【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种多肽自组装protac降解剂及其制备方法与应用。
技术介绍
1、foxm1(forkheadbox m1)是一种转录因子，在细胞周期调控、增殖、dna损伤修复和肿瘤发生发展中起着关键作用。而且foxm1在多种癌症中表现出过度表达，包括乳腺癌、肺癌、肝癌、结肠癌和前列腺癌等。foxm1过表达与多种肿瘤的增殖、转移、耐药及不良预后密切相关。foxm1作为抗肿瘤的靶点具有很大的潜力，针对foxm1的治疗策略有望为癌症患者提供新的治疗选择。大多数疾病的发生和发展皆和蛋白的异常表达或聚集相关，针对此类疾病的病理机制，传统的药物研发思路是研发小分子抑制剂或者蛋白类抑制剂，通过占据和阻断靶标蛋白的活性作用位点，抑制蛋白的功能活性。多个临床前研究已经表明，通过抑制foxm1的活性可以抑制肿瘤的生长和转移，延长生存时间。例如，thiostrepton和fdi-6等小分子已被证明可以有效抑制foxm1的活性并抑制肿瘤细胞的增殖。尽管针对foxm1的研究取得了一些进展，然而由于缺乏明确的药物结合位点和大的相互作用界面，foxm1抑制剂在临床药理学中的应用仍然具有挑战性。一方面，小分子化合药物需要有很大的剂量以及足够的亲和力来保证足够的结合率，但较大剂量可能产生毒副作用，还可能产生脱靶效应；另一方面，小分子抑制剂易引起蛋白代偿性增加或基因突变，导致耐药性的产生。foxm1在正常细胞周期调控中也起重要作用，如何在不影响正常细胞功能的前提下特异性抑制肿瘤细胞中的foxm1是一个挑战。
2、蛋白质降解靶向嵌合体
3、合理设计的给药系统通过改善protacs的理化性质或作为运输载体，增加其组织特异性和细胞内蓄积，提高降解效率和减少副作用,从而提高靶特异性和抗肿瘤活性。近年来，多肽protacs具有高特异性和低毒性的优点，已成为一种强有力的蛋白质靶向降解技术。其中基于多肽自组装的protac纳米平台被开发用于应对上述挑战，该平台具有易于筛选和可编辑配体比例等特点，基于多肽的自组装纳米平台对于多模块选择具有潜在的灵活性，并且可针对特定目的进行编程，可实现快速的靶蛋白降解以及配方优化，极大地推动了protac技术的发展和应用。在病理条件下经常过度表达的酶，如碱性磷酸酶、基质金属蛋白酶、组织蛋白酶、酪氨酸酶等。鉴于此，刺激激活的protac前药最近被用来限制有利靶点的精确蛋白质降解，这可能会克服protac由于无法控制的蛋白质降解而产生的不良影响。
4、因此，开发一种可实现剂量依赖性、具有选择性的蛋白泛素化降解剂具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种多肽自组装protac降解剂及其制备方法与应用。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种多肽自组装protac降解剂，所述多肽自组装protac降解剂包括自组装基团、e3连接酶识别基团、组织蛋白酶响应基团、foxm1靶向结合基团、连接肽和整合素α6靶向肽；
4、所述foxm1靶向结合基团的氨基酸序列如seq id no:1所示。
5、优选的，所述自组装基团的氨基酸序列如seq id no:2所示。
6、优选的，所述e3连接酶识别基团的氨基酸序列如seq id no:3所示。
7、优选的，所述组织蛋白酶响应基团的氨基酸序列如seq id no:4所示。
8、优选的，所述连接肽的氨基酸序列如seq id no:5所示；
9、所述整合素α6靶向肽的氨基酸序列如seq id no:6所示。
10、优选的，所述多肽自组装protac降解剂的结构式如式(i)所示：
11、
12、本专利技术还提供了所述的多肽自组装protac降解剂的制备方法，包括如下步骤：
13、(1)通过多肽固相合成法合成自组装基团、e3连接酶识别基团、组织蛋白酶响应基团、foxm1靶向结合基团、连接肽和整合素α6靶向肽，得到多肽nftp；
14、(2)将所述的多肽nftp与六氟异丙醇混合，反应20～28h，干燥，得到多肽自组装protac降解剂。
15、优选的，步骤(2)所述多肽nftp与六氟异丙醇混合的质量体积比为1mg：18～22μl；步骤(2)所述反应的温度为35～39℃，反应的转速为20～50rpm。
16、本专利技术还提供了所述的多肽自组装protac降解剂或所述的制备方法制备得到的多肽自组装protac降解剂在制备靶向降解foxm1的制剂或制备具有抗肿瘤功效的药物中的应用；
17、所述肿瘤为foxm1过表达引发的肿瘤，包括乳腺癌、非小细胞肺癌、肾癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肝癌或胃癌；
18、所述药物中含有多肽自组装protac降解剂的含量为20～100μm。
