【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物基因遗传，特别是指草莓果肉风味基因的分子标记及应用。
技术介绍
1、草莓属蔷薇科(rosaceae)草莓属(fragaria)多年生常绿草本植物。草莓生产周期短、见效快、收益高。草莓浆果芳香多汁，酸甜可口，营养价值高，素有“水果皇后”的美誉”，深受广大消费者喜爱。根据数据显示：2011-2022年期间，中国草莓种植面积及产量整体均呈上升走势，已成为全球最大的草莓生产与消费国。然而，在消费者需求不断增长的背景下，大家要求草莓味道更好、保存时间更长。由于过去的育种工作侧重于草莓果实大小、外观、产量和抗病能力等行业友好性状，而高品质等综合性状的草莓新品种培育与推广工作迫在眉睫。基于此，本研究通过多组学挖掘到一个调控果实品质的关键候选基因，并对候选基因开发了分析标记，上述结果极大地促进草莓高品质分子标记辅助育种。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供草莓果肉风味基因的分子标记及应用，解决了现有技术中培育进程过慢的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、草莓果肉风味基因的分子标记，通过fvc3h66的非同义突变snp位点开发kasp标记；
4、每对kasp引物由3条dna序列组成，分别是正向引物1、正向引物2和反向引物；
5、另外每条正向引物1的5′端加上fam荧光基团接头序列，序列为5′-gaaggtgaccaagttcatgct-3′，正向引物2的5′端加上hex荧光基团接头序列，序列为5′-g
6、采用cetyl trimethyl ammonium bromide(ctab)法，提取亲本p1_69和p2_sx的基因组dna，使用1％琼脂糖凝胶电泳检测dna质量；
7、用上述设计引物进行pcr扩增，采集荧光信号。pcr反应在荧光定量pcr仪进行(biorad，cfx-96)；利用多态性kasp标记对p1_69×p2_sx构建的f1群体(71个株系)进行基因分型，pcr的反应条件同上。
8、在上述技术方案的基础上，本专利技术还提供以下可选技术方案：
9、在一种可选方案中：pcr反应体系为4.5μl 1×kasp mastermixture(lgcgenomics,hoddeston,uk)、2μl(50ng/μl)基因组dna、2μlkasp引物mix和1.5μl ddh2o。
10、在一种可选方案中：pcr反应程序为95℃10min；95℃20s，61℃40s，循环10次，每次循环退火延伸温度下降0.6℃；95℃20s，55℃40s，循环30次；25℃保温。
11、在一种可选方案中：所述2μl kasp引物mix中：正向引物1：正向引物2：反向引物：水＝6：6：15：23。
12、相较于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
13、本申请通过多组学挖掘到一个调控果实品质的关键候选基因，并对候选基因开发了分析标记，极大地促进草莓高品质分子标记辅助育种效率，利用kasp标记对育种材料进行早期筛选，快速鉴定出含有目标基因的个体，提高育种效率，加速优良品种的培育进程。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于：通过FvC3H66的非同义突变SNP位点开发KASP标记；
2.根据权利要求1所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，PCR反应体系为4.5μL 1×KASP Mastermixture(LGC Genomics,Hoddeston,UK)、2μL(50ng/μL)基因组DNA、2μLKASP引物mix和1.5μL ddH2O。
3.根据权利要求1所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，PCR反应程序为95℃10min；95℃20s，61℃40s，循环10次，每次循环退火延伸温度下降0.6℃；95℃20s，55℃40s，循环30次；25℃保温。
4.根据权利要求1所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，PCR反应在荧光定量PCR仪进行，BioRad，CFX-96。
5.根据权利要求2所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，所述2μLKASP引物mix中：正向引物1：正向引物2：反向引物：水＝6：6：15：23。
6.根据权利要求2所述的草莓果肉风味基因的
7.一种权利要求1-5任一项所述草莓果肉风味基因的分子标记的应用，其特征在于，采用所述草莓果肉风味基因的分子标记在促进草莓高品质分子标记辅助育种的应用。
...【技术特征摘要】
1.草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于：通过fvc3h66的非同义突变snp位点开发kasp标记；
2.根据权利要求1所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，pcr反应体系为4.5μl 1×kasp mastermixture(lgc genomics,hoddeston,uk)、2μl(50ng/μl)基因组dna、2μlkasp引物mix和1.5μl ddh2o。
3.根据权利要求1所述的草莓果肉风味基因的分子标记，其特征在于，pcr反应程序为95℃10min；95℃20s，61℃40s，循环10次，每次循环退火延伸温度下降0.6℃；95℃20s，55℃40...
【专利技术属性】
技术研发人员：何如钰，陈丽娟，李洪雯，王东，刘佳，尧美英，周意，张国薇，
申请(专利权)人：四川省农业科学院园艺研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。