【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体是涉及一种急性肺炎抑制性齐墩果酸oa单体及应用，尤其针对病原体感染、放化疗引起的细胞因子风暴相关的急性肺炎。
技术介绍
1、肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage，am）异常激活引起一系列肺部临床表现，如新型冠状病毒sars-cov-2、流感病毒、细菌及支原体等感染通过激活巨噬细胞异常促进il-1α、il-6等一系列细胞因子/炎症因子/趋化因子表达，引起严重的急性呼吸综合征，致死率极高。此外，放、化疗性肺炎是由于肿瘤患者接受放化疗治疗时，正常肺组织受到电离辐射、化疗药物等理化因素损伤而引起的一系列细胞因子/炎症因子/趋化因子表达急剧升高，重者肺脏发生急性炎症反应、广泛纤维化，导致呼吸功能损害，甚致呼吸衰竭。
2、病原体感染激活机体免疫细胞，异常分泌大量细胞因子/炎症因子/趋化因子如gm-csf、il-1α、il-6等，引起细胞因子风暴（cytokine storm，cs）。cs临床表现为持续发热、脾肿大、肝肿大伴肝功能不全、急性呼吸窘迫综合症和多器官功能衰竭，致死率极高。cs相关疾病可以分为细胞因子风暴综合症（cytokine storm syndrome，css）和细胞因子释放综合症（cytokine release syndrome，crs）。css的发病原因是病原体感染导致机体免疫系统异常激活，促进炎性细胞因子急剧升高；crs的发病原因与car-t等细胞治疗导致的多种细胞因子il-6、il-10、tnf-α、gm-csf和ifn-γ等释放增加有关。此外，放、化疗性肺
3、糖皮质激素是目前临床治疗cs最常用的药物。然而，糖皮质激素作为广谱免疫抑制剂，抑制免疫反应和人体免疫系统对新型冠状病毒/sars-cov-2等病原体的清除，增加患者的死亡率和继发感染率，副作用较大、疗效有限。综合上述，目前临床尚缺乏疗效明确的治疗cs治疗手段，急需开发基于发病机制的新型靶点药物。
4、目前对炎症因子异常激活引起的重症急性呼吸综合征等急性肺炎尚缺乏疗效明确的靶向药物。il-6受体的单克隆抗体-托珠单抗（tocilizumab）只拮抗il-6一个细胞因子，不能有效拮抗其他多个炎症因子，疗效需临床应用进一步验证。靶向新型冠状病毒/sars-cov-2s蛋白受体—血管紧张素转换酶2（ace2）的拮抗剂正处于临床试验阶段，然而，sars-cov-2不仅可以通过ace2进入肺部巨噬细胞，也可以在抗体的辅助下通过细胞表面fcγ受体感染单核/巨噬细胞释放大量细胞因子，仍可以诱发过度的炎症反应。糖皮质激素是目前临床治疗感染性、放化疗性急性肺炎最常用药物，然而糖皮质激素作为广谱免疫抑制剂，抑制免疫反应、副作用较大、疗效有限。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供天然产物库（targetmol-natural compound library）高通量筛选特异性抑制menin/setd2相互作用的急性肺炎抑制性齐墩果酸oa单体。
2、本专利技术的另一目的在于提供所述急性肺炎抑制性齐墩果酸oa单体的应用。
3、为实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案。
4、急性肺炎抑制性齐墩果酸oa单体，分离提取自龙胆科植物獐牙菜属的青叶胆全草或女贞子的果实，其结构式如下：
5、
6、本专利技术借助天然产物库（targetmol - natural compound library）高通量筛选技术，以确定能特异性抑制menin/setd2相互作用的天然产物单体。基于前期研究明确与setd2相互作用的menin最小且高度保守的231-248片段，将纯化的set蛋白与fitc标记的该menin多肽置于384孔板，从1500个天然产物中筛选，最终获得齐墩果酸oa。
7、所述齐墩果酸oa单体能够特异性抑制menin与setd2蛋白相互作用，并通过此机制显著抑制病原体诱导的炎症因子表达。
8、利用荧光偏振（fp）实验证实oa可特异性抑制menin与setd2蛋白相互作用。通过免疫共沉淀（co-ip）、细胞热位移实验（cetsa）、gst-pull down和蛋白质印记（westernblotting）等生物化学实验，进一步证明oa对menin与setd2相互作用的抑制效果。其中，gst-pull down显示oa特异性破坏二者直接相互作用；免疫共沉淀结合western blot表明oa剂量依赖性抑制二者相互作用；细胞热位移实验揭示oa与setd2直接相互作用，且对menin蛋白热稳定性无明显影响。
9、运用schrodinger maestro软件对oa与setd2靶点蛋白进行分子对接，发现oa与靶蛋白结合良好且匹配度高。经pymol2.1软件可视化对接复合物，明确oa与setd2蛋白活性位点的gln-1623、ala-1564、glu-1592形成强氢键相互作用，同时与phe-1620、ala-1564、met-1563、tyr-1622存在疏水相互作用，这些作用有效促进复合物稳定形成。
10、本专利技术提供所述齐墩果酸oa单体在制备治疗病原体感染引起的细胞因子风暴综合症相关药物中的应用。所述病原体包括但不限于新型冠状病毒sars-cov-2、流本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.急性肺炎抑制性齐墩果酸OA单体，其特征在于，其结构式如下：
2.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备治疗病原体感染引起的细胞因子风暴综合症相关药物中的应用。
3.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备用于抑制病原体诱导的炎症因子表达的药物中的应用，特别是在制备用于治疗或预防由LPS或S-Pro激活的急性肺炎的药物中的应用。
4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述病原体包括但不限于新型冠状病毒SARS-CoV-2、流感病毒、细菌及支原体，所述齐墩果酸OA单体能剂量依赖性地抑制由SARS-CoV-2的S蛋白、细菌脂多糖LPS激活的巨噬细胞中IL-1α、IL-6细胞因子的异常表达。
5.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备用于治疗放、化疗性肺炎药物中的应用。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述齐墩果酸OA单体能够剂量依赖性地抑制电离辐射IR或顺铂DDP诱导的细胞衰老炎症因子的表达，改善因放、化疗导致的正常肺组织损伤引发的急性炎症反应。
7.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备用于抑制m
8.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备用于抑制炎症因子表达药物中应用。
9.如权利要求1所述齐墩果酸OA单体在制备用于改善急性肺损伤的药物中的应用。
10.一种治疗急性肺炎的药物组合物，其特征在于，包含权利要求1所述的齐墩果酸OA单体作为活性成分，以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
...【技术特征摘要】
1.急性肺炎抑制性齐墩果酸oa单体，其特征在于，其结构式如下：
2.如权利要求1所述齐墩果酸oa单体在制备治疗病原体感染引起的细胞因子风暴综合症相关药物中的应用。
3.如权利要求1所述齐墩果酸oa单体在制备用于抑制病原体诱导的炎症因子表达的药物中的应用，特别是在制备用于治疗或预防由lps或s-pro激活的急性肺炎的药物中的应用。
4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述病原体包括但不限于新型冠状病毒sars-cov-2、流感病毒、细菌及支原体，所述齐墩果酸oa单体能剂量依赖性地抑制由sars-cov-2的s蛋白、细菌脂多糖lps激活的巨噬细胞中il-1α、il-6细胞因子的异常表达。
5.如权利要求1所述齐墩果酸oa单体...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。