19、本专利技术还提供了一种靶向降解foxm1的纳米颗粒，所述纳米颗粒包括所述的多肽自组装protac降解剂或所述的制备方法制备得到的多肽自组装protac降解剂；
20、所述纳米颗粒的粒径为100～150nm；
21、所述纳米颗粒的制备方法为：将多肽自组装protac降解剂溶解于水中，分离，得到纳米颗粒。
22、本专利技术提供了一种多肽自组装protac降解剂及其制备方法与应用。所述多肽自组装protac降解剂nftp在制备时加入整合素α6靶向肽，用以增强其肿瘤靶向能力。在正常组织由于低表达组织蛋白酶响应基团(catb)，protacs在附着在纳米组装体上时保持非活性状态，到达肿瘤组织后在catb切割释放后才能恢复活性。nftp可被整合素α6靶向肽带到肿瘤细胞被高效、选择性地摄取，并能显著降低foxm1浓度，进而抑制肿瘤，并降低了由于脱靶效应而产生的全身毒性。
23、本专利技术提供的多肽自组装protac降解剂为解决小分子protacs开发过程中的构效关系限制提供了新的思路。小分子protacs普遍面临着在高浓度下会优先形成protac与目标蛋白或者e3连接酶的二元复合本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述多肽自组装PROTAC降解剂包括自组装基团、E3连接酶识别基团、组织蛋白酶响应基团、FOXM1靶向结合基团、连接肽和整合素α6靶向肽；
2.根据权利要求1所述的多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述自组装基团的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求2所述的多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述E3连接酶识别基团的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.根据权利要求3所述的多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述组织蛋白酶响应基团的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
5.根据权利要求4所述的多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示；
6.根据权利要求1～5任意一项所述的多肽自组装PROTAC降解剂，其特征在于，所述多肽自组装PROTAC降解剂的结构式如式(I)所示：
7.权利要求1～6任意一项所述的多肽自组装PROTAC降解剂的制备方法，其特征在于，包括
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述多肽NFTP与六氟异丙醇混合的质量体积比为1mg：18～22μL；步骤(2)所述反应的温度为35～39℃，反应的转速为20～50rpm。
9.权利要求1～6任意一项所述的多肽自组装PROTAC降解剂或权利要求7～8任意一项所述的制备方法制备得到的多肽自组装PROTAC降解剂在制备靶向降解FOXM1的制剂或制备具有抗肿瘤功效的药物中的应用；
10.一种靶向降解FOXM1的纳米颗粒，其特征在于，所述纳米颗粒包括权利要求1～6任意一项所述的多肽自组装PROTAC降解剂或权利要求7～8任意一项所述的制备方法制备得到的多肽自组装PROTAC降解剂；
...【技术特征摘要】
1.一种多肽自组装protac降解剂，其特征在于，所述多肽自组装protac降解剂包括自组装基团、e3连接酶识别基团、组织蛋白酶响应基团、foxm1靶向结合基团、连接肽和整合素α6靶向肽；
2.根据权利要求1所述的多肽自组装protac降解剂，其特征在于，所述自组装基团的氨基酸序列如seq id no:2所示。
3.根据权利要求2所述的多肽自组装protac降解剂，其特征在于，所述e3连接酶识别基团的氨基酸序列如seq id no:3所示。
4.根据权利要求3所述的多肽自组装protac降解剂，其特征在于，所述组织蛋白酶响应基团的氨基酸序列如seq id no:4所示。
5.根据权利要求4所述的多肽自组装protac降解剂，其特征在于，所述连接肽的氨基酸序列如seq id no:5所示；
6.根据权利要求1～5任意一项所述的多肽自组装protac降解剂，...
【专利技术属性】
技术研发人员：缪蔚冰，王子华，曾华杰，臧洁，林秀婷，
申请(专利权)人：福建医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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