【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体而言，涉及microrna-320簇的类似物在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用。
技术介绍
1、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，nafld)是以肝脏脂肪变性为主要特征，伴随炎症或纤维化的一类广谱慢性肝脏疾病，包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(nash)、nash相关的肝硬化以及肝细胞癌。目前全球范围内nafld的发病率约为30％，在亚洲一般人群的疾病患病率为28％-32.4％(journal of hepatology,august2023.vol.79：516-537)。而且nafld已成为全球慢性肝病的主要原因，是终末期肝病、心血管疾病，原发性肝癌的风险因素，更是当前肝移植的重要适应症，由nafld引起的全因死亡率也逐年上升，因此造成了巨大的医疗和财政负担(nature reviews gastroenterology&；hepatology，2023)。nafld的发病机制复杂多样，生活方式、遗传因素、代谢紊乱、组织炎症和肠道菌群等都参与nafld的发生发展(cell 2021；184:2537-2564)。虽然有部分靶向代谢的药物在临床试验中表现出有改善受试者肝脏病变的作用(如glp-1r激动剂semaglutide，fxr激动剂obeticholic acid，thr-β激动剂resmetirom)，但目前仍没有安全有效的、获批的治疗nafld的临床药物(nature medicine 2023；29:562-
2、微小rna(microrna,mirna)是内源表达的长度约为22个核苷酸的非编码rna，通过与靶基因信使rna的3’-utr区域互补配对而降解mrna或阻止基因翻译，从而参与基因的转录后调控。近年来大量研究证实微小rna在nafld的发生发展中具有重要的调节作用(gut2021；70:784-795)。mir-320是22个核苷酸的，高度保守且广泛表达的mirna。在人类中，mir-320家族由mir-320a、mir-320b、mir-320c、mir-320d和mir-320e组成，其中mir-320a存在于所有灵长类动物中。在小鼠中，mir-320的编码序列位于14号染色体上，前体的mir-320序列(mirbase accession:mi0000704，详见seq id no:1)经过体内的剪切后形成成熟的mir-320-3p(mirbase accession:mimat0000666，详见seq id no:2)和mir-320-5p(mirbase accession:mimat0017057，详见seq id no:3)，而研究报道mir-320-3p是高度保守的，在小鼠心、肝、肾和胰腺等多种组织中都表达丰富(int j biol sci 2021；17:402-416)，但mir-320在nafld的发生发展中的作用及机制尚无相关研究报道。
3、目前尚无关于mir-320簇类似物在肝脏疾病领域应用的相关报道。
技术实现思路
1、本专利技术提供mir-320簇的微小rna或其前体序列、衍生序列，或它们的表达载体，或它们的激动剂在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的用途。
2、本专利技术中，所述mir-320簇的微小rna是指由其前体序列(优选如seq id no:1所示)产生的mir-320家族的mirna，其实例包括但不限于，mir-320a，mir-320b，mir-320c，mir-320d，mir-320e，mir-320-3p，mir-320-5p，等等。
3、在一些实施方式中，所述mir-320簇的微小rna可以是mir-320-3p或mir-320a，其如seq id no:2所示。或者，在另一些实施方式中，所述mir-320簇的微小rna也可以是mir-320-5p，其如seq id no:3所示。
4、在一些实施方式中，所述mir-320簇的微小rna的前体序列可以如seq id no:1所示。
5、在一些实施方式中，所述衍生序列可以是指由mir-320簇的微小rna或其前体序列经由单碱基的缺失、插入和/或替换形成得到的序列。
6、在一些实施方式中，所述衍生序列可以包括含有mir-320簇的微小rna的双链rna。在一些实施方式中，所述双链rna可以进一步被修饰。
7、在一些实施方式中，所述衍生序列可以包括mir-320簇的微小rna或其前体序列经修饰的衍生物。
8、在一些实施方式中，所述mir-320簇的微小rna或其前体序列、衍生序列包含至少一个经修饰的核苷酸。
