【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及海洋生物资源高效开发利用，特别是涉及一种利用海参副产物制备海参多糖的方法。
技术介绍
1、海参副产物(如内脏、漂烫液等)在海参加工过程中常被视为废弃物，大量丢弃不仅污染环境，还造成了高营养成分的浪费。这些副产物富含多糖、蛋白质和其他活性物质，但市场上缺乏高纯度的海参多糖原料，且高分子量的海参多糖在人体中的吸收利用率有限，限制了其在高附加值功能性食品和保健品领域的开发潜力。
2、传统多糖提取方法常采用碱提取法和热水浸提法等传统工艺，存在提取效率低、过程复杂和多糖活性不稳定的缺点，难以制备高纯度、高活性产品。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种利用海参副产物制备海参多糖的方法，不仅解决了废弃海参副产物的资源化难题，还制备出具有明确α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性的低分子量海参多糖，显著提升了其降血糖活性，为功能性食品的开发提供了技术支撑。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、本专利技术提供了一种利用海参副产物制备海参多糖的方法，包括以下步骤：
4、1)将海参副产物经蛋白酶酶解、灭酶和离心，得到上清液；
5、2)将所述步骤1)得到的上清液进行醇沉、静置，离心得到沉淀；
6、3)将所述步骤2)得到的沉淀使用分子量为8～14kda的透析袋透析，冷冻干燥，得到海参粗多糖；
7、4)将所述步骤3)得到的海参粗多糖配制成海参粗多糖溶液，再与过氧化氢、抗坏血酸
8、所述海参粗多糖溶液的浓度为5mg/ml；
9、所述混合料中过氧化氢的浓度为10～30mmol/l；
10、所述混合料中抗坏血酸的浓度为10～30mmol/l；
11、所述降解的条件包括：温度为30～70℃，时间为0.5～2.5h；
12、5)调节所述步骤4)降解料的ph值至中性，依次进行醇沉、静置和离心，得到沉淀；
13、6)将所述步骤5)得到的沉淀使用分子量为500da的透析袋透析，冷冻干燥，得到海参多糖。
14、优选的，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20mmol/l，抗坏血酸的浓度为20mmol/l。
15、优选的，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20.52mmol/l，抗坏血酸的浓度为20.52mmol/l。
16、优选的，所述步骤4)降解的条件包括：温度为50℃，时间为1h。
17、优选的，所述步骤4)降解的条件包括：温度为51℃，时间为0.95h。
18、优选的，所述步骤1)蛋白酶包括木瓜蛋白酶；
19、所述酶解的条件包括：温度为60℃，时间为24h；
20、所述海参副产物与缓冲液、蛋白酶混合后再酶解，所述海参副产物的质量与缓冲液的体积比为1g:20ml；所述蛋白酶在缓冲液中的质量百分含量为10％；
21、所述缓冲液中乙二胺四乙酸的浓度为5mmol/l，半胱氨酸的浓度为5mmol/l，乙酸钠的浓度为0.1mol/l，所述缓冲液的ph值为6.0；
22、所述灭酶的条件包括：温度为100℃，时间为15min；
23、所述离心的条件包括：转速为6000rpm，时间为10min。
24、优选的，所述步骤2)醇沉的条件包括：将所述上清液和无水乙醇混合后醇沉，所述上清液和无水乙醇的体积比为1:4；
25、所述静置的条件包括：在4℃下静置过夜；
26、所述离心的条件包括：4000r/min离心10min。
27、优选的，所述步骤3)和6)冷冻干燥的条件都包括-80℃冷冻干燥12h。
28、优选的，所述步骤5)使用浓度为0.01mol/l氢氧化钠溶液调节降解料的ph值；
29、所述醇沉的条件包括：将所述降解料和无水乙醇混合后醇沉，所述降解料和无水乙醇的体积比为1:4；
30、所述静置的条件包括：在4℃下静置过夜；
31、所述离心的条件包括：4000r/min离心10min。
32、优选的，所述步骤5)冷冻干燥后还进行纯化，得到海参多糖；
33、所述纯化的条件包括：采用100kda的超滤膜分级，选用24×500mm的层析柱，洗脱流速为0.5ml/min，经过sephadex g-100葡聚糖凝胶柱和sephadex g-10葡聚糖凝胶柱分离纯化，利用苯酚-硫酸法测定吸光度，绘制洗脱曲线并收集，透析后进行冷冻干燥，得到海参多糖。
34、本专利技术的核心创新是利用酶解联合绿色高效的非金属fenton反应技术，通过酶解出去蛋白质成分，通过过氧化氢和抗坏血酸产生羟基自由基，选择性断裂多糖链的糖苷键，同时保留其关键活性基团(如硫酸化基团)。与传统物理、化学和生物降解方法相比，该联用方法具有以下显著优势：
35、反应条件温和：避免高温或极端ph环境对多糖活性的破坏。
36、高降解效率：实现多糖分子量快速降低，提高人体肠道的吸收利用率。
37、环保无污染：摒弃了金属离子催化，避免对环境和产品的潜在危害。
38、通过此创新工艺，不仅解决了废弃海参副产物的资源化难题，还制备出具有明确α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性的低分子量海参多糖，显著提升了其降血糖活性，为功能性食品的开发提供了技术支撑。
39、此外，与常规方法相比，非金属fenton反应体系在不破坏海参多糖活性结构基团和功能性的前提下，大幅度提高了产品纯度和生物活性。开发这种高效的制备方法，为推动海参深加工产业的转型升级和低值副产物高值化利用提供了理论依据和技术基础。
40、降血糖活性提升：经fenton降解后，海参多糖对α-淀粉酶的抑制率达到56.23％，对α-葡萄糖苷酶的抑制率高达90.22％，显著高于未经处理的粗多糖。
41、降解效率高：多糖降解得率达到90％，降解后的多糖活性更强，表现出浓度依赖性。
42、纯度与结构优化：经纯化后的海参多糖总糖含量高达86.39％，硫酸根含量20.90％，硫酸化程度高，能够显著促进葡萄糖代谢关键基因的表达，稳定血糖水平。
43、产业化与经济价值：利用低成本海参副产物作为原料，大幅降低生产成本。
44、提取工艺绿色环保、易于规模化生产，具备显著的经济和社会效益。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种利用海参副产物制备海参多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20mmol/L，抗坏血酸的浓度为20mmol/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20.52mmol/L，抗坏血酸的浓度为20.52mmol/L。
4.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)降解的条件包括：温度为50℃，时间为1h。
5.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)降解的条件包括：温度为51℃，时间为0.95h。
6.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)蛋白酶包括木瓜蛋白酶；
7.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)醇沉的条件包括：将所述上清液和无水乙醇混合后醇沉，所述上清液和无水乙醇的体积比为1:4；
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)和6)冷冻干燥的条件都包括：-80℃冷冻干燥12h。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)冷冻干燥后还进行纯化，得到海参多糖；
...【技术特征摘要】
1.一种利用海参副产物制备海参多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20mmol/l，抗坏血酸的浓度为20mmol/l。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)混合料中过氧化氢的浓度为20.52mmol/l，抗坏血酸的浓度为20.52mmol/l。
4.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)降解的条件包括：温度为50℃，时间为1h。
5.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)降解的条件包括：温度为51℃，时间为0.95h。
【专利技术属性】
技术研发人员：曹汝鸽，谭阅文，赵晓昱，孙永军，鞠文明，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。