【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药品制备，具体涉及一种单酶体系高产制备艾考糊精原料药的方法。
技术介绍
1、腹膜透析(peritoneal dialysis,pd)是一种重要的肾脏替代治疗方式，主要适用于急性肾损伤、慢性肾衰竭等患者，也用于急性药物和毒物中毒等情况。艾考糊精(icodextrin)作为一种常用的新型腹膜透析液渗透剂，利用胶体渗透压差进行超滤，在提高超滤效果、保护腹膜的结构和功能及减少相关并发症等方面具有显著优势。艾考糊精是葡萄糖通过α-1,4糖苷键和低于10％的α-1,6糖苷键连接而成，重均分子量为13000-19000da，数量平均分子量为5000-6500da，与葡萄糖腹膜透析液相比，可以降低患者发生充血性心力衰竭的风险并减少对血糖的影响。中国专利cn 112979831 b公开了一种高效制备原料药艾考糊精的方法，该方法依次包括：淀粉糊化、酸解、脱色和超滤工序。首先将淀粉、不溶性有机颗粒和水在90～100℃下搅拌糊化，随后控制温度在85～100℃温度下，缓慢滴加预先配制好的酸溶液进行反应，酸解后采用活性炭与壳聚糖在ph至3～4之间常温脱色1～2次，最后采用不同分子量的超滤膜进行分子量筛选。酸法水解淀粉制备艾考糊精时，条件剧烈，水解得到的分子量分布范围较大，通过超滤进行分子量筛选时损失较大导致产率降低。
2、中国专利cn 106397616a公开了一种淀粉基腹膜透析液用艾考糊精的制备方法，该方法依次包括淀粉糊化、酶解、脱支、超滤提纯工序。首先将淀粉用磷酸盐缓冲溶液配置成淀粉溶液，并在高温下糊化、控制温度在70～95℃
3、中国专利cn 117384305 a公开了一种艾考糊精原料药的制备工艺，将酸法水解和酶法脱支相结合，该方法依次包括淀粉糊化、酸解、脱支、超滤、脱色、浓缩干燥工序。首先将淀粉原料高温糊化处理，然后在糊化液中加入酸液水解，再使用脱支酶切支，灭酶活后抽滤浓缩，随后进行次氯酸钠脱色、活性炭吸附和脱色，最后使用超滤膜组合对艾考糊精脱色精滤液进行除杂和分子量筛选，经减压浓缩、干燥，得到艾考糊精成品。
4、事实上，大多数玉米淀粉的α-1,6糖苷键含量，都在艾考糊精限定的范围内，无需用脱支酶脱支。所以，上述的两个专利技术工艺使用脱支酶增加了生产成本，且没有技术意义。中国专利cn 114605563 b公开了一种腹膜透析液用艾考糊精原料药单酶体系制备方法，该方法包括酶解、超滤、喷干工序。首先将淀粉溶液高温糊化，加入α-高温淀粉酶进行酶解，随后用酸调节ph在高温条件下灭酶活，所得酶解液经硅藻土过滤后，使用不同孔径的超滤膜进行分子量筛选，最后将超滤得到的料液喷干，即可得到腹膜透析液用艾考糊精。通过单酶体系经一次酶解过程制备艾考糊精，部分淀粉酶解不完全，在超滤工艺中进行分子量筛选时造成损失，导致产品产率降低。
5、从上述各工艺可见，在现有工艺中，分离出来的大分子糊精均被废弃，没有回收利用，从而造成很大浪费，显著降低了糊精产率。尽管这些大分子糊精超出了艾考糊精的分子量范围，不能在艾考糊精中直接使用。怎样减少浪费，是否能回收它们，重新利用？于是，本团队尝试，回收这些大分子糊精，然后再次酶解，结果表明，大部分糊精都可以被重新利用。但是，一个新问题出现了，重新酶解加入的酶，提高了生产成本，部分抵消了回收糊精的优势。怎样解决新出现的问题？本团队继续研发，终于想到，可以直接利用原来的酶，进行二次酶解。而且，没有增加新的工艺设备，直接利用现有设备。最后，本专利技术针对现有糊精生产工艺原料浪费大，糊精产率低的问题，提出创新性工艺，使用酶解反应原有α-淀粉酶，将分离出来的大分子糊精再次进行酶解，使其分子量符合艾考糊精分子量范围要求，从而大幅度提高艾考糊精产率。