System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 干酪乳酪杆菌、缓解阴道炎的益生菌制剂及其制备方法和应用技术_技高网

干酪乳酪杆菌、缓解阴道炎的益生菌制剂及其制备方法和应用技术

技术编号:44905322 阅读:8 留言:0更新日期:2025-04-08 18:51
本发明专利技术涉及到功能益生菌筛选及其应用,具体提供了一株高产胞外多糖、缓解阴道炎的干酪乳酪杆菌RH99,其保藏号为CGMCC No.32108。所述的干酪乳酪杆菌能够抑制加德纳氏菌、白色念珠菌、消化链球菌的生长及其生物膜生成能力;其产生的胞外多糖对干酪乳酪杆菌自身生物膜形成有显著促进作用。RH99接种至阴道内,其菌株、产生的代谢物(胞外多糖)、核心单糖(D‑甘露醇)均能抑制致病菌定植、促进乳酸菌定植;且RH99还能通过抑制炎症因子来缓解阴道炎。可见RH99能通过关键核心代谢产物抑制致病菌生长+抑制生物膜形成+抑制致病菌粘附+抑制炎症因子的水平,实现四位一体的全方位抑制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及益生菌领域,具体涉及干酪乳酪杆菌、包括干酪乳酪杆菌的益生菌制剂及其制备方法和应用。


技术介绍

1、女性最常见的感染性疾病是阴道炎,最常见的阴道炎类型是细菌性阴道炎(bv)、外阴阴道念珠菌病、需氧菌性阴道炎及滴虫性阴道炎等。阴道炎疾病主要是由阴道微生物生态失衡引起的,全世界约有三分之一的女性具有阴道炎的困扰。根据amsel标准诊断bv主要有以下特征:患者的阴道分泌物增多、分泌物质地和颜色变化、分泌物可能伴有鱼腥味、阴道环境ph>4.5,阴道分泌物中存在线索细胞、分泌物产生大量胺类物质,致病菌增多,乳酸杆菌减少等。

2、与阴道炎相关的致病菌包括加德纳氏菌、白色念珠菌、阿托波氏菌、普雷沃特氏菌、消化链球菌等,这些致病菌通过释放阴道溶血素、唾液酸苷酶等细胞毒素破坏阴道黏膜及上皮屏障;bv相关的阴道代谢物可能通过增加促炎因子(肿瘤坏死因子tnf-α、il-8等)的产生来促进阴道炎症;致病菌生物膜的形成也会损害阴道上皮屏障的完整性,特别是阴道加德纳菌与阴道上皮细胞的初始黏附是致病菌生物膜形成及bv形成的关键环节;生物胺(酪氨、尸胺)与阴道环境ph升高、产生阴道气味、分泌物异常相关,而相关乳酸菌产生的代谢物(乳酸、谷胱甘肽、苯丙氨酸等)可保护阴道环境;致病菌还会降低阴道微生物环境中的氧化还原电位,导致乳杆菌的显著减少和其他bv相关细菌如普雷沃特氏菌、阿托波氏菌的增加,引发阴道微生态紊乱。

3、针对治疗细菌性阴道炎方法主要有两类:一类以抗菌药物为主,一类则是以微生物干预为主。抗菌药物主要是甲硝唑、克林霉素或替硝唑等抗生素,但是抗生素疗法难以重建已经失调的阴道环境,甚至出现恶心、呕吐或胃肠道不适等消化道反应。此外,抗生素不适用于孕妇和哺乳期妇女。微生态疗法不仅能够破坏病原菌的毒力,同时还可以调节免疫系统、改善阴道环境。益生菌在缓解细菌性阴道炎过程中发挥着重要的作用,如抑制阴道炎相关致病菌生长与定植、抑制致病菌生物膜的形成、调节阴道局部炎症免疫反应等。乳酸菌可有效缓解bv症状,具体机理主要有以下几种:乳杆菌可以通过产生有机酸、过氧化氢(h2o2)、细菌素等抗菌物质抑制致病菌的生长;乳杆菌通过与致病菌竞争上皮细胞的黏附位点,形成空间位阻,阻止致病菌的黏附和定植;乳酸菌通过抑制致病菌的已知毒力因子(如阴道溶菌素、唾液酸酶)的表达,减缓阴道上皮细胞脱落,改善受损的阴道黏膜、恢复阴道黏膜屏障。目前阴道内给药虽直接作用于患处,但菌种代谢迅速,定植能力差,导致疗效不持久,存在反复感染的困扰,且大部分药物会破坏伤阴道菌群平衡。

4、公开号为cn 117778221 a的中国专利技术申请公开了一株具有预防和治疗女性阴道炎功效的鼠李糖乳酪杆菌,此专利技术从婴儿粪便中筛选到一株鼠李糖乳酪杆菌,能够显著抑制阴道加德纳氏菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌等病原菌的生长,对常见抗生素敏感,最大耐盐浓度8%,能在45℃生长,具有一定耐热性,并对人阴道上皮细胞具有粘附作用,能定植于阴道内。该申请仅对阴道炎干预作用的探讨仅仅从抑制致病菌的能力、生殖道细胞粘附、菌株本身的益生特性(耐胃酸、耐胆盐、抗生素敏感、对人阴道上皮细胞的粘附能力)等方面考虑,未进行动物实验功效验证。

