【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开涉及使用经固定的白介素-21(il-21)和可溶性白介素-2(il-2)扩增细胞的方法。
技术介绍
1、本部分提供与本公开相关的背景信息，其不一定是现有技术。
2、自然杀伤(nk)细胞是天然攻击某些细胞的先天淋巴细胞，并且因此是各种细胞疗法和各种恶性疾病治疗的感兴趣的候选者。例如，自然杀伤细胞最近被用作经工程化的嵌合抗原受体(car)癌症疗法的细胞类型。尽管自然杀伤细胞疗法很有前景，但其广泛的临床成功受限于在容易且有效地制备大剂量自然杀伤细胞方面的挑战。目前用于自然杀伤细胞扩增的方法通常是基于烧瓶，这种方法耗时、昂贵且成功率相对较低。因此，希望开发出具有改善的成功率、耗时少和费用低的改进的自然杀伤细胞(和类似细胞)扩增方法。
技术实现思路
1、本部分提供了本公开的整体概述，并不是对其全部范围或所有特征的全面公开。
2、在至少一个示例性实施方式中，本公开提供了用于功能化中空纤维膜以用于靶细胞的细胞扩增的方法。该方法可包括使生物素化分子与包括细胞外基质组分的中空纤维膜的表面接触。生物素化分子可与细胞外基质组分结合，并对靶细胞可具有亲和力。
3、在至少一个示例性实施方式中，生物素化分子可选自由以下项组成的组：细胞因子、表位、配体、单克隆抗体、染色剂、适配体以及它们的组合。
4、在至少一个示例性实施方式中，细胞因子可包括白介素-21。
5、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分可选自由以下项组成的组：纤连蛋白、玻连蛋白、
6、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分可包括细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物，其中细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分与中空纤维膜的表面结合，且细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的链霉亲和素与生物素化分子结合。
7、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物可具有大于或等于约1:3至小于或等于约1:9的细胞外基质组分与链霉亲和素的质量比。
8、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物可包括纤连蛋白-链霉亲和素缀合物，其中纤连蛋白具有大于或等于约440kda至小于或等于约500kda的分子量，且链霉亲和素具有大于或等于约53kda至小于或等于约55kda的分子量。
9、在至少一个示例性实施方式中，该方法可进一步包括制备纤连蛋白-链霉亲和素缀合物。
10、在至少一个示例性实施方式中，制备纤连蛋白-链霉亲和素缀合物可包括通过将经冻干的纤连蛋白和链霉亲和素浸入水中，用链霉亲和素重建经冻干的纤连蛋白。
11、在至少一个示例性实施方式中，制备纤连蛋白-链霉亲和素缀合物可包括使纤连蛋白和链霉亲和素共价偶联。
12、在至少一个示例性实施方式中，该方法可进一步包括使细胞外基质组分与中空纤维膜的表面接触。
13、在至少一个示例性实施方式中，在使生物素化分子与表面接触之前，可使细胞外基质组分与中空纤维膜的表面接触大于或等于约4小时至小于或等于约24小时的时间段。
14、在至少一个示例性实施方式中，在该时间段之后，且在使生物素化分子与表面接触之前，该方法可进一步包括洗涤中空纤维膜以去除细胞外基质组分的任何未反应的和过量的部分。
15、在至少一个示例性实施方式中，靶细胞可包括自然杀伤细胞。
16、在至少一个示例性实施方式中，表面可以为面向内部的表面。
17、在至少一个示例性实施方式中，表面可以为面向外部的表面，或者为面向内部的表面与面向外部的表面的组合。
18、在至少一个示例性实施方式中，本公开提供了用于功能化中空纤维膜以用于靶细胞的细胞扩增的方法。该方法可包括使细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物与中空纤维膜接触，其中细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分与中空纤维膜结合，细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的链霉亲和素与细胞外基质组分结合。该方法还可包括使生物素化分子与中空纤维膜接触，其中生物素化分子与细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的链霉亲和素结合。生物素化分子可选自由以下项组成的组：细胞因子、表位、配体、单克隆抗体、染色剂、适配体以及它们的组合。
19、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分可选自由以下项组成的组：纤连蛋白、玻连蛋白、纤维蛋白原、胶原、层粘连蛋白以及它们的组合。
20、在至少一个示例性实施方式中，细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物可包括纤连蛋白-链霉亲和素缀合物。
21、在至少一个示例性实施方式中，该方法可进一步包括制备纤连蛋白-链霉亲和素缀合物。制备纤连蛋白-链霉亲和素缀合物可包括通过将经冻干的纤连蛋白和链霉亲和素浸入水中，用链霉亲和素重建经冻干的纤连蛋白，或者使纤连蛋白和链霉亲和素共价偶联。
22、在至少一个示例性实施方式中，在使生物素化分子与中空纤维膜接触之前，可使细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物与中空纤维膜接触大于或等于约4小时至小于或等于约24小时的时间段。
23、在至少一个示例性实施方式中，该方法可进一步包括：在使生物素化分子与中空纤维膜接触之前，洗涤中空纤维膜以去除细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的任何未反应的和过量的部分。
24、根据本文提供的描述中，将更加清楚进一步的应用领域。在该概述中的描述和具体示例仅旨在说明目的，而并不旨在限制本公开的范围。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于功能化中空纤维膜以用于靶细胞的细胞扩增的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物素化分子选自由以下项组成的组：细胞因子、表位、配体、单克隆抗体、染色剂、适配以及它们的组合。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述细胞因子包括白介素-21。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞外基质组分选自由以下项组成的组：纤连蛋白、玻连蛋白、纤维蛋白原、胶原、层粘连蛋白以及它们的组合。
