【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及crisp3基因作为骨质疏松症分子标志物的应用，属于生物医学。
技术介绍
1、骨质疏松症(osteoporosis，op)是一种以骨量下降、骨组织显微结构破坏，导致骨脆性增加为特征的全身性骨病，患者骨折风险显著升高。随着全世界范围老龄化程度的加重，骨质疏松症的发病率逐年升高。2021年的一项流行病学调查结果显示，近20年来全球骨质疏松症发生率约为18.3％，其中女性约为23.1％，男性约为11.7％。起初骨质疏松症患者的骨流失非常缓慢，患者无明显的临床症状。随着疾病的进程，当骨质疏松症导致患者发生骨折时，临床症状逐渐被察觉。骨质疏松症患者的骨折愈合较为缓慢，并且可能导致脊柱弯曲等畸形。目前，对于骨质疏松症的治疗主要以阿仑膦酸钠片、碳酸钙d3片等药物为主，此类药物对骨质疏松症的治疗均有局限性。同时，长期使用西药对骨质疏松症患者副作用较大，诱发并发症风险较高。因此，如何有效预防与治疗骨质疏松症是当务之急，且临床急需寻找一种快速、有效、准确诊断骨质疏松症的新型分子标志物。新型生物标志物与传统筛查项目的结合，将有效增加骨质疏松症的早期诊断率，从而提高骨质疏松症的治愈力。
2、富含半胱氨酸的分泌蛋白3(cysteine rich secretory protein 3，crisp3)是富含半胱氨酸分泌蛋白家族(cysteine rich secretory proteins，crisps)的第三个成员，位于人类第6号染色体。crisp3在人体组织中分布广泛，主要存在于唾液腺、胰腺、前列腺、血液和汗液等分泌物中。c
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了crisp3基因作为骨质疏松症分子标志物的应用。
2、本专利技术的技术方案如下：
3、crisp3基因作为骨质疏松症分子标志物的应用，所述应用包括crisp3基因的检测试剂在制备骨质疏松症诊断产品、骨代谢疾病诊断产品或检测成骨分化、骨形成和骨再生水平产品中的应用，或者crisp3基因的抑制剂在制备治疗骨质疏松症药物中的应用。
4、检测crisp3基因表达水平的试剂在制备骨质疏松症诊断产品中的应用，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
5、检测crisp3基因表达水平的试剂在制备骨代谢疾病诊断产品中的应用，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
6、根据本专利技术优选的，所述骨代谢疾病为骨质疏松症、骨关节炎、骨质减少或骨缺损等。
7、检测crisp3基因表达水平的试剂在制备检测成骨分化、骨形成和骨再生水平产品中的应用，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
8、根据本专利技术优选的，所述检测crisp3基因表达水平的试剂包括实时荧光定量pcr检测试剂和特异性扩增crisp3基因的引物对，可以检测成骨分化、骨形成和骨再生的水平。
9、根据本专利技术优选的，所述包括荧光定量pcr检测试剂荧光染料、实时荧光定量pcr反应液；所述实时荧光定量pcr反应液包括脱氧核苷三磷酸(dntps)、mgcl2、taqdna聚合酶和缓冲液，所述荧光染料为绿色荧光核酸染色液(sybr)。
10、根据本专利技术优选的，所述特异性扩增crisp3的引物对为seq id no.2～3所示的引物对或seq id no.4～5所示的引物对；
11、具体引物序列如下：
12、上游引物1：5′-tacagacacagtaacccaaagga-3′(seq id no.2)，
13、下游引物1：5′-tggattgcttgtgaccatgag-3′(seq id no.3)。
14、上游引物2：5′-ccaagcaggccatacctagc-3′(seq id no.4)，
15、下游引物2：5′-cgtattccagacgtttacaccaa-3′(seq id no.5)。
16、根据本专利技术优选的，所述骨质疏松症诊断产品的检测样本选自血清、血浆、全血或骨组织。
17、一种骨质疏松症诊断试剂盒，所述试剂盒包括检测crisp3基因表达水平的试剂。
18、crisp3基因抑制剂在制备治疗质疏松症的药物中的应用，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
19、根据本专利技术优选的，所述crisp3基因的抑制剂为抑制crisp3基因表达的基因抑制剂和/或化学抑制剂。
20、进一步优选的，所述基因抑制剂为crisp3基因敲减慢病毒sh-crisp3，crisp3基因敲减慢病毒sh-crisp3#1和sh-crisp3#2均为双链，其核苷酸序列如seq id no.8～9和seqidno.10～11。
