【技术实现步骤摘要】
本申请涉及，特别是涉及一种微生物培养基的显色剂及其制备方法、微生物显色培养基。
技术介绍
1、微生物显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的产物与相应显色剂反应显色的原理来检测微生物的新型培养基，通过特定的酶反应使目标微生物在培养过程中产生颜色变化，从而方便快速识别和鉴定特定的微生物。这种培养基广泛应用于临床微生物学、食品微生物学和环境微生物学等领域，其主要有以下优势：1)高灵敏度和特异性：不同种类的微生物含有不同的胞内酶，在显色培养基中加入人工合成的微生物特异性酶的底物，当目标微生物生长时，其产生的酶与底物反应，使显色基团游离出来附着于菌落上，形成颜色独特的菌落，能直观地将目标微生物与其他微生物区分开来，大大提高了检测的灵敏度和特异性，减少了后续复杂的鉴定步骤；2)快速便捷：大多数显色培养基在样品增菌后，分离培养18-24h，即可根据菌落的颜色作出初步的鉴定，相比传统方法节省了大量时间和人力成本，且结果直观，通过颜色判定结果，一目了然；3)适用范围广：可用于检测各种微生物，如大肠杆菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、李斯特氏菌、弧菌等，涵盖食品、水、牛奶、冰激凌、肉制品、临床样本等多种样品来源，满足不同领域对微生物检测的需求。
2、目前，常用的显色剂主要有吲哚衍生物，如5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-半乳糖苷(x-gal)、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-葡萄糖苷(x-glu)、5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯(x-citronellol或x-cit)、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-岩藻糖苷(x-fuc)等
3、因此，需要提供一种能够更均匀地分散于培养基的显色剂。
技术实现思路
1、本申请的目的是提供一种微生物培养基的显色剂及其制备方法、微生物显色培养基。
2、本申请采用了以下技术方案：
3、本申请的第一方面公开了一种微生物培养基的显色剂，所述显色剂包括显色物质和载体，所述显色物质结合于所述载体内部和/或表面，所述载体具有水不溶性且具有亲水性。需要说明的是，显色物质通常不溶于水且在培养基中易发生团聚，通过使显色物质结合于载体，由于载体不溶于水且具有亲水性，能够在水中具有良好的分散性；此外，亲水性表面可以形成稳定的水合层，阻止颗粒间的进一步团聚，由此，能够有利于提高显色剂的分散性。由此，通过使显色物质结合于载体内部和/或表面，能够借助载体的性质，使显色物质能够在培养基中分散均匀。
4、本申请的一种实现方式中，所述显色物质包埋于所述载体内。需要说明的是，使显色物质包埋于载体内部，能够进一步提高分散性、减少团聚的情况的发生。
5、本申请的一种实现方式中，所述载体具有亲水基团。由此，能够通过亲水基团提高显色剂在水中的分散性。
6、本申请的一种实现方式中，所述载体包括亲水型二氧化硅、沸石分子筛、多孔聚苯乙烯微球中的至少一种。需要说明的是，这些物质具有较好的生物相容性和稳定性，能够有利于避免对微生物生长的影响、以及能够在在培养基中保持稳定；此外，这些物质和显色物质具有较好的亲和性，由此显色物质能够较好的结合至载体，具体而言，亲水型二氧化硅具有较高的比表面积，其表面含有大量的羟基(si-oh)，这些羟基可以与5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯的疏水性基团形成弱的范德华力和氢键；沸石分子筛具有规整的孔道结构，孔径大小在纳米尺度，规整的孔道结构使得沸石分子筛可以选择性地吸附特定尺寸的分子，包括5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯等显色物质；多孔聚苯乙烯微球具有丰富的孔道结构，也能够提供大量的吸附位点。
7、本申请的一种实现方式中，所述载体的粒径为1～100nm。需要说明的是，通过使载体为纳米颗粒，粒径为1～100nm，载体具有更大的比表面积，更大的表面积意味着更多的吸附位点，使得不溶性物质(显色物质)更容易均匀地吸附在纳米颗粒表面；此外，更大的表面积意味着亲水基团和水具有更多的接触，进而能够有利于提高显色剂的分散性。
8、本申请的一种实现方式中，所述载体的粒径为7～40nm。
9、本申请的一种实现方式中，所述载体的比表面积为100～500m2/g。
10、本申请的一种实现方式中，所述显色物质和所述载体的质量比为1：5～1：10。
11、本申请的第二方面公开了一种微生物显色培养基，所述微生物显色培养基包括用于支持微生物生长的基础培养基和显色剂，所述显色剂为如本申请第一方面所公开的显色剂。
12、本申请的第三方面公开了一种显色剂的制备方法，包括：使显色物质溶于有机溶剂，得到第一溶液；使所述第一溶液和载体混合；使所述有机溶剂挥发，得到微胶囊，即所述显色剂。
13、本申请的一种实现方式中，将所述第一溶液和所述载体混合的步骤中，搅拌速率为100～600rpm。
14、本申请的一种实现方式中，将所述第一溶液和所述载体混合的步骤中，采用超声处理，超声的频率为20～100khz，所述超声处理的时间为4～15min。
15、本申请的一种实现方式中，通过真空干燥使所述有机溶剂挥发，所述真空干燥包括：在20～35℃的条件下，干燥2～6小时。
16、本申请的有益效果在于：
17、本申请的显色剂，在微生物培养基中具有较好的分散性，不易发生团聚现象。
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1.一种微生物培养基的显色剂，其特征在于，所述显色剂包括显色物质和载体，所述显色物质结合于所述载体内部和/或表面，所述载体具有水不溶性且具有亲水性。
2.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述显色物质包埋于所述载体内。
3.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述载体具有亲水基团；
4.根据权利要求1至3任一项所述的显色剂，其特征在于，所述载体的粒径为1～100nm；
5.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述显色物质和所述载体的质量比为1：5～1：10。
6.一种微生物显色培养基，其特征在于，所述微生物显色培养基包括用于支持微生物生长的基础培养基和显色剂，所述显色剂为如权利要求1至5任一项所述的显色剂。
7.一种如权利要求1至5任一项所述的显色剂的制备方法，其特征在于，包括：
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，将所述第一溶液和所述载体混合的步骤中，搅拌速率为100～600rpm。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，将所述第一溶液和所述载体混合的
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，通过真空干燥使所述有机溶剂挥发，所述真空干燥包括：在20～35℃的条件下，干燥2～6小时。
...【技术特征摘要】
1.一种微生物培养基的显色剂，其特征在于，所述显色剂包括显色物质和载体，所述显色物质结合于所述载体内部和/或表面，所述载体具有水不溶性且具有亲水性。
2.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述显色物质包埋于所述载体内。
3.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述载体具有亲水基团；
4.根据权利要求1至3任一项所述的显色剂，其特征在于，所述载体的粒径为1～100nm；
5.根据权利要求1所述的显色剂，其特征在于，所述显色物质和所述载体的质量比为1：5～1：10。
6.一种微生物显色培养基，其特征在于，所述微生物显色培养基包括用于支持微生物生长...
【专利技术属性】
技术研发人员：李晓涛，张健，
申请(专利权)人：惠州逗点生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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