【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及制药，具体地，本专利技术涉及抗ccr8单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、趋化因子(c-c基序)受体8(ccr8)是β趋化因子受体家族的成员，其是一种七次跨膜的g蛋白偶联受体。在人和小鼠身上发现ccr8主要表达在调节性t细胞(treg)上，以及小部分的th2上，不表达在th1。通过分析，treg ccr8+上调和多种肿瘤的发生，进展和患者生存相关。
2、ccl1是ccr8主要配体之一。ccl1过表达在多种肿瘤组织微环境中，招募ccr8+treg细胞浸润到肿瘤组织中，形成免疫抑制微环境。通过阻断ccl1-ccr8作用，清除肿瘤环境中的ccr8+treg，或者阻断ccl1介导的ccr8+treg向肿瘤组织迁移，可以阻断treg引起的免疫抑制作用，从而增加抗肿瘤效应，是目前肿瘤免疫治疗新途径。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种抗ccr8抗体，其对人ccr8蛋白具有高亲和力和特异性，能够有效阻断ccl1与ccr8的结合，抑制下游信号的转导；此外，其也能够通过介导抗体依赖的细胞毒性和补体依赖性细胞毒性清除ccr8阳性细胞。
2、具体地，一方面，本专利技术提供一种特异性结合人ccr8的全人源抗体或抗原结合片段，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：h-cdr1、h-cdr2和h-cdr3，所述轻链可变区包含互补决定区：l-cdr1、l-cdr2和l-cdr3，其中，
3、所述h-cdr1具有seq id no:1
4、所述h-cdr2具有seq id no:2、seq id no:8、seq id no:14、seq id no:20、seqid no:26或seq id no:32所示的氨基酸序列；
5、所述h-cdr3具有seq id no:3、seq id no:9、seq id no:15、seq id no:21、seqid no:27或seq id no:33所示的氨基酸序列；
6、所述l-cdr1具有seq id no:4、seq id no:10、seq id no:16、seq id no:22、seqid no:28或seq id no:34所示的氨基酸序列；
7、所述l-cdr2具有seq id no:5、seq id no:11、seq id no:17、seq id no:23、seqid no:29或seq id no:35所示的氨基酸序列；
8、所述l-cdr3具有seq id no:6、seq id no:12、seq id no:18、seq id no:24、seqid no:30或seq id no:36所示的氨基酸序列。
9、所述h-cdr1具有seq id no:1、seq id no:7、seq id no:13、seq id no:19、seqid no:25或seq id no:31所示的氨基酸序列。
10、sssaaws(seq id no:1)。
11、tywig(seq id no:7)。
12、sksvgwh(seq id no:13)。
13、snsvgwh(seq id no:19)。
14、sksvgwh(seq id no:25)。
15、syais(seq id no:31)。
16、所述h-cdr2具有seq id no:2、seq id no:8、seq id no:14、seq id no:20、seqid no:26或seq id no:32所示的氨基酸序列。
17、rtyyrskwrsdyavsvks(seq id no:2)。
18、iinpddsqaryspsfqg(seq id no:8)。
19、rtyyrsrwnddyavsvks(seq id no:14)。
20、rtyyrsrwnndyavsvks(seq id no:20)。
21、rtyyrskwnndyaisvks(seq id no:26)。
22、iinpsggntryaqkfqg(seq id no:32)。
23、所述h-cdr3具有seq id no:3、seq id no:9、seq id no:15、seq id no:21、seqid no:27或seq id no:33所示的氨基酸序列。
24、grwsgfdi(seq id no:3)。
25、pggp(seq id no:9)。
26、gfrysfdy(seq id no:15)。
27、gfrysfdy(seq id no:21)。
28、gynfgfdy(seq id no:27)。
29、dgfgmdssgyyrlry(seq id no:33)。
30、所述l-cdr1具有seq id no:4、seq id no:10、seq id no:16、seq id no:22、seqid no:28或seq id no:34所示的氨基酸序列。
31、rssqsllhsngynyla(seq id no:4)。
32、rsshspqfsdgnnyvs(seq id no:10)。
33、sgsksnignrtvn(seq id no:16)。
34、sgsssnigsrnvn(seq id no:22)。
35、sgsssnigknpvs(seq id no:28)。
36、rssqslvhsdgntyls(seq id no:34)。
37、所述l-cdr2具有seq id no:5、seq id no:11、seq id no:17、seq id no:23、seqid no:29或seq id no:35所示的氨基酸序列。
38、lgsnras(seq id no:5)。
39、rasnras(seq id no:11)。
40、gtdqrps(seq id no:17)。
41、ssnqrps(seq id no:23)。
42、dnnkrps(seq id no:29)。
43、kisnrfs(seq id no:35)。
44、所述l-cdr3具有seq id no:6、seq id no:12、seq id no:18、seq id no:24、seqid no:30或seq id no:36所示的氨基酸序列。
45、mqslqtppt(seq id no:6)。
46、mqg本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种特异性结合人CCR8的全人源抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：H-CDR1、H-CDR2和H-CDR3，所述轻链可变区包含互补决定区：L-CDR1、L-CDR2和L-CDR3，其中，
