种用于补充硒元素的食品营养强化剂，可应用至发酵乳制品中。但是，当投加高浓度亚硒酸钠至乳制品中进行发酵时，会产生红色的单质硒沉淀，会导致发酵乳的产品外观颜色变差，味道含金属异味，影响产品的品质。
技术实现思路
1、本专利技术为了解决高浓度亚硒酸钠投入发酵乳中会变红、影响产品外观与口感的问题。提供一种富含蛋白硒的发酵乳的制备方法。
2、同时，本专利技术开发了一种富含蛋白硒的富硒发酵乳，具有改善便秘、改善营养性肥胖、改善溃疡性结肠炎、抗疲劳、改善厌食症、调节焦虑抑郁状态、提升免疫力等功效。
3、本专利技术采用的发酵菌株为长双歧杆菌长亚种dd98，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.16573。
4、具体技术方案如下：
5、一种富含蛋白硒的发酵乳的制备方法，包括以下几个步骤：
6、步骤a:选取适合发酵的种子；
7、步骤b:发酵培养基的配制：
8、脱脂乳粉40-200g/l，葡萄糖10-50g/l，低聚果糖1-5g/l，葡萄糖酸亚铁3-20mg/l，葡萄糖酸镁5-30mg/l，115℃灭菌30min；
9、步骤c:补料培养基的配制：
10、脱脂乳粉40-200g/l，葡萄糖10-50g/l，低聚果糖1-5g/l，亚硒酸钠1-50mg
11、步骤d:发酵调控方法
12、种子接种:取合格的长双歧杆菌dd98种子,经mrs液体培养基活化后，培养至活菌数约1-8×108cfu/ml,将培养好的长双歧杆菌dd98种子液以体积比3-8％的接种量接种至发酵罐中，开始发酵培养；
13、本专利技术进一步采用以上技术特征，其优点在于，本专利技术采用对种子进行活力筛查，种子的活力直接决定了其在发酵罐中的发酵效果。由于菌种需要在高浓度亚硒酸钠环境中进行发酵，过高浓度的亚硒酸钠会影响菌种的活力，因此，必须在种子阶段，提前确认种子对高浓度亚硒酸钠环境中的活力情况。本专利技术利用长双歧杆菌的β-半乳糖苷酶活力，作为活力指标，确保种子可在高亚硒酸钠的环境中仍保持较高活力。
14、生长扩培与补料培养：种子接种后培养3-5h，当发酵液中活菌数达到1-8×108cfu/ml时，开始匀速补充等体积的新鲜无菌发酵培养基，补料时间为0.5-1h；
15、具体来说，是把剩余1/2发酵体积的发酵液补充进罐，补料的时间控制为0.5-1h。补料速度和补料时间有关，如果补料时间短，补料速度也会相应变快，但是要求匀速补料。因此，此处的补料速度范围，是由后面补料时间范围决定的。
16、转化与orp调控：当补料完毕后，继续2-4h的转化培养；该阶段发酵液的orp呈不断下降趋势；当发酵液的orp过低时(低于-350mv)，则需向发酵罐内通入二氧化碳以提升orp，确保将发酵液的orp控制在-350至-250mv之间。转化阶段结束后，完成本次富硒发酵乳的制备。
17、本专利技术进一步采用以上技术特征，其优点在于，富硒发酵过程中的氧化还原电位(orp)调控，根据长期的富硒发酵经验，发现长双歧杆菌dd98中，菌体蛋白硒/总硒的比值与发酵过程中orp的变化密切相关，将orp控制在某一范围，可实现长双歧杆菌dd98中蛋白硒的高效转化，减少无机硒的残留。
18、所述步骤a包括：种子的活力筛查判断：
19、步骤a1:取≥10根装有无菌mrs液体培养基的试管，加入质量浓度为10-50mg/l的亚硒酸钠，过滤除菌。从冰箱中取出长双歧杆菌dd98的甘油保藏管，向每根试管中以体积比8-10％的接种量接种长双歧杆菌dd98菌液，于37℃厌氧培养16-18h后，取样测定每个试管的β-半乳糖苷酶的粗酶液的比活力，并进行统计；
20、步骤a2:当测得试管内β-半乳糖苷酶粗酶液的比活力≥1.5u/mg，记为“合格”。测定全部试管内的β-半乳糖苷酶粗酶液的比活力，当合格率≥90％时，可认为该种子适合用作富硒发酵乳的发酵。
21、本专利技术采用长双歧杆菌dd98，可将亚硒酸钠(无机硒)吸收至菌体内，转化合成富含硒的蛋白质，从而形成蛋白硒，避免了无机硒转化为红色的单质硒沉淀。该工艺可保证富硒发酵乳的外观色泽正常，呈乳白色或微黄色，不产生红色单质硒沉淀、无异味。
22、本专利技术进一步采用以上技术特征，其优点在于，建立了配套的富硒发酵过程控制方法，通过氧化还原电位(orp)的调控，可提高产品中蛋白硒的比例，具有更高的生物利用度。
23、长双歧杆菌dd98在发酵过程中，可以利用亚硒酸钠(无机硒)，在体内合成富含硒的蛋白质，这些整合在蛋白质上的硒称为蛋白硒，与无机硒相比，具有更高的生物利用度和安全性。本专利技术通过建立orp过程参数的调控方法，可显著提升发酵乳中转化的蛋白硒含量，使亚硒酸钠(无机硒)基本被转化完全，因此，制备的富硒发酵乳具有更好的生物利用度和安全性，并且可以提高发酵乳稳定保藏的时间。
24、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在有效改善便秘症状、促进肠道蠕动、调节肠道菌群中的应用。
25、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在缓解肥胖、改善营养性肥胖导致的体内炎症、提高身体免疫力中的应用。
26、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在缓解溃疡性结肠炎症状、降低氧化应激、修复肠道屏障中的应用。
27、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在显著提升运动耐力、显著抗疲劳效果中的应用。
28、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在显著提升幼龄厌食症小鼠的摄食量、有利于体重增长中的应用。
29、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在改善焦虑性抑郁状态、有效调控其情绪、提高体内神经递质和脑源性神经营养因子含量中的应用。
30、本专利技术还提供了富含蛋白硒的发酵乳在提升免疫力，促进淋巴细胞增殖，提高巨噬细胞的吞噬能力，加强nk细胞的活性中的应用。
