【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及一种促进睾酮分泌的胎盘活性物质及其制备方法和应用。
技术介绍
1、胎盘活性物质(胎盘活性因子)是一类在胎盘组织中存在的多种免疫调节因子，它们在生殖医学领域中具有重要的研究价值和临床应用潜力。
2、在胎盘活性因子的提取与应用领域，现有技术方案通常采用物理破碎、化学溶解或酶解法来提取胎盘组织中的活性成分。常用的方法包括酸碱溶解法、单酶酶解法和超声辅助提取法等，酸碱溶解法：通过酸碱溶解胎盘组织来提取活性因子，此方法成本较低，且操作相对简单，但酸碱处理易导致蛋白质和多肽降解，影响了活性成分的生物效应和稳定性；单酶酶解法：使用单一酶种，如胰蛋白酶或胶原酶，对胎盘组织进行酶解，从而释放出蛋白质、多肽等活性因子，此方法在一定程度上提高了提取率，但对酶解条件(温度、ph值等)要求严格，活性成分的提取效率和质量不稳定，且提取出的活性物质种类有限；超声辅助提取：将超声波破碎技术与酶解法结合，以提高细胞破壁效率和活性因子的释放，这种方法的确能提升提取效率，但设备要求高，且超声波的强度和持续时间需要精确控制，否则可能导致活性因子的降解。
3、综上所述，现有胎盘活性因子的提取方法仍存在如下问题：(1)活性成分不稳定：酸碱溶解法和超声辅助提取对活性因子的结构有一定破坏作用，导致提取物的稳定性和生物活性不足；(2)提取率和纯度较低：单酶酶解法和物理破碎方法难以充分释放胎盘中的所有活性成分，导致提取率偏低；同时，杂质去除效果不理想，影响提取物的纯度；(3)工艺一致性差：酶解、超声辅助等方法对环境和设备要求高，容易
4、因此，目前亟需一种创新的提取工艺，能够在温和条件下提高胎盘活性因子的提取效率，确保活性成分的稳定性和纯度。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供一种促进睾酮分泌的胎盘活性物质及其制备方法和应用，以实现在温和条件下高效提取高纯度的胎盘活性因子。
2、为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供了一种胎盘活性因子的制备方法，所述制备方法包括：
4、对胎盘组织进行破碎处理，将破碎处理后的胎盘组织与蛋白酶和多糖酶混合进行酶解，对酶解产物进行固液分离，收集清液，对清液进行纯化处理，得到胎盘活性因子。
5、本专利技术中，设计全新的胎盘活性因子提取方法，包括设计双酶协同低温酶解处理方法，能够在温和条件下提取胎盘活性因子，提高提取效率，获得高纯度和高活性的胎盘活性因子。
6、优选地，所述破碎处理包括对胎盘组织进行切割处理和研磨处理。
7、优选地，所述切割处理包括切割成1cm×1cm至2cm×2cm的小块。
8、优选地，所述研磨处理包括冷冻研磨处理，具体包括将切割处理后的胎盘组织置于液氮环境中冷冻研磨，得到组织颗粒。
9、优选地，所述冷冻研磨在冷冻研磨仪中进行，频率为15hz～25hz，例如可以是16、17、18、19、20、21、22、23或24hz等，时间为60s～120s，包括但不限于62、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115或118s等。
10、优选地，所述组织颗粒的直径小于500μm。
11、优选地，所述蛋白酶包括中性蛋白酶、溶菌酶或胰凝乳蛋白酶中至少一种。
12、优选地，所述多糖酶包括纤维素酶、透明质酸酶或葡聚糖酶中至少一种。
13、优选地，所述蛋白酶为中性蛋白酶、溶菌酶和胰凝乳蛋白酶，蛋白酶、溶菌酶和胰凝乳蛋白酶的质量比为(0.5～5):(0.5～5):1，例如可以是2.5:1.5:1、1.5:1:1、2.5:1.5:1、3:3:1、4:4.5:1、1:1.5:1或0.8:1.5:1等，优选为(2～3):(1～2):1。
14、优选地，所述多糖酶为纤维素酶、透明质酸酶和葡聚糖酶的质量比为(3～10):1:(1～5)，例如可以是6:1:3、4:1:4、8:1:1、5:1:2、4:1:5或9:1:3等，优选为(5～7):1:(2～4)。
15、优选地，所述蛋白酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的1.5％～2.5％，例如可以是1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.2％、2.3％或2.4％等。
16、优选地，所述多糖酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的0.5％～1.5％，例如可以是0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.3％或1.4％等。
17、优选地，所述酶解的时间为4～8h，例如可以是4.5、5、5.5、6、6.5、7或7.5h等，温度为15～20℃，例如可以是16、17、18或19℃等。