9、上述修饰包括但不限于，核苷酸的糖基修饰、核苷酸之间连接方式的修饰、胆固醇修饰、锁核苷酸修饰、肽段修饰、脂类修饰、卤素修饰、烃基修饰、核酸修饰，等等。在一些实施方式中，核苷酸的糖基修饰可以包括2-o-甲基的糖基修饰、2-o-甲氧乙酯的糖基修饰、2-氟代的糖基修饰、糖环修饰，等等。在一些实施方式中，核苷酸之间连接方式的修饰可以包括硫代硫酸修饰、磷酸烷基化修饰。在一些实施方式中，所述修饰可以包括“tt”修饰。适用于本专利技术的mirna中的修饰可以包括本文公开或本领域已知的所有类型的修饰。
10、在一些实施方式中，所述表达载体可以是指含有编码所述mir-320簇的微小rna或其前体序列、衍生序列的脱氧核糖核苷酸序列的重组载体。在一些实施方式中，所述表达载体可以包括病毒载体和非病毒载体。
11、在一些实施方式中，所述病毒载体可以使用腺病毒或腺相关病毒来构建，从而可以实现靶向肝脏过表达的效果。在一些实施方式中，所述腺相关病毒可以是血清型的腺相关病毒，所述血清型的腺相关病毒实例包括但不限于，aav2、aav5、aav8、aav9及aav-dj等。在一些实施方式中，所述表达载体可以通过以下方法得到：构建包含编码所述mir-320簇的微小rna或其前体序列、衍生序列的脱氧核糖核苷酸序列和肝脏特异性启动子，如alb、tbg和apoehcr-haat等的重组载体，利用腺病毒或腺相关病毒包装后能更好的实现靶向肝脏增加mir-320水平。
12、在一些实施方式中，所述非病毒载体可以是质粒，也可以是无载体的核酸，如反义寡核苷酸。优选地，在一些实施方式中，可以利用脂质纳米颗粒包裹、递送系统表面修饰半乳糖糖胺和靶向肝脏的外泌体等方式实现在肝脏中过表达mir-320。
13、在一些实施方式中，所述mir-320簇的微小rna或其前体序列的激动剂可以是指能够促进mir-320簇的微小rna或其前体序列表达的物质，和/或能够促进mir-320簇的微小rna或其前体序列的活性的物质。
14、在一些实施方式中，所述非酒精性脂肪性肝病可以包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(nash)、nash相关的肝硬化以及肝细胞癌。
15、本专利技术利本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.miR-320簇的微小RNA或其前体序列、衍生序列，或它们的表达载体，或它们的激动剂在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述miR-320簇的微小RNA包括miR-320a，miR-320b，miR-320c，miR-320d，miR-320e，miR-320-3p，miR-320-5p。
3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述miR-320簇的微小RNA为miR-320-3p或miR-320a，其序列如SEQ ID NO:2所示；或者所述miR-320簇的微小RNA为miR-320-5p，其序列如SEQ ID NO:3所示。
4.根据权利要求1所述的用途，其中，所述miR-320簇的微小RNA的前体序列如SEQ IDNO:1所示。
5.根据权利要求1所述的用途，其中，
6.根据权利要求5所述的用途，其中，
7.根据权利要求1所述的用途，其中，所述表达载体为含有编码所述miR-320簇的微小RNA或其前体序列、衍生序列的脱氧核糖核苷酸序列的重组载体，优
8.根据权利要求7所述的用途，其中，
9.根据权利要求1所述的用途，其中，所述miR-320簇的微小RNA或其前体序列的激动剂包括能够促进miR-320簇的微小RNA或其前体序列表达的物质，和/或能够促进miR-320簇的微小RNA或其前体序列的活性的物质。
10.根据权利要求1所述的用途，其中，所述非酒精性脂肪性肝病包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(NASH)、NASH相关的肝硬化以及肝细胞癌。
...【技术特征摘要】
1.mir-320簇的微小rna或其前体序列、衍生序列，或它们的表达载体，或它们的激动剂在制备预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述mir-320簇的微小rna包括mir-320a，mir-320b，mir-320c，mir-320d，mir-320e，mir-320-3p，mir-320-5p。
3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述mir-320簇的微小rna为mir-320-3p或mir-320a，其序列如seq id no:2所示；或者所述mir-320簇的微小rna为mir-320-5p，其序列如seq id no:3所示。
4.根据权利要求1所述的用途，其中，所述mir-320簇的微小rna的前体序列如seq idno:1所示。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：何勇，杨柳，李雯君，钱圣婴，徐添悦，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：
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