【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开涉及多功能分子复合物。具体而言，本公开涉及多功能或多特异性蛋白质复合物，例如多特异性免疫球蛋白，以及用于制备不同形式的此类复合物的平台。
技术介绍
1、特异性蛋白质复合物，其中两个或多个目标特异性部分被设计成单个分子或复合物，近年来迅速发展，并为广泛的临床和诊断应用提供了有吸引力的解决方案。例如，双特异性抗体和融合蛋白已被开发用于与多于一种抗原或同一抗原上的多于一种表位结合。与传统抗体相比，多特异性抗体具有多功能、更精确的靶向能力和更高的效力，因此在治疗各种疾病方面显示出潜力，例如，作为将效应机制重新定位到疾病相关位点的介质，并成为下一代抗体疗法的吸引力。多特异性抗体开发的主要障碍之一是难以通过传统技术(例如杂交瘤和化学缀合方法)生产足够质量和数量的材料。尽管可以使用替代的双特异性抗体平台，例如knob-in-hole，但它们也面临着抗体活性降低、稳定性差以及纯化或去除杂质困难等挑战。从成本效益和质量控制的角度来看，多特异性重组蛋白分子和抗体的内在复杂性可能会给工艺开发和制造带来挑战。
2、在fda批准的各种药物中，双特异性t细胞接合剂(bite)blinatumomab因其工程结构和对复发或难治性b系白血病或淋巴瘤的临床疗效而代表了独特的治疗前景。然而，以blinatumomab为代表的bite双特异性抗体在体内半衰期短，需要长时间连续给药，给治疗带来极大不便。此类抗体还可能引起细胞因子释放综合征(crs)，这是某些类型的免疫疗法的副作用可能出现的一系列症状(klinger m,blood 2012；119:
技术实现思路
1、本公开在多个方面解决了上述需要。
2、在一个方面，本公开提供了一种蛋白质复合物，包括：
3、(a)第一部分，包括两条免疫球蛋白轻链和两条免疫球蛋白重链，其中所述两条轻链或所述两条重链分别连接至两个二聚化/对接结构域(ddd)部分，以及
4、(b)第二部分，包括(i)锚定结构域(ad)部分和(ii)连接到所述ad部分的试剂，所述ad部分包括至少与seq id no：3或2或46的序列有70％(例如，70％和100％之间的任何数字，包括70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％，93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％和100％)同一性的序列。所述两个ddd部分形成与所述ad部分结合的二聚体。所述ddd部分的示例可以包括seq id no：1的序列和本文描述的其他序列。
5、在一个实施例中，(a)所述第一部分是特异性结合抗原或表位的靶向部分，并且(b)所述第二部分是效应物部分。所述试剂可以是效应剂。
6、在另一个实施例中，(a)所述第一部分是包括效应剂的效应物部分，并且(b)所述第二部分是靶向部分。所述试剂可以是特异性结合抗原或表位的靶向剂。
7、在又一个实施例中，所述第一部分和所述第二部分是特异性结合两种抗原或表位的两个靶向部分。所述两种抗原或表位可以相同或不同。
8、在进一步的实施例中，所述第一部分和所述第二部分是两个效应物部分，并且所述试剂是效应剂。两种效应剂可以相同或不同。
9、在第二方面，本公开提供了一种融合蛋白，其包括(i)二聚化/对接结构域(ddd)部分和(ii)与所述ddd部分融合的免疫球蛋白轻链，或与所述ddd部分融合的免疫球蛋白轻链片段，或与所述ddd部分融合的免疫球蛋白重链，或与所述ddd部分融合的免疫球蛋白重链片段。所述免疫球蛋白重链可包括fc区或其片段。
10、在上述蛋白质复合物或融合蛋白中，所述ddd部分或所述ad部分可以融合在多肽链的任何合适的位置(例如，n末端、c末端或中间)。
11、在一些实施例中，每个ddd部分可以插入每个免疫球蛋白重链中。例如，所述ddd部分可插入所述免疫球蛋白重链的铰链区、变异铰链区或杂合铰链区或其铰链侧翼区中。
12、在一些实施例中，每个ddd部分可以融合至每个免疫球蛋白轻链的c末端。在一些示例中，所述ddd部分可以经由接头序列融合至所述免疫球蛋白轻链的c末端。所述接头序列可包括至少一个半胱氨酸，并且所述蛋白质复合物可包括两个接头序列之间的二硫键。两个接头序列之间的二硫键有助于形成稳定的连接序列结构。
13、在上述蛋白质复合物或融合蛋白中，每个ddd部分可以融合至每个免疫球蛋白重链的c末端。
14、上述蛋白质复合物中的靶向部分可以特异性结合肿瘤相关抗原或疾病相关抗原。所述肿瘤相关抗原或所述疾病相关抗原的示例包括但不限于trop2、epcam、gprc5、fcrh5、rorl、bcma、cd15、cd16、cd19、cd20、cd22、cd27、cd30、cd33、cd40、cd47、cd40l、cd66、cd70、cd74、cd79b、cd80、cd95、cd133、cd160、cd166、cd229、muc1、muc5、muc16、igf-1r、egfr、her2、her3、egp2、hla-dr、tnf-a、trail受体、icos、icosl、vegf、vegfr、缺氧诱导因子(hif)、flt-3、叶酸受体、tdgf1、tfr、间皮素、psma、ceacam5、ceacam6、b7、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、ifn-λ、il-1β、il2、il6、il-6r、il-15、il-15r、il-17、il-17r、il-12、c1r、c1s、c2、c3、c5、c5a、c5ar1、c6、masp、msap2、masp3、fb、fd、备解素、lag-3、ctla-4、pd-1、pd-l1、tim3、sirpa、tigit、ox40、ox40l、4-1bb、nkg2a、nkg2b、btla、gitr、gitrl、tcr、nectin-4、c-met、liv1、间皮素、dll3、dll4、组织因子、tgf-β、tgf-β受体、dkk1和cldn18.2。