18、优选地，所述酶解的ph条件为6.5～7.5，例如可以是6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3或7.4等。
19、优选地，所述纯化处理包括进行超滤处理和纳滤处理。
20、本专利技术中，进一步设计纯化处理过程，应用超滤和纳滤相结合，将活性因子与杂质高效分离，能够更好地保留胎盘活性因子的生物活性和稳定性，同时提高产品纯度。
21、优选地，所述超滤处理的超滤膜的截留分子量为10kda～50kda，例如可以是20、30或40kda等。
22、优选地，所述纳滤处理的纳滤膜的截留分子量为200kda～1000kda，例如可以是300、400、500、600、700、800或900kda等。
23、优选地，所述超滤处理和纳滤处理的条件各自独立地为：温度20～25℃，例如可以是21、22、23或24℃等，压力为0.1mpa～0.4mpa。
24、优选地，所述破碎处理前还包括清洗的步骤。
25、优选地，所述纯化处理后还包括浓缩处理和干燥处理的步骤。
26、优选地，所述干燥处理包括冷冻干燥。
27、作为优选的技术方案，所述胎盘活性因子的制备方法包括：
28、对胎盘组织进行切割处理和研磨处理，将研磨处理后的胎盘组织与蛋白酶和多糖酶混合，所述蛋白酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的1.5％～2.5％，所述多糖酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的0.5％～1.5％，于15～20℃进行酶解4～8h；对酶解产物进行离心分离，收集清液，对清液进行超滤处理和纳滤处理，进行浓缩处理和干燥处理，得到胎盘活性因子。
29、第二方面，本专利技术提供一种胎盘活性因子，所述胎盘活性因子由第一方面所述的胎盘活性因子的制备方法制备得到。
30、第三方面，本专利技术提供第二方面所述的胎盘活性因子在制备促进tm3细胞的增殖和睾酮的分泌的试剂中的应用。
31、本专利技术制备的胎盘活性因子具有高生物活性和高稳定性，能够促进tm3细胞的增殖和睾酮的分泌，为治疗男性功能障碍提供了新的治疗手段，对胎盘提取物产本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
2.根据权利要求1所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述破碎处理包括对胎盘组织进行切割处理和研磨处理；
3.根据权利要求1或2所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括中性蛋白酶、溶菌酶或胰凝乳蛋白酶中至少一种；
4.根据权利要求1-3任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的1.5％～2.5％；
5.根据权利要求1-4任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述酶解的时间为4～8h，温度为15～20℃；
6.根据权利要求1-5任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述纯化处理包括进行超滤处理和纳滤处理；
7.根据权利要求1-6任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述破碎处理前还包括清洗的步骤；
8.根据权利要求1-7任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
9.一种胎盘活性因子，其特征在于，所述
10.权利要求9所述的胎盘活性因子在制备促进TM3细胞的增殖和睾酮的分泌的试剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
2.根据权利要求1所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述破碎处理包括对胎盘组织进行切割处理和研磨处理；
3.根据权利要求1或2所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括中性蛋白酶、溶菌酶或胰凝乳蛋白酶中至少一种；
4.根据权利要求1-3任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶的用量为破碎处理后的胎盘组织湿重的1.5％～2.5％；
5.根据权利要求1-4任一项所述的胎盘活性因子的制备方法，其特征在于，所述酶解的时间为4～8h，温度...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏伟，嵐山芮，许超，张宗明，
申请(专利权)人：广州瑞铂茵健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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