【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及mir-148a-3p在调控繁殖性状方面的应用。
技术介绍
1、繁殖性状是生猪育种的重要经济性状之一，选育高繁殖力的母猪，对于促进养猪业的健康发展和种业创新意义重大。繁殖性状属于低遗传力性状，采用传统的表型选择遗传进展缓慢。目前研究者们已鉴定出多个影响猪繁殖力的主效基因，如催乳素受体(prolactin receptor，prlr)、雌激素受体(estrogen receptor，esr)、促卵泡生成素β(folloclestimulating hormone-β，fshβ)和视黄醇结合蛋白4(retinol-binding protein4，rbp4)等。这些主效基因调控繁殖性状的分子机制仍未阐明，随着非编码rna(noncodingrna，ncrna)的深入研究，从ncrna与mrna分子互作角度研究母猪繁殖性状的分子调控机制，从而获得更多可靠分子标记，已成为提高育种效率的有效手段之一。然而，目前人们对于可用于调控繁殖性状的基因的研究仍然不足，如何开发更多相关基因按照人们所需调控相关繁殖性状，是人们所急需研究的。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供mir-148a-3p在调控繁殖性状方面的应用。
2、如本专利技术的实施例所示，专利技术人在对mir-148a-3p保守性分析时，发现其成熟序列在多个物种中保守性较高，这说明在进化过程中成熟序列发生突变概率较低，且在前期转录组测序分析发现mir-148a-3p在卵巢组
3、prlr是细胞分裂素受体超家族成员之一，在哺乳动物的黄体、卵巢、睾丸、肝脏等多种组织中表达。prlr是影响母猪繁殖性能的主效基因之一，大量研究已证实，prlr的多态性与产仔数和产活仔数密切相关，并将其作为提高产仔性能的候选基因。prlr在调控繁殖功能过程中发挥重要作用。prlr敲除会导致黄体功能丧失，进一步引起排卵数降低、卵子畸形以及受精卵着床失败。本领域研究人员发现，小尾寒羊prlr在卵泡期各组织中的表达量均显著低于黄体期，暗示该基因可能与繁殖周期转换相关；同时还发现，prlr在直径小于2mm的卵泡基质和壁细胞中表达水平最高，随着卵泡的成熟表达水平逐渐下降，表明prlr的高表达可能对繁殖活动有抑制作用。prlr在不同大小鹅卵泡颗粒细胞的体外培养中均有表达差异，表明prlr参与了卵泡发育阶段颗粒细胞功能的调节。prlr与mirna的研究主要集中在乳腺发育和乳汁分泌。mir-142-3p通过prlr介导的多种信号通路调控乳汁合成和小鼠乳腺结构；在培养的原代乳腺上皮细胞中过表达和沉默表达mir-135a，通过双荧光素酶报告检测验证prlr是mir-135a的直接靶基因，预示着mir-135a/prlr参与调控动物乳腺发育和泌乳功能。circ-cyp24a1通过结合和抑制mir-224调节细胞增殖和凋亡，导致prlr表达增加，从而调控复发性流产。然而，prlr与mirna调控卵巢功能的分子机制未见报道。
4、大多数mirna通过与靶基因结合调控机体的生物学过程，如mir-148a-3p在鹅卵巢颗粒细胞中，特异性结合pparγ进而影响孕酮合成，降低颗粒细胞类固醇激素分泌。在猪颗粒细胞中，mir-574靶向组织金属蛋白酶抑制剂3(tissue inhibitor of metalloproteinase 3，timp3)并抑制基因表达，导致erk1/2磷酸化减少，从而促进雌二醇产生。mir-146b靶向结合雌二醇合成信号关键酶细胞色素p450芳香化酶(cytochrome p450arom,cyp19a1)抑制雌二醇分泌并诱导猪颗粒细胞凋亡。本专利技术发现，mir148a-3p与prlr存在结合位点，且mir-148a-3p与prlr cds区结合位点的稳定性比mir-148a-3p与prlr 3’utr区结合位点更高。虽然黄体期mir-148a-3p和prlr的表达量负相关关系不显著，但是呈负相关趋势，推测mir-148a-3p可能通过靶向prlr调控母猪繁殖性状。基于此，将prlr作为mir-148a-3p最可能的靶基因进行深入研究。本研究发现共转染mir-148a-3p mimics和prlr野生型的荧光活性显著降低，初步揭示了mir-148a-3p和prlr具有靶向关系，为进一步深入探究mir-148a-3p的生物学功能以及与靶基因prlr的调控机理奠定了基础。
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1.miR-148a-3p在调控繁殖性状方面的应用，其特征在于，所述miR-148a-3p包括猪的miR-148a-3p，所述猪的miR-148a-3p序列为5’-UCAGUGCACUACAGAACUUUGU-3’。
【技术特征摘要】
1.mir-148a-3p在调控繁殖性状方面的应用，其特征在于，所述mir-148a-3p包括猪的mir-1...
【专利技术属性】
技术研发人员：齐婧，谭娅，张静，裴国海，赵春萍，张雄，王婧，杜春林，周思旋，史开志，
申请(专利权)人：贵州省畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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