15、在蛋白质复合物的一些实施例中，所述免疫球蛋白轻链可包括轻链可变区，所述轻链可变区可包括lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中lcdr1、lcdr2和lcdr3包括seq id no：21-23的各序列。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种蛋白质复合物，包括：
2.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
3.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
4.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
5.一种融合蛋白，包括：
6.根据权利要求1-5中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，每个DDD部分插入到每个免疫球蛋白重链中。
7.根据权利要求6所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述DDD部分插入到所述免疫球蛋白重链的铰链区或其侧翼区。
8.根据权利要求1-5中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，每个DDD部分融合到每个免疫球蛋白轻链的C末端。
9.根据权利要求8所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述DDD部分经由接头序列融合到所述免疫球蛋白轻链的C末端。
10.根据权利要求9所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述接头序列包括至少一个半胱氨酸，并且所述蛋白质复合物包括两个接头序列之间的二硫键。
11.根据权利要求1-5中任一项所
12.根据权利要求2-4和6-11中任一项所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述靶向部分特异性结合肿瘤相关抗原或疾病相关抗原。
13.根据权利要求12所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述肿瘤相关抗原或所述疾病相关抗原为Trop2、EpCAM、GPRC5、FcRH5、ROR1、BCMA、CD15、CD16、CD19、CD20、CD22、CD27、CD30、CD33、CD40、CD47、CD40L、CD66、CD70、CD74、CD79b、CD80、CD95、CD133、CD160、CD166、CD229、MUC1、MUC5、MUC16、IGF-1R、EGFR、HER2、HER3、EGP2、HLA-DR、TNF-α、TRAIL受体、ICOS、ICOSL、VEGF、VEGFR、缺氧诱导因子(HIF)、Flt-3、叶酸受体、TDGF1、TfR、间皮素、PSMA、CEACAM5、CEACAM6、B7、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ、IL-1β、IL2、IL6、IL-6R、IL-15、IL-15R、IL-17、IL-17R、IL-12、C1r、C1s、C2、C3、C5、C5a、C5aR1、C6、MASPs、MSAP2、MASP3、FB、FD、备解素、Lag-3、CTLA-4、PD-1、PD-L1、TIM3、SIRPα、TIGIT、OX40、OX40L、4-1BB、NKG2A、NKG2B、BTLA、GITR、GITRL、TCR、Nectin-4、c-Met、LIV1、间皮素、DLL3、DLL4、组织因子、TGF-β、TGF-β受体、DKK1或CLDN18.2。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，
15.根据权利要求14所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，
16.根据权利要求14所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，
17.根据权利要求2-4和6-16中任一项所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述效应剂包括抗体或其抗原结合片段、适体、配体、细胞毒素、化疗剂、可检测的标记或标签、药物、前药、毒素、酶、免疫调节剂、检查点抑制剂、抗血管生成剂、促凋亡剂、细胞因子、生长因子、激素、细胞因子、放射性同位素、蛋白质、肽、肽模拟物、多核苷酸、RNAi低聚糖、天然或合成的聚合物、纳米颗粒、量子点、有机化合物或无机化合物。