31、有益效果：
32、1.通过对种子进行活力筛查，可提前预判富硒发酵的效果，有利于保障后续富硒发酵的成功率，确保产品的外观、口感，避免浪费人力、物料和时间。
33、2.通过建立氧化还原电位(orp)调控方法，可提高富硒发酵过程中无机硒的转化能力，提升菌体中蛋白硒的占比含量，并且有利于提升产品保藏过程中活菌数的稳定性。
34、3.该富硒发酵乳，可有效改善便秘症状，促进肠道蠕动，调节肠道菌群。
35、4.可有效缓解肥胖，改善营养性肥胖导致的体内炎症，提高身体免疫力。
36、5.该富硒发酵乳，可有效缓解溃疡性结肠炎症状，降低氧化应激，修复肠道屏障。
37、6.该富硒发酵乳，可显著提升运动耐力，抗疲劳效果显著。
38、7.该富硒发酵乳，可本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种富含蛋白硒的发酵乳的制备方法，其特征在于，包括以下几个步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，脱脂乳粉40-200 g/L，葡萄糖10-50 g/L，低聚果糖1-5 g/L，葡萄糖酸亚铁3-20 mg/L，葡萄糖酸镁5-30 mg/L，115℃灭菌30 min。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤C中，脱脂乳粉40-200 g/L，葡萄糖10-50 g/L，低聚果糖1-5 g/L，亚硒酸钠1-50 mg/L，115℃灭菌30 min。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤D中，包括以下几个步骤：
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵乳发酵菌株为长双歧杆菌长亚种DD98，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.16573。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A包括：种子的活力筛查判断：
7. 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A1中，加入质量浓度为10-50mg/L的亚硒酸
8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A1中厌氧培养的温度为37℃；厌氧时间为16-18h。
9.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在有效改善便秘症状、促进肠道蠕动、调节肠道菌群中的应用。
10.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在缓解肥胖、改善营养性肥胖导致的体内炎症、提高身体免疫力中的应用。
11.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在缓解溃疡性结肠炎症状、降低氧化应激、修复肠道屏障中的应用。
12.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在显著提升运动耐力、显著抗疲劳效果中的应用。
13.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在显著提升幼龄厌食症小鼠的摄食量、有利于体重增长中的应用。
14.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在改善焦虑性抑郁状态、有效调控其情绪、提高体内神经递质和脑源性神经营养因子含量中的应用。
15.如权利要求1所述的富含蛋白硒的发酵乳在提升免疫力，促进淋巴细胞增殖，提高巨噬细胞的吞噬能力，加强NK细胞的活性中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种富含蛋白硒的发酵乳的制备方法，其特征在于，包括以下几个步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤b中，脱脂乳粉40-200 g/l，葡萄糖10-50 g/l，低聚果糖1-5 g/l，葡萄糖酸亚铁3-20 mg/l，葡萄糖酸镁5-30 mg/l，115℃灭菌30 min。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤c中，脱脂乳粉40-200 g/l，葡萄糖10-50 g/l，低聚果糖1-5 g/l，亚硒酸钠1-50 mg/l，115℃灭菌30 min。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤d中，包括以下几个步骤：
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵乳发酵菌株为长双歧杆菌长亚种dd98，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.16573。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a包括：种子的活力筛查判断：
7. 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a1中，加入质量浓度为10-50mg...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘鹏宇，张根，陈代杰，陈舟舟，陈封涛，张建飞，李子祥，张骏梁，谭俊，殷瑜，
申请(专利权)人：深圳赛里奇科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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