【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及兰科植物育苗，具体涉及一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂及其制备工艺。
技术介绍
1、微生物菌剂是一类利用有益微生物如细菌、真菌、放线菌等，及其代谢产物来改善植物生长、土壤健康或防治病虫害的产品。根据用途可以分为土壤改良剂、植物生长调节剂、生物农药这几种类型。
2、兰科植物是一类对环境条件要求较高的植物，由于其对养分吸收和土壤环境的高要求，兰科植物通常会通过与菌根真菌形成共生结构，从而令兰科植物的根系吸收范围大大扩展，增强了对水分和养分的吸收能力，因此，兰科植物在生长发育过程中可以通过微生物菌剂提高兰科植物的种苗形成率。
3、然而，现有的微生物菌剂常用的菌种一般为固氮菌如根瘤菌和弗兰克氏菌、产生植物激素的菌种如枯草芽孢杆菌和荧光假单胞菌，这些菌种通过生命活动富集土壤中的营养成分，或者产生植物激素来促进植物生长，然而兰科植物在形成种苗的过程中对养分的吸收少，对外界的激素刺激相应也较弱，因此常见的微生物菌剂的菌种对兰科植物种子发育情况的促进作用有限，因此，本专利技术提供了一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂及其制备工艺，通过兰科植物内生真菌制备的微生物菌剂来达成促进兰科植物生长发育的效果。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂及其制备工艺。
2、s1：制备棉籽壳生物炭材料
3、将棉籽壳、mgso4、kh2po4、尿素、石灰和白糖加入到去离子水中，再加入平菇菌
4、s2：制备炭基微生物固定液
5、将稻壳、玉米秸秆和水稻秸秆混合后粉碎过筛，随后装入石英舟中，铺平压实，包上锡纸密封放入真空管式高温炉中，采用氮气作为载气和保护气，在真空管式高温炉中热解，得到混合生物炭材料，将混合生物炭材料与棉籽壳生物炭材料混合，得到混合粉末，将混合粉末与pda培养基混合，震荡吸附固定，得到炭基微生物固定液；
6、s3：制备复合腐殖酸水凝胶粉末
7、取健康的硬叶兜兰于流水处将表面的基质冲洗干净并拿滤纸吸干水分，切出硬叶兜兰的根并进行消毒处理，首先用酒精浸泡处理硬叶兜兰的根，接着用升汞进行消毒，得到处理根，把处理根放置培养皿上切成组织段，置于pda培养基上接种，并加入炭基微生物固定液，在培养箱内避光培养，待组织段长出菌落后挑取菌落边缘的菌丝，转移至新的含有pda培养基的培养皿中纯化培养，纯化，得到促生微生物，将促生微生物用去离子水稀释，再加入l-色氨酸，得到促进兰科植物生长发育的微生物菌剂。
8、进一步地，步骤s1制备棉籽壳生物炭材料，包括如下步骤：
9、s1.1：将4-5质量份棉籽壳、0.2-0.5质量份mgso4、1-3质量份kh2po4、0.5-2质量份尿素、0.1-0.5质量份石灰和1-3质量份白糖加入到100质量份去离子水中，再加入0.2-0.4质量份平菇菌种混合均匀后在24-26℃条件下恒温培养40天，随后在120-125℃下蒸汽灭活，随后用去离子水洗涤3次，100-105℃烘干至恒重，得到微生物处理棉籽壳；
10、s1.2：将微生物处理棉籽壳在流速为100ml/min的氩气气氛下加热至500-550℃，升温速率为3℃/min，热解1-1.5h，得到棉籽壳粉末，研磨过80目筛，随后加入4-4.5倍质量的naoh，再通氩气，氩气流速为100ml/min，加热至800-850℃，活化3-3.5h，得到热处理粉末；
11、s1.3：将热处理粉末用0.1mol/l的hcl洗涤并在60-80℃下烘干至恒重，得到棉籽壳生物炭材料。
12、进一步地，步骤s2制备炭基微生物固定液，包括如下步骤：
13、s2.1：将稻壳、玉米秸秆和水稻秸秆以1：1：（1-2）的质量比混合后粉碎过18目筛，随后装入石英舟中，铺平压实，包上锡纸密封放入真空管式高温炉中，采用氮气作为载气和保护气，在真空管式高温炉中热解2-2.5h，热解温度为600℃，得到混合生物炭材料；
14、s2.2：将混合生物炭材料与棉籽壳生物炭材料以1：（2-3）的质量比混合，得到混合粉末，将混合粉末与pda培养基以1g：（10-12）ml的比例混合，35-36℃，160-180r/min的条件下震荡吸附固定24-25h，得到炭基微生物固定液。
15、进一步地，步骤s3制备促进兰科植物生长发育的微生物菌剂，包括如下步骤：
16、s3.1：取健康的硬叶兜兰于流水处将表面的基质冲洗干净并拿滤纸吸干水分，切出硬叶兜兰的根并进行消毒处理，首先用酒精浸泡处理硬叶兜兰的根60-65s，无菌水冲洗2-3遍，用灭菌的滤纸擦拭表面水分，接着用0.1-0.15%的升汞进行消毒，消毒时间为5-9min，再用无菌水冲洗2-3遍，用灭菌的滤纸擦拭表面水分，得到处理根；