2.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一，所述重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体或其突变体的至少之一。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含与SEQ ID NO:59-64任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体的轻链可变区包含与SEQ ID NO:71-76任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
5.一种亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体为权利要求1-4任意一项所述的CCR8抗体经过突变制备得到。
6.根据权利要求5所述的亲和力
7.根据权利要求5或6所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：H-CDR1、H-CDR2和H-CDR3，所述轻链可变区包含互补决定区：L-CDR1、L-CDR2和L-CDR3，其中，
8.根据权利要求5-7任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体包含重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一，所述重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体或其突变体的至少之一。
9.根据权利要求5-8任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体重链可变区包含与SEQ ID NO:65-70任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
10.根据权利要求5-9任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体轻链可变区包含与SEQ ID NO:77-82任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
11.根据权利要求1-4任意一项所述的抗体或抗原结合片段或根据权利要求5-10任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述抗体包含重链恒定区和轻链恒定区的至少之一，所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部分来人源抗体或其突变体的至少之一。
12.一种分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含编码权利要求1-4任意一项所述的抗体或抗原结合片段或权利要求5-11任意一项所述的亲和力成熟抗体的核苷酸序列。
13.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求12所述的核酸分子。
14.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求12所述的核酸分子或权利要求13所述的表达载体。
15.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1-4任意一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求5-11任意一项所述的亲和力成熟抗体、权利要求12所述的核酸分子、权利要求13所述的表达载体、权利要求14所述的宿主细胞和药学上可接受的载体。
16.权利要求1-4任意一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求5-11任意一项所述的亲和力成熟抗体、权利要求12所述的核酸分子、权利要求13所述的表达载体、权利要求14所述的宿主细胞或权利要求15所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、缓解和/或治疗CCR8相关的疾病。
17.根据权利要求16所述的用途，其特征在于，所述CCR8相关的疾病包括肿瘤，所述肿瘤选自乳腺癌、肾癌、胰腺癌、膀胱癌、胃癌、宫颈癌、结肠癌、转移性脑癌、转移性肝癌等。
18.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1-4任意一项所述的抗体或抗原结合片段和/或权利要求5-11任意一项所述的亲和力成熟抗体以及使用说明书。
...【技术特征摘要】
1.一种特异性结合人ccr8的全人源抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：h-cdr1、h-cdr2和h-cdr3，所述轻链可变区包含互补决定区：l-cdr1、l-cdr2和l-cdr3，其中，
2.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一，所述重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体或其突变体的至少之一。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含与seq id no:59-64任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体的轻链可变区包含与seq id no:71-76任意一项具有至少90％同一性的氨基酸序列。
5.一种亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体为权利要求1-4任意一项所述的ccr8抗体经过突变制备得到。
6.根据权利要求5所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：h-cdr1、h-cdr2和h-cdr3，所述轻链可变区包含互补决定区：l-cdr1、l-cdr2和l-cdr3，其中，
7.根据权利要求5或6所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含互补决定区：h-cdr1、h-cdr2和h-cdr3，所述轻链可变区包含互补决定区：l-cdr1、l-cdr2和l-cdr3，其中，
8.根据权利要求5-7任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体包含重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一，所述重链可变区框架区和轻链可变区框架区的至少之一的至少一部分来自于人源抗体或其突变体的至少之一。
9.根据权利要求5-8任意一项所述的亲和力成熟抗体，其特征在于，所述亲和力成熟抗体重链可变区...
【专利技术属性】
技术研发人员：李钊锋，李凯峰，任志衡，陈苍沙，杨志雄，林树珊，江秋悦，彭菊，陈燕梅，柯志，董军纪，李利佳，
申请(专利权)人：广东东阳光药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。