【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物基因工程，主要涉及肿瘤免疫治疗生物医药，具体涉及一种靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体、免疫细胞及其应用。
技术介绍
1、在新型肿瘤治疗方法的研究中，肿瘤免疫治疗越来越多地被人们关注，对肿瘤微环境和抗肿瘤免疫的研究，为肿瘤免疫治疗提供了新的研究基础，肿瘤免疫治疗包括过继免疫治疗和靶向药物治疗。rosenberg等首次提出过继免疫治疗的概念，它是指将患者自身t淋巴细胞、自然杀伤细胞(nk细胞)等免疫细胞在体外培养扩增并激活，联合使用生长因子输注回患者体内，使得这些免疫效应细胞杀伤肿瘤细胞，从而达到治疗肿瘤的目标。尽管这种疗法在包括黑色素瘤在内的部分肿瘤治疗中取得了较好的效果，但是对于大多数恶性肿瘤却疗效不佳，主要是因为受到主要组织相容性复合物的制约，这使得t淋巴细胞直接识别杀伤肿瘤的效果大打折扣。在此背景下，具有高效特异性、持久性和杀伤活性特点的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，car)修饰t淋巴细胞进入了大家的视野。car的基本结构包括一个肿瘤相关抗原结合区(通常来源于单克隆抗体抗原结合区域的scfv段)，一个胞外铰链区(hinge ar ea)，一个跨膜区(transmembrane region)和一个胞内免疫受体酪氨酸活化基序(immunorecept or tyrosinebased activation motif,itam)。这种结构可以突破mhc的制约，且能够通过胞外表达的抗原结合域特异性靶向肿瘤细胞发动攻击，从而发挥高效而持久的抗肿瘤活性。
2、car
3、cd3l1是cd3e的配体，肿瘤细胞表面的cd3l1结合t细胞上的cd3e来抑制t细胞激活。cd3l1在大多正常组织中不表达，而许多肿瘤组织中高表达。许杰等首次提出抑制cd3l1与cd3e的相互作用，激活t细胞杀伤肿瘤。
4、虽然car-t细胞抗体阻断cd3l1与cd3e结合在肿瘤治疗中具有一定的治疗效果，但是因car-t细胞的靶向性较差，导致其存在有效性不佳的缺陷，严重影响了car-t细胞在肿瘤免疫治疗中的大规模推广应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于针对现有特异性嵌合抗原受体存在对肿瘤的靶向效果较差，导致肿瘤免疫逃逸现象突出的缺陷，提出了一种靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体、免疫细胞及其应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体，所述抗原受体的结构中含有靶向cd3l1的抗原结合域；所述靶向cd3l1的抗原结合域为cd3e受体的胞外段，能够特异性地与cd3l1抗体以配体方式结合。
3、本专利技术一种靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体，利于肿瘤组织高表达cd3l1、而正常组织不表达(很少表达)cd3l1的现象，通过将cd3l1的天然受体(cd3e的)胞外段作为特异性嵌合抗原受体的结构组成之一，从而能够显著的提高抗原受体对肿瘤组织的靶向效率，降低了肿瘤免疫逃逸现象的发生概率，极大的提高了抗原受体对肿瘤组织的免疫效果，有利于特异性嵌合抗原受体在肿瘤疾病治疗中的大规模推广应用。
4、其中，优选的，所述靶向cd3l1的抗原结合域的氨基酸序列如seq id no:1所示；所述seq id no:1为：dgneemggitqtpykvsisgttviltcpqypgseilwqhndknigg deddknigsdedhlslkefseleqsgyyvcyprgskpedanfylylrarvcencmemd；或所述靶向cd3l1的抗原结合域也可以是与seq id no:1氨基酸序列保持高度同一性且具有相同功能的多肽分子结构。
5、优选的，所述抗原受体的结构还包括信号肽、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列；所述信号肽、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列之间通过连接肽或肽键连接；通过在抗原受体中嵌入多种多肽功能段，能显著提高抗原受体的靶向效果和表达性，有利于在免疫细胞中的过表达。
6、优选的，所述信号肽的氨基酸序列为seq id no:4：malpvtalllplalllhaarp。
7、优选的，所述铰链区的氨基酸序列为seq id no:5：ievmypppyldneksngtiihvkgkhlcpsplfpgpskp。
8、优选的，所述跨膜结构域的氨基酸序列为seq id no:6：fwvlvvvggvlacysllvtvafiifwv。
9、优选的，所述共刺激信号分子为cd27、cd28、4-1bb、cd11c、itgb1、ox40、cd30、cd40、icos、cd11b、itgax中的至少一种；更优选的，所述共刺激信号分子为cd28和/或4-1bb；进一步优选的，所述共刺激信号分子为4-1bb；其中，所述4-1bb的氨基酸序列为seq idno:7：krgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcel。
10、优选的，所述胞内信号传导序列的氨基酸序列为seq id no:8：rvkfsrsadapayqqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeaysei gmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr。
11、优选的，所述抗原受体的氨基酸序列如seq id no:2所示，所述seq id no:2为：malpvtalllplalllhaarpdykddddkdgneemggitqtpykvsisgttviltcpqypgseilwqhndkniggdeddknigsdedhlslkefseleqsgyyvcyprgskpedanfylylrarvcencmemdgsievmypppyldneksngtiihvkgkhlcpsplfpgpskpfwvlvvvggvlacysllvtvafiifwvkrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapayqqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpem本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述特异性嵌合抗原受体的结构中含有靶向CD3L1的抗原结合域；所述靶向CD3L1的抗原结合域为CD3E受体的胞外段，能够特异性地与CD3L1以配体方式结合。
2.根据权利要求1所述的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述特异性嵌合抗原受体的结构还包括信号肽、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列；所述信号肽、靶向CD3L1的抗原结合域、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列之间依次通过连接肽或肽键连接。
3.根据权利要求2所述的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激信号分子为CD27、CD28、4-1BB、CD11c、ITGB1、OX40、CD30、CD40、ICOS、CD11b、ITGAX中的至少一种。
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1-3任一项所述的靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体。
5.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求4中编码靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体的核酸分子。
6.一种宿主细胞，其特
7.一种免疫细胞，其特征在于，所述免疫细胞含有权利要求5所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求4所述的核酸分子或表达权利要求1-3任一项所述的靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体。
8.一种权利要求7所述免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求4所述的核酸分子或权利要求5所述的载体转导入NK92、T和/或NK细胞内，从而获得所述免疫细胞。
9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有权利要求1-3任一项所述的靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体、权利要求4所述的核酸分子、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞，和/或权利要求7所述的免疫细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
10.一种权利要求1-3任一项所述的靶向CD3L1的特异性嵌合抗原受体、权利要求4所述的核酸分子、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞，和/或权利要求7所述的免疫细胞在制备肿瘤药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述特异性嵌合抗原受体的结构中含有靶向cd3l1的抗原结合域；所述靶向cd3l1的抗原结合域为cd3e受体的胞外段，能够特异性地与cd3l1以配体方式结合。
2.根据权利要求1所述的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述特异性嵌合抗原受体的结构还包括信号肽、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列；所述信号肽、靶向cd3l1的抗原结合域、铰链区、跨膜结构域、共刺激信号分子和胞内信号传导序列之间依次通过连接肽或肽键连接。
3.根据权利要求2所述的特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激信号分子为cd27、cd28、4-1bb、cd11c、itgb1、ox40、cd30、cd40、icos、cd11b、itgax中的至少一种。
4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1-3任一项所述的靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体。
5.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求4中编码靶向cd3l1的特异性嵌合抗原受体的核酸分子。
6.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。