【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，更具体地，涉及一种低聚肽的水解方法与应用。
技术介绍
1、大豆低聚肽是大豆蛋白经水解、分离、纯化等操作后得到长度为2-10个氨基酸的小分子蛋白片段或氨基酸链。小分子的大豆低聚肽黏度低、溶解性好、吸水性好、渗透压较低，比大豆蛋白更易被机体消化、吸收和利用，表现出比大豆蛋白更优更广泛的生物活性，这使得大豆低聚肽一直是功能食品、医药和饲料领域的研究热点。中国作为世界最大的大豆消费国，大豆消费和加工多集中于大豆压榨和传统豆制品，在新型豆制品中，大豆低聚肽相关产品的开发多停留在实验室阶段，因此大豆低聚肽在我国的工业化生产仍有较大的发展空间和市场前景。 血脂异常是一类较常见的疾病，是人体内脂蛋白的代谢异常，主要包括总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯升高和/或高密度脂蛋白胆固醇降低等。血脂异常是导致动脉粥样硬化的重要因素之一，是冠心病和缺血性脑卒中的独立危险因素。现有的治疗方法不能有效达到降血脂的目的，急需要提供一种新的治疗方法。
技术实现思路
1、针对现有技术所存在的技术问题，本专利技术提供了一种低聚肽的水解方法与应用。本专利技术首次从废弃大豆豆粕中酶解分离得到具备降低胆固醇的功效的低聚肽，该制备方法充分考虑了大豆豆粕的属性，采用两次复合酶解工艺并结合超声辅助手段来制备所述低聚肽，该低聚肽相比于现有单一酶解工艺而言，具有突出的优势地位，能有效得到具有优越降低胆固醇活性的低聚肽，具备降血脂功效，具有较大的应用前景和市场。
2、具体而言，本专利技术首先是提供了一
3、1）取大豆豆粕，按照料水质量比为1:（2-7）加入含有2m 冰醋酸和2m柠檬酸的水溶液进行水洗去杂质；
4、2）将步骤1）清洗后的大豆豆粕沥干后，加入质量比为1:（5-15）的去离子水，进行打浆处理形成匀浆；
5、3）对步骤2）匀浆液进行过滤后，加入2m naoh调节ph=为8.5-9.5，得到步骤3）的匀浆液，备用；
6、4）配置复合酶解液1，将果胶酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照国际酶活单位1:（3-7）:（5-9）用量比配置为水溶液备用，每100ml水溶解中总的酶活单位为90-170 iu；
7、5）向步骤3）的匀浆液中加入步骤4）的复合酶解液1，二者体积比为（10-20）:（1-3），维持温度在55-65℃酶解3.5-8.5h，酶解后迅速升温至95℃处理10-20min；
8、6）配置复合酶解液2，将中性蛋白酶和β-葡萄糖苷酶按照国际酶活单位（2-5）:（1-3）用量比配置为水溶液备用，每100ml水溶解中总的酶活单位为60-160 iu；
9、7）收集步骤5）的酶解液，并加入步骤6）的复合酶解液2，二者体积比为（5-15）:（1-7），同时，将混合液置于超声仪器中辅助酶解，其中超声处理条件为频率100-150khz超声5s后间隔5s，连续处理10-20min；同时维持液体温度不高于40-50℃，酶解处理6.5-10h；
10、8）对步骤7）酶解液采用超滤膜过滤，截留分子量在800-1500 da多肽分子，将截留后的酶解液进行lc-ms/ms分析，分析其序列特征；并对收集低聚肽进行低温真空浓缩；
11、9）将步骤8）的真空浓缩液转移至喷雾干燥机处理收集干粉。
12、优选地，步骤1）料水质量比为1:2、1:5或1:7。
13、优选地，步骤2）质量比为1:5、1:10、1:15。
14、优选地，步骤3）的ph为8.5、9.0或9.5。
15、优选地，步骤4）果胶酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的用量比为1:3:5、1:5:7或1:7:9。
16、优选地，步骤4）中复合酶解液1中总的酶活单位为90iu、130iu、170iu。
17、优选地，步骤5）中体积比为10:1、15:2或20:3。
18、优选地，步骤6）中性蛋白酶和β-葡萄糖苷酶的用量比为2:1、3:2或5:3。
19、优选地，步骤6）中复合酶解液2中总的酶活单位为60iu、100iu、160iu。
20、优选地，步骤7）中体积比为5:1、10:3或15:7。
21、优选地，步骤8）中分离得到的低聚肽序列依次如seq id no.1-5所示。
22、优选地，步骤8）中分离得到的低聚肽序列依次如seq id no.1-3所示。
23、本专利技术的另一方面在于提供了低聚肽在制备具有降低胆固醇的功效的药品中的应用。
24、优选地，所述低聚肽序列依次如seq id no.1-5所示。
25、优选地，所述低聚肽序列依次如seq id no.1-3所示。
26、本专利技术的另一目的在于提供了一种具有降低胆固醇的功效的药品，所述药品是以所述低聚肽为主要活性成分，所述低聚肽的氨基酸序列如seq id no.1-5任一所示。
27、进一步优选地，所述水解多肽的氨基酸序列如seq id no.1-3任一所示。
28、本专利技术的优点如下：本专利技术首次从废弃大豆豆粕中酶解分离得到具备降低胆固醇的功效的低聚肽，该制备方法充分考虑了大豆豆粕的属性，采用两次复合酶解工艺并结合超声辅助手段来制备所述低聚肽，该低聚肽相比于现有单一酶解工艺而言，具有突出的优势地位，能有效得到具有优越降低胆固醇活性的低聚肽，具备降血脂功效，具有较大的应用前景和市场。
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1.一种低聚肽的水解方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）料水质量比为1:2、1:5或1:7。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）质量比为1:5、1:10或1:15。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）的pH为8.5、9.0或9.5。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4）中果胶酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的用量比为1:3:5、1:5:7或1:7:9；复合酶解液1中总的酶活单位为90IU、130IU、170IU。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5）中体积比为10:1、15:2或20:3。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6）中，中性蛋白酶和β-葡萄糖苷酶的用量比为2:1、3:2或5:3；复合酶解液2中总的酶活单位为60IU、100IU、160IU。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤7）中体积比为5:1、10:3或15:7。
9. 如权利要求1所述的方法，其特征在
10. 低聚肽在制备具有降低胆固醇的功效的药品中的应用，其特征在于，所述低聚肽序列依次如SEQ ID NO.1-5所示。
...【技术特征摘要】
1.一种低聚肽的水解方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）料水质量比为1:2、1:5或1:7。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）质量比为1:5、1:10或1:15。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）的ph为8.5、9.0或9.5。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4）中果胶酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的用量比为1:3:5、1:5:7或1:7:9；复合酶解液1中总的酶活单位为90iu、130iu、170iu。
6.如权利要求1所述的方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴小刚，张志勇，韦世欢，
申请(专利权)人：正当年医药科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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