21、一种治疗骨质疏松症的药物，所述药物包括crisp3基因的抑制剂或降低crisp3基因表达水平化学抑制剂。
22、有益效果：
23、1、本专利技术首次发现crisp3基因在骨质疏松症患者血清、骨质疏松症小鼠血清和骨组织中显著高表达，这表明crisp3基因可以作为一种诊断骨质疏松症的分子标志物。本专利技术还提供了crisp3基因的检测试剂在制备骨质疏松症诊断产品中的应用，主要是将crisp3基因作为检测标志物，制备相应的荧光定量pcr检测试剂盒，用于诊断骨质疏松症。此外，过表达crisp3基因能够抑制人源成骨细胞增殖能力和成骨能力，同时敲低crisp3能够显著提高人源成骨细胞增殖能力和成骨能力，说明crisp3基因抑制剂可以用于制备治疗质疏松症的药物，在研发治疗骨质疏松症药物中具有重要意义。
24、2、本专利技术首次发现crisp3基因在成骨分化过程中显著低表达，这表明crisp3基因可以作为一种检测成骨分化、骨形成或骨再生水平的分子标志物，可以用于制备骨关节炎、骨质减少或骨缺损等骨代谢疾病的诊断产品，还可以用于制备检测成骨分化、骨形成和骨再生水平产品。
25、3、本专利技术设计了特异性扩增crisp3基因的引物对，可特异性有效检测crisp3表达情况。
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1.检测CRISP3基因表达水平的试剂在制备骨质疏松症诊断产品中的应用，其特征在于，所述CRISP3基因的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。
2.检测CRISP3基因表达水平的试剂在制备骨代谢疾病诊断产品中的应用，其特征在于，所述CRISP3基因的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。
3.检测CRISP3基因表达水平的试剂在制备检测成骨分化、骨形成和骨再生水平产品中的应用，其特征在于，所述CRISP3基因的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。
4.如权利要求2所述的检测CRISP3基因表达水平的试剂在制备骨代谢疾病诊断产品中的应用，其特征在于，所述骨代谢疾病为骨质疏松症、骨关节炎、骨质减少或骨缺损。
5.如权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述检测CRISP3基因表达水平的试剂包括实时荧光定量PCR检测试剂和特异性扩增CRISP3基因的引物对，可以检测成骨分化、骨形成和骨再生的水平。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述包括荧光定量PCR检测试剂荧光染料、实时荧光定量PCR反应液；所述实时荧光定量PCR反应
7.一种骨质疏松症诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测CRISP3基因表达水平的试剂。
8.CRISP3基因抑制剂在制备治疗质疏松症的药物中的应用，其特征在于，所述CRISP3基因的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。
9.如权利要求8所述的CRISP3基因抑制剂在制备治疗质疏松症的药物中的应用，其特征在于，所述CRISP3基因的抑制剂为抑制CRISP3基因表达的基因抑制剂和/或化学抑制剂；
10.一种治疗质疏松症的药物，其特征在于，所述药物包括CRISP3基因的抑制剂或降低CRISP3基因表达水平化学抑制剂。
...【技术特征摘要】
1.检测crisp3基因表达水平的试剂在制备骨质疏松症诊断产品中的应用，其特征在于，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
2.检测crisp3基因表达水平的试剂在制备骨代谢疾病诊断产品中的应用，其特征在于，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
3.检测crisp3基因表达水平的试剂在制备检测成骨分化、骨形成和骨再生水平产品中的应用，其特征在于，所述crisp3基因的核苷酸序列如seq no.1所示。
4.如权利要求2所述的检测crisp3基因表达水平的试剂在制备骨代谢疾病诊断产品中的应用，其特征在于，所述骨代谢疾病为骨质疏松症、骨关节炎、骨质减少或骨缺损。
5.如权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述检测crisp3基因表达水平的试剂包括实时荧光定量pcr检测试剂和特异性扩增crisp3基因的引物对，可以检测成骨分化、骨形...
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