【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及疟疾药物治疗领域，特别是涉及用于预防疟疾的结合至恶性疟原虫(plasmodium falciparum)子孢子、特别是结合至恶性疟原虫环子孢子蛋白的抗体。
技术介绍
1、疟疾是全球最严重的公共卫生问题之一。疟疾由疟原虫(plasmodium)属的寄生原生动物引起。疟原虫属包括约200个物种，其中恶性疟原虫(p.falciparum)、间日疟原虫(p.vivax)、卵形疟原虫(p.ovale)和三日疟原虫(p.malariae)一起导致了几乎所有的疟原虫物种的人感染。在这些疟原虫物种中，恶性疟原虫导致了绝大多数疟疾死亡，特别是在五岁以下的儿童中。疟疾症状通常包括发热、感觉疲劳、呕吐和头痛。在重症病例中，它可以导致皮肤发黄、癫痫发作、昏迷或死亡。
2、疟疾是一种通过受感染雌性按蚊(anopheles)叮咬传播的蚊媒病。在恶性疟原虫感染导致的人疟疾的情况下，雌性按蚊将少量子孢子(10-100个)注射至皮肤中。这些寄生虫中的一些前往肝脏以入侵肝细胞(crompton等人(2014)annu rev lmmunol 32,157-187)。在肝细胞中，这些子孢子形成纳虫空泡，它们在此发育、无性繁殖(组织裂殖生殖)并成熟为裂殖体，这些裂殖体在成熟时破裂以释放数千个裂殖子，这些裂殖子最终被释放至血流中。裂殖子感染红细胞，从环状体(ring)成熟为营养体并最终形成裂殖体，这些裂殖体破裂释放裂殖子，这些裂殖子将以48小时的周期感染新的红细胞，使周期延续。其他裂殖子发育至有性红细胞内期(配子体)。当蚊子叮咬受感染的人时，配
3、疟疾症状由血液期寄生虫引起。相比之下，子孢子与临床症状不相关，然而，在疟原虫寄生虫生命周期的子孢子期和肝脏期，宿主中的数量很低，并且消灭它们可以完全消除感染。因此，恶性疟原虫寄生虫的子孢子期和肝脏期代表了目前疟疾预防候选物的关键靶标，因为成功提供针对这些期的保护的干预措施将能够预防疟疾感染和传播两者。因此，阻断子孢子的疫苗或分子处于疟疾预防工作的开发的核心。
4、疟原虫环子孢子蛋白(csp)是一种仅在疟原虫的子孢子期存在的膜结合蛋白。csp在该寄生虫表面上形成致密的外壳，并且已经有假说认为csp介导子孢子和其两种宿主之间的许多初始相互作用(menard,2000,microbes infect.2:633-642；sinnis和nardin,2002,chem immunol 80:70-96)。csp的结构和功能在感染人、非人灵长类动物和啮齿动物的各种疟原虫虫株之间高度保守。csp的氨基酸序列包含免疫显性的中央重复区，其在疟原虫物种之间相异(在恶性疟原虫的情况下为nanp重复区)。重复序列(repeat)的侧翼为两个保守基序和一个已知的细胞黏附性基序，其位于称为i型血小板反应蛋白重复序列(tsr)的重复序列的c-末端。当寄生虫从蚊子前往哺乳动物载体时，这些保守基序参与蛋白质加工。已知csp在子孢子从受感染蚊子的中肠壁向蚊子唾液腺的迁移中发挥至关重要的作用。额外地，csp在哺乳动物宿主中参与肝细胞结合，其中n-末端csp初始促进寄生虫结合。在肝细胞表面上，n-末端区域i处的蛋白水解裂解暴露了黏附性c-末端结构域，从而启动(prime)寄生虫入侵肝脏(coppi等人,2005,j exp med 201,27-33)。
5、目前，最先进的疟疾疫苗候选物是rts,s(rts,s/as01；商品名mosquirix)，其是一种基于重组蛋白的疟疾疫苗。rts,s是一种杂混蛋白质颗粒，在称为as01的多组分佐剂中配制。rts,s疫苗抗原由以下组成：19个nanp氨基酸重复单元，随后是完整的c-末端结构域减去csp抗原的gpi锚，融合至乙肝病毒s蛋白。在撒哈拉以南非洲进行的多地点临床试验已经显示，rts,s赋予了针对临床疟疾的适中且短期的保护(rts,s clinical trialspartnership,2015,lancet.386(9988):31-45)。
6、使疟疾治疗和预防的开发变得复杂的另一个因素是，尽管最近已经在鉴定与抗体特异性和功能相关的免疫相关因素方面取得了进展，但难以鉴定赋予强劲免疫保护的机制的性质(suscovich等人,2020,sci transl med 12(553):eabb4757)。
7、最近，描述了对恶性疟原虫csp具有特异性的抗疟疾抗体(tan等人,2018,nat med24(4):401-407；kisalu等人,2018,nat med24(4):408-416；wang等人,2020,immunity 13；53(4):733-744；pholcharee等人,2021,nat commun 16；12(1):1063)。然而，尽管这些csp结合抗体在小鼠临床前感染模型中被描述为具有保护性，但其均具有这样的拟议作用机制，其中通过仅由该抗体的抗原结合fab区(例如cis43,l9)介导的机制，子孢子被固定在皮肤中或被阻止结合至和/或感染肝脏中的靶标细胞。已经越来越多地认识到，抗体fc介导的效应子机制可以在防止感染方面发挥重要作用，此外，使用抗体fc区中的氨基酸替换来操纵这些机制可以显著改善由抗体赋予的整体保护水平。最近公布的免疫相关因素研究(suscovich等人,2020,sci transl med 12(553):eabb4757)指出了在疟疾中的这种作用，而其他研究先前已经在其他传染病的背景下证明了这一原则(hiatt等人,2014,pnas111；5992-5997；dilillo等人,2014,nat med 20(2)143-151)。