5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞外基质组分包括细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分与所述中空纤维膜的表面结合，且所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的链霉亲和素与所述生物素化分子结合。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物具有大于或等于约1:3至小于或等于约1:9的所述细胞外基质组分与所述链霉亲和素的质量比。
7.根据权利要求5所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物包括纤连蛋白-链霉
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述方法进一步包括制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物包括通过将经冻干的纤连蛋白和链霉亲和素浸入水中，用链霉亲和素重建经冻干的纤连蛋白。
10.根据权利要求8所述的方法，其中，制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物包括使所述纤连蛋白和所述链霉亲和素共价偶联。
11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法进一步包括使所述细胞外基质组分与所述中空纤维膜的表面接触。
12.根据权利要求11所述的方法，其中，在使所述生物素化分子与所述表面接触之前，使所述细胞外基质组分与所述中空纤维膜的表面接触大于或等于约4小时至小于或等于约24小时的时间段。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，在所述时间段之后，且在使所述生物素化分子与所述表面接触之前，所述方法进一步包括洗涤所述中空纤维膜以去除所述细胞外基质组分的任何未反应的和过量的部分。
14.根据权利要求1所述的方法，其中，所述靶细胞包括自然杀伤细胞。
15.根据权利要求1所述的方法，其中，所述表面为面向内部的表面。
16.根据权利要求1所述的方法，其中，所述表面为面向外部的表面，或者为面向内部的表面与面向外部的表面的组合。
17.一种用于功能化中空纤维膜以用于靶细胞的细胞扩增的方法，所述方法包括：
18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分选自由以下项组成的组：纤连蛋白、玻连蛋白、纤维蛋白原、胶原、层粘连蛋白以及它们的组合。
19.根据权利要求17所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物包括纤连蛋白-链霉亲和素缀合物，且所述方法进一步包括制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物；制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物包括：通过将经冻干的纤连蛋白和链霉亲和素浸入水中，用链霉亲和素重建经冻干的纤连蛋白，或者使所述纤连蛋白和所述链霉亲和素共价偶联。
20.根据权利要求17所述的方法，其中，在使所述生物素化分子与所述中空纤维膜接触之前，使所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物与所述中空纤维膜接触大于或等于约4小时至小于或等于约24小时的时间段，且所述方法进一步包括，
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于功能化中空纤维膜以用于靶细胞的细胞扩增的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物素化分子选自由以下项组成的组：细胞因子、表位、配体、单克隆抗体、染色剂、适配以及它们的组合。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述细胞因子包括白介素-21。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞外基质组分选自由以下项组成的组：纤连蛋白、玻连蛋白、纤维蛋白原、胶原、层粘连蛋白以及它们的组合。
5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞外基质组分包括细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的细胞外基质组分与所述中空纤维膜的表面结合，且所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物的链霉亲和素与所述生物素化分子结合。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物具有大于或等于约1:3至小于或等于约1:9的所述细胞外基质组分与所述链霉亲和素的质量比。
7.根据权利要求5所述的方法，其中，所述细胞外基质组分-链霉亲和素缀合物包括纤连蛋白-链霉亲和素缀合物，所述纤连蛋白具有大于或等于约440kda至小于或等于约500kda的分子量，且所述链霉亲和素具有大于或等于约53kda至小于或等于约55kda的分子量。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述方法进一步包括制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物包括通过将经冻干的纤连蛋白和链霉亲和素浸入水中，用链霉亲和素重建经冻干的纤连蛋白。
10.根据权利要求8所述的方法，其中，制备所述纤连蛋白-链霉亲和素缀合物包括使所述纤连蛋白和所述链霉亲和素共价偶联。
11.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：马克·E·琼斯，内森·D·弗兰克，明迪·M·米勒，安·玛丽·W·坎宁安，达力普·塞提，
申请(专利权)人：泰尔茂比司特公司，
类型：发明
国别省市：
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