18.根据权利要求17所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合免疫细胞上的标记物。
19.根据权利要求18所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合T细胞特异性标记物。
20.根据权利要求19所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述T细胞特异性标记物为CD3。
21.根据权利要求20所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：
22.根据权利要求1-21中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白、或根据权利要求17-21中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其进一步包括变体Fc恒定区。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述DDD部分包括SEQ ID NO：1的序列。
24.一种或多种核酸序列，其编码根据权利要求1-23中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白。...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种蛋白质复合物，包括：
2.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
3.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
4.根据权利要求1所述的蛋白质复合物，其特征在于，
5.一种融合蛋白，包括：
6.根据权利要求1-5中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，每个ddd部分插入到每个免疫球蛋白重链中。
7.根据权利要求6所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述ddd部分插入到所述免疫球蛋白重链的铰链区或其侧翼区。
8.根据权利要求1-5中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，每个ddd部分融合到每个免疫球蛋白轻链的c末端。
9.根据权利要求8所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述ddd部分经由接头序列融合到所述免疫球蛋白轻链的c末端。
10.根据权利要求9所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，所述接头序列包括至少一个半胱氨酸，并且所述蛋白质复合物包括两个接头序列之间的二硫键。
11.根据权利要求1-5中任一项所述的蛋白质复合物或融合蛋白，其特征在于，每个ddd部分融合到每个免疫球蛋白重链的c末端。
12.根据权利要求2-4和6-11中任一项所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述靶向部分特异性结合肿瘤相关抗原或疾病相关抗原。
13.根据权利要求12所述的蛋白质复合物，其特征在于，所述肿瘤相关抗原或所述疾病相关抗原为trop2、epcam、gprc5、fcrh5、ror1、bcma、cd15、cd16、cd19、cd20、cd22、cd27、cd30、cd33、cd40、cd47、cd40l、cd66、cd70、cd74、cd79b、cd80、cd95、cd133、cd160、cd166、cd229、muc1、muc5、muc16、igf-1r、egfr、her2、her3、egp2、hla-dr、tnf-α、trail受体、icos、icosl、vegf、vegfr、缺氧诱导因子(hif)、flt-3、叶酸受体、tdgf1、tfr、间皮素、psma、ceacam5、ceacam6、b7、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、ifn-λ、il-1β、il2、il6、il-6r、il-15、il-15r、il-17、il-17r、il-12、c1r、c1s、c2、c3、c5、c5a、c5ar1、c6、masps、msap2、masp3、fb、fd、备解素、lag-3、ctla-4、pd-1、pd-l1、tim3、sirpα、tigit、ox40、ox40l、4-1bb、nkg2a、nkg2b、btl...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘冬林，
申请(专利权)人：准星生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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