17、s3.2：把处理根放置培养皿上切成4.8-5.2mm的组织段，置于pda培养基上接种，并加入体系总质量5-20%炭基微生物固定液，在培养箱内25-26℃避光培养7天，待组织段长出菌落后挑取菌落边缘的菌丝，转移至新的含有pda培养基的培养皿中纯化培养，纯化2-3次，得到促生微生物；
18、s3.3：将促生微生物用10倍体积的去离子水稀释，再加入0.5-0.6g/l的l-色氨酸，得到促进兰科植物生长发育的微生物菌剂。
19、进一步地，平菇菌种为学名为pleurotus ostreatus的真菌。
20、进一步地，hcl浓度为0.1mol/l。
21、进一步地，氮气的流速为100ml/min，温度加热速率设定为18-20℃/min。
22、进一步地，pda培养基为琼脂15g，马铃薯去皮200g，葡萄糖20g，纯水1l混合制备得到。
23、进一步地，硬叶兜兰为学名paphiopedilum micranthum tang & f. t. wang的三年生植物。
24、一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂，其由上述的促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺制备得到。
25、本专利技术与现有技术相比，至少具有如下有益效果：
26、1、本专利技术将平菇菌种定值与木质纤维素结构的棉籽壳内部，利用真菌自然生长分泌的酶打破植物框架，获得孔隙发育良好的生物炭前驱体，并用naoh进行二次改性，使其孔隙更大，更加疏松，而这样的棉籽壳通过高温作用制成生物炭后，能够令菌种固定在生物炭材料的空隙中进行生长繁殖，并形成一层连续的，同种的生物膜，从而使得同一种群的微生物繁衍又是扩大，微生物菌液中的优势菌种浓度增大，进而增强微生物菌剂对植物生长的促进作用。
27、2、本专利技术通过从硬叶兜兰的根本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤S1制备棉籽壳生物炭材料，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤S2制备炭基微生物固定液，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤S3制备促进兰科植物生长发育的微生物菌剂，包括如下步骤：
5.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，平菇菌种为学名为Pleurotus ostreatus的真菌。
6.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，HCl浓度为0.1mol/L。
7.根据权利要求3所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，氮气的流速为100mL/min，温度加热速率设定为18-20℃/min。
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9.根据权利要求4所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，硬叶兜兰为学名Paphiopedilum micranthum Tang & F. T. Wang的三年生植物。
10.一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂，其由上述权利要求1-9任一项的促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺制备得到。
...【技术特征摘要】
1.一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤s1制备棉籽壳生物炭材料，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤s2制备炭基微生物固定液，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，步骤s3制备促进兰科植物生长发育的微生物菌剂，包括如下步骤：
5.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制备工艺，其特征在于，平菇菌种为学名为pleurotus ostreatus的真菌。
6.根据权利要求2所述的一种促进兰科植物生长发育的微生物菌剂的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：李宗艳，任书娴，明珠，王明蓉，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：
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