5、公开号为cn 114350560 b的中国专利技术申请公开了一株抑制阴道加德纳菌生长与生物膜并高产过氧化氢的副格氏乳杆菌,本专利技术的副格氏乳杆菌在过氧化氢的生产能力、对致病菌(加德纳菌)的生长以及生物膜的抑制能力都有显著提升,同时对阴道具有很强的粘附能力。并且,由于所述副格氏乳杆菌的来源于健康女性阴道,从而对身体的副作用小、是一株适用于人类阴道炎的益生菌株,将其用于制备女性阴道炎的产品和卫生用品中,有助于缓解和改善女性细菌性阴道炎。该申请仅对比体外抑菌、产过氧化氢及黏附能力,未进行动物实验验证,也未从机理角度分析抑菌能力强/黏附能力强的原因。


技术实现思路

1、因此,为解决以上问题,本专利技术筛选出了具有抑制阴道炎的乳酸菌。为提高阴道炎的治疗效果,减少复发率,改善阴道黏膜健康,为女性健康提供全面而持久的保障。

2、本专利技术通过如下技术方案实现。

3、一种干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus casei)rh99,其保藏编号为cgmccno.32108。一种发酵产物,由所述的干酪乳酪杆菌rh99发酵得到。

4、一种所述的干酪乳酪杆菌rh99的益生菌制剂,包括将益生菌划线后挑单菌至液体mrs培养基内,37℃培养,经过二轮活化后,离心,获得益生菌菌泥的步骤。

5、所述培养基按照重量百分比计包括以下组分:酵母蛋白胨0.5~1.0%、大豆蛋白胨0.5~1.0%,酵母浸粉0.4~0.5%,葡萄糖1.5~2.0%,吐温0.05~0.15%,磷酸氢二钾0.1~0.2%,乙酸钠0.4~0.6%,硫酸镁0.02~0.03%,一水合硫酸锰0.002~0.004%,蒸馏水余量。

6、所述的益生菌制剂的应用,应用于制备抑制加德纳氏菌、白色念珠菌和/或消化链球菌的生长的药物。

7、所述的益生菌制剂的应用,应用于制备抑制加德纳氏菌、白色念珠菌和/或消化链球菌生物膜形成的药物。

8、所述的益生菌制剂的应用,应用于制备抑制炎症因子的药物。

9、所述炎症因子包括nf-α、il-1β。

10、一种干酪乳酪杆菌rh99的应用,应用于制备微生物制剂;或者

11、应用于添加至卫生用品;或者

12、应用于制备生活用品;或者

13、所述卫生用品包括妇女经期卫生用品、排泄物卫生用品、一次性内裤、避孕套;

14、所述生活用品包括阴道洗剂、凝胶、软膏、喷雾剂或霜剂。

15、生物保藏说明生物材料:干酪乳酪杆菌rh99,分类命名:干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus casei),于2024年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏中心地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编100101;保藏编号为cgmcc no.32108。保藏时,菌是活的。

16、相对于现有技术,本专利技术有益效果如下:

17、本专利技术提供干酪乳酪杆菌具有高产胞外多糖(特别是含d-甘露糖)的效果;

18、本专利技术提供干酪乳酪杆菌rh99具有缓解阴道炎的效果;

19、本专利技术提供的干酪乳酪杆菌rh99产生的胞外多糖对自身生物膜具有促进作用,对致病菌生物膜具有抑制作用。

20、本专利技术提供的干酪乳酪杆菌rh99能与阴道加德纳菌竞争定植位点,通过竞争、排斥、替换占位的方式抑制致病菌黏附hela细胞,从而抑制致病菌生物膜生成、抑制致病菌定植阴道。本专利技术提供的干酪乳酪杆菌rh99还能通过抑制炎症因子来缓解阴道炎。

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【技术保护点】

1.一种干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus casei)RH99,其特征在于:

2.一种发酵产物,其特征在于:

3.一种包括如权利要求1所述的干酪乳酪杆菌RH99的益生菌制剂,其特征在于:

4.如权利要求3所述的益生菌制剂的制备方法,其特征在于:

5.如权利要求2所述的益生菌制剂的应用,其特征在于:

6.如权利要求2所述的益生菌制剂的应用,其特征在于:

7.如权利要求2所述的益生菌制剂的应用,其特征在于:

8.如权利要求7所述的益生菌制剂的应用,其特征在于:

9.一种如权利要求1所述的干酪乳酪杆菌RH99的应用,其特征在于:

【技术特征摘要】

1.一种干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus casei)rh99,其特征在于:

2.一种发酵产物,其特征在于:

3.一种包括如权利要求1所述的干酪乳酪杆菌rh99的益生菌制剂,其特征在于:

4.如权利要求3所述的益生菌制剂的制备方法,其特征在于:

5.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:肖宏杨涛唐溶雪余岳芳黄丽娟
申请(专利权)人:湖南营养树生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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