8、鉴于以上，本专利技术的目的是通过不仅提供具有高亲和力的抗体，而且提供赋予了其他保护性机制的益处和改善的安全性以及易于开发(考虑到在疟疾流行国家中施用的固有问题)的抗体，从而克服上面概述的现有技术疟疾治疗的局限性。
技术实现思路
1、在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种恶性疟原虫抗原结合蛋白。
2、在一个方面，本专利技术提供了一种恶性疟原虫环子孢子蛋白(csp)抗原结合蛋白，其包含：
3、seq id no:9的重链(hc)序列；和
4、seq id no:10的轻链(lc)序列。
5、在一个方面，本专利技术提供了一种核酸序列，其编码seq id no:9的重链；和/或一种核酸序列，其编码seq id no:10的轻链。
6、在一个方面，本专利技术提供了一种或多种表达载体，其包含编码seq id no:9的重链的核酸序列；和/或编码seq id no:10的轻链的核酸序列。
7、在一个方面，本专利技术提供了一种重组宿主细胞，其包含：编码seq id no:9的重链的核酸序列；和/或编码seq本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)环子孢子蛋白(CSP)抗原结合蛋白，其包含：
2.根据权利要求1所述的CSP抗原结合蛋白，其中当通过表面等离子体共振(SPR)测量时，所述抗原结合蛋白以至少2.5nM的亲和力结合。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的CSP结合蛋白，其中所述抗原结合蛋白在施用之后至少3个月的时期内保持在循环中。
4.一种核酸序列，其编码SEQ ID NO:9的重链；和/或一种核酸序列，其编码SEQ ID NO:10的轻链。
5.一种或多种表达载体，其包含编码SEQ ID NO:9的重链的核酸序列；和/或编码SEQID NO:10的轻链的核酸序列。
6.一种重组宿主细胞，其包含如权利要求4所定义的一种或多种核酸序列或如权利要求5所定义的一种或多种表达载体。
7.一种用于生产根据权利要求1至3所述的CSP抗原结合蛋白的方法，所述方法包括在适合表达所述一种或多种核酸序列或一种或多种载体的条件下培养如权利要求6所定义的宿主细胞，从而生产包含所述CSP抗原结合蛋白的多肽。
8.一种药物组合物，其包含如权利要求1至3中任一项所定义的CSP抗原结合蛋白和药学上可接受的赋形剂。
9.一种用于在有需要的受试者中预防疟疾的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1至3中任一项所定义的CSP抗原结合蛋白或如权利要求8所定义的药物组合物。
10.用于预防疟疾的如权利要求1至3中任一项所定义的CSP抗原结合蛋白或如权利要求8所定义的药物组合物。
11.用于静脉内、皮下或肌内施用的如权利要求1至3中任一项所定义的CSP抗原结合蛋白或如权利要求8所定义的药物组合物。
12.如权利要求1至3中任一项所定义的CSP结合蛋白或如权利要求8所定义的药物组合物在制备用于预防疟疾的药物中的用途。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种恶性疟原虫(plasmodium falciparum)环子孢子蛋白(csp)抗原结合蛋白，其包含：
2.根据权利要求1所述的csp抗原结合蛋白，其中当通过表面等离子体共振(spr)测量时，所述抗原结合蛋白以至少2.5nm的亲和力结合。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的csp结合蛋白，其中所述抗原结合蛋白在施用之后至少3个月的时期内保持在循环中。
4.一种核酸序列，其编码seq id no:9的重链；和/或一种核酸序列，其编码seq id no:10的轻链。
5.一种或多种表达载体，其包含编码seq id no:9的重链的核酸序列；和/或编码seqid no:10的轻链的核酸序列。
6.一种重组宿主细胞，其包含如权利要求4所定义的一种或多种核酸序列或如权利要求5所定义的一种或多种表达载体。
7.一种用于生产根据权利要求1至3所述的csp抗原...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·科迪，M·D·G·戈麦斯·洛伦佐，G·高夫，
申请(专利权)人：葛兰素史克知识产权发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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