System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种用于从脂肪组织中提取蛋白的提取液及提取方法技术_技高网

一种用于从脂肪组织中提取蛋白的提取液及提取方法技术

技术编号:44967318 阅读:0 留言:0更新日期:2025-04-12 01:39
本发明专利技术提供一种用于从脂肪组织中提取蛋白的提取液及提取方法,从而弥补现有技术的不足。所述的提取液,是添加有蔗糖、EDTA、SDS、脱氧胆酸钠和Triton X‑100的PBS缓冲液;其中蔗糖、EDTA、SDS、脱氧胆酸钠和Triton X‑100的浓度如下:50mM PBS、0.25M蔗糖、0.5mM EDTA、0.5mM SDS、0.05%脱氧胆酸钠、0.06%Triton X‑100。应用本发明专利技术的提取液可以从脂肪中获得的蛋白收得率更高,和别的提取方法比较,本发明专利技术的提取液配方简单,操作方法简便,所提取的蛋白溶液清亮、纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白分离,具体涉及一种用于从脂肪组织中提取蛋白的提取液及提取方法


技术介绍

1、蛋白质是细胞内重要的分子,参与细胞的结构和功能,提取脂肪组织中的蛋白质可以用于生物学研究、药物研发等领域。

2、脂肪组织由脂肪细胞组成,周围有结缔组织和细胞外基质,并含有高水平的脂质。这些成分会干扰蛋白质的提取,特别是脂质的存在,在蛋白提取过程中会与蛋白质共沉淀,导致蛋白质样品的产量低,质量差。脂肪组织的位置和生理状态不同,脂肪组织蛋白质组成也不同,具有复杂性,提取过程也更加复杂。从培养的细胞和组织中提取总蛋白是实验室非常常见的实验步骤,从大多数类型的细胞和组织中提取总蛋白比较容易,但由于上述提到的脂肪组织成分复杂,脂质含量高,从脂肪组织中提取总蛋白是一个具有挑战性的过程。

3、目前从脂肪组织中提取总蛋白常用的方法包含有:

4、1)ripa缓冲液提取法:脂肪组织通过含有表面活性剂的缓冲液(例如ripa缓冲液)匀浆,离心后,收集脂肪层下的液体组分为蛋白质,这种方法是相对简单的,但是蛋白质的产量非常低,因为表面活性剂经常导致蛋白质形成微小颗粒导致蛋白丢失。

5、2)有机溶剂萃取tca沉淀法,包括以下三种方法:

6、a)脂肪组织通过蔗糖密度梯度离心,丙酮中加入三氯乙酸(tca)-20℃过夜沉淀蛋白。

7、b)脂肪组织用有机溶剂提取液裂解(氯仿和甲醇的混合物),也如上用tca沉淀。

8、c)脂肪组织用有机溶剂提取液(tef和氯仿)匀浆,通过离心将水相和氯仿相分离,将其上的水相和交界面去除,并通过离心蒸发干燥。

9、以上三种方法的共同问题是操作繁琐,产量低。而且用到的丙酮、氯仿等有机溶剂有气味,且使用不安全。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种用于从脂肪组织中提取蛋白的提取液及提取方法,从而弥补现有技术的不足。

2、本专利技术首先提供一种提取液,所述的提取液,是添加有蔗糖、edta、sds、脱氧胆酸钠和triton x-100的pbs缓冲液;

3、作为实施例的具体记载,所述的pbs缓冲液的浓度为50mm;

4、作为优选,所述的pbs缓冲液的ph值为7.0-7.4。

5、更进一步的,所述的提取液中,蔗糖、edta、sds、脱氧胆酸钠和triton x-100的浓度如下:50mm pbs、0.25m蔗糖、0.5mm edta、0.5mm sds、0.05%脱氧胆酸钠、0.06%tritonx-100。

6、本专利技术还提供所述的提取液的一种用途,是用于从脂肪组织中提取蛋白;

7、本专利技术再一个方面还提供一种用于从脂肪组织中提取蛋白的制品,所述的制品中还包含有上述的提取液。

8、本专利技术再一个方面还提供一种从脂肪样品中提取蛋白的方法,是使用上述的提取液来从脂肪组织中提取蛋白。

9、更进一步的,所述方法中提取液和脂肪样品的质量体积比g/ml为1:10。

10、有益效果:

11、应用本专利技术的提取液可以从脂肪中获得的蛋白收得率更高,和别的提取方法比较,本专利技术的提取液配方简单,操作方法简便,所提取的蛋白溶液清亮、纯度高。

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【技术保护点】

1.一种蛋白提取液,其特征在于,所述的蛋白提取液是添加有蔗糖、EDTA、SDS、脱氧胆酸钠和Triton X-100的PBS缓冲液。

2.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的PBS缓冲液的浓度为50mM。

3.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的PBS缓冲液的pH值为7.0-7.4。

4.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的蔗糖、EDTA、SDS、脱氧胆酸钠和Triton X-100的浓度如下:50mM PBS、0.25M蔗糖、0.5mM EDTA、0.5mM SDS、0.05%脱氧胆酸钠、0.06%Triton X-100。

5.权利要求1-4任一项所述蛋白提取液在从脂肪组织中提取蛋白的应用。

6.一种用于从脂肪组织中提取蛋白的制品,其特征在于,所述的制品中包含有权利要求1-4任一项所述蛋白提取液。

7.一种从脂肪样品中提取蛋白的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1-4任一项所述蛋白提取液来从脂肪组织中提取蛋白。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的提取液和脂肪组织的质量体积比g/ml为1:10。

...

【技术特征摘要】

1.一种蛋白提取液,其特征在于,所述的蛋白提取液是添加有蔗糖、edta、sds、脱氧胆酸钠和triton x-100的pbs缓冲液。

2.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的pbs缓冲液的浓度为50mm。

3.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的pbs缓冲液的ph值为7.0-7.4。

4.如权利要求1所述的蛋白提取液,其特征在于,所述的蔗糖、edta、sds、脱氧胆酸钠和triton x-100的浓度如下:50mm pbs、0.25m蔗糖、0.5mm edta、...

【专利技术属性】
技术研发人员:宋路红王帅赵杭娜
申请(专利权)人:杭州联科生物技术股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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