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种产率高、工艺简单的单酶体系高产制备腹膜透析液用艾考糊精原料药的方法，使用一种α-高温淀粉酶，经过两次酶解，结合超滤、喷雾干燥工艺得到艾考糊精，提高了淀粉利用率和艾考糊精收率，制备效率高，操作简单，适合工业化放大。本专利技术采用凝胶渗透色谱(gpc)对制备的艾考糊精产品进行重均分子量和数均分子量的检测；利用1h-nmr对产品进行α-1,6糖苷键含量的测定。经过本专利技术制备方法得到的艾考糊精产品重均分子量、数均分子量以及α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键的占比均符合艾考糊精原料药质量标准的要求。
2、本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
3、一种单酶体系高产制备艾考糊精原料药的方法，包括以下步骤：
4、(1)一次酶解：淀粉糊化罐中，将淀粉用15-35℃纯化水配置成质量浓度为5％-30％的淀粉浆溶液，加入氯化钙，并加入碱的水溶液调节ph值至5.4-7.4，搅拌升温至85-100℃并保持温度糊化30-60分钟，得糊化液，加入α-高温淀粉酶酶解40-70分钟，得酶解液1，趁热将酶解液1用硅藻土过滤，得滤液1；
5、(2)二次酶解：将步骤(1)得到的滤液1使用大孔径超滤膜分离出大分子糊精和α-高温淀粉酶，即截留液1，透过液为滤液2。截留液1返回淀粉糊化罐中，升温至80-95℃，继续反应20-30分钟，得酶解液2，将其与滤液2合并后，使用酸调节ph值至2.0-4.0，高温保持10-20分钟灭酶活后，使用大孔径超滤膜处理得透过液。
6、(3)超滤：将步骤(2)得到的透过液，即滤液3，用截留分子量为1000da-2000da的超滤膜进行超滤，得到重均分子量为13000da-19000da，数均分子量为5000da-6500da，α-1,6糖苷键的摩尔比例低于10％的截留液2；
7、(4)喷雾干燥：将超滤得到的截留液2进行喷雾干燥，得到腹膜透析液用艾考糊精，产率可达85-91％；
8、为了更好地实现本专利技术目的，其中：
9、优选地，步骤(1)中，所述淀粉为玉米淀粉、小麦淀粉、红薯淀粉和马铃薯淀粉中的一种。
10、优选地，步骤(1)中，所述淀粉浆溶液质量浓度为5％-10％。
11、优选地，步骤(1)中，所述氯化钙添加量为每克淀粉浆10-80ppm。
12、优选地，步骤(1)中，所述α-高温淀粉酶用量为每克干淀粉4-12u。
13、优选地，步骤(2)中，所述大孔径超滤膜截留分子量范围为40kd-60kd。
14、优选地，步骤(3)中，所述超滤压力为0.2-0.6mpa。
15、优选地，步骤(3)中，所述重均分子量和数均分子量使用凝胶渗透色谱(gpc)测定，α-1,6糖苷键的占比通过1h-nmr测定。
16、优选地，步骤(4)中，所述喷雾干燥操作：进料温度为本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种单酶体系高产制备艾考糊精原料药的方法，其特征在于，包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种单酶体系高产制备艾考糊精原料...
【专利技术属性】
技术研发人员：张媛媛，王秀娟，高鑫，于鹏，周亮，张晓英，温世养，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：
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