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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物领域,特别是涉及一种过表达鸡lnc-ca13基因的生物材料及其应用。
技术介绍
1、鸡交叉喙主要表现为上下喙错位、呈交叉状态。1934年至今,全球已公开报道至少12个鸡种存在交叉喙,发生率0.2%-7.4%;国内约30%地方鸡种存在交叉喙现象。喙畸形鸡无法正常采食饮水,导致生长发育受阻,死亡率高出正常鸡数倍,成年鸡繁殖力也低于正常鸡50%以上。以年出栏千万羽的种鸡场为例,每年因交叉喙导致经济损失高达600万元。交叉喙在育雏期形成,隐蔽性极强,且正常个体交配后代也会出现交叉喙,严重制约着地方鸡种产业化发展。交叉喙鸡双侧下颌骨髁部转录本特征,发现ca13基因在喙畸形鸡短骨支侧髁部表达下调,降低了碳酸酐酶参与成骨细胞矿化的能力,引起该侧下颌骨支骨形成障碍,并形成交叉喙。其中,lnc-ca13基因作为ca13基因的上游调控因子,在交叉喙鸡短骨支侧的髁部表达下调,因此lnc-ca13基因对调节鸡下颌骨发育具有重要作用。
2、现阶段,尚未报道过关于如何有效增加鸡lnc-ca13基因的表达量的方案,由此在一定程度阻碍了该基因的功能研究。因此,开发一种能够有效增加鸡lnc-ca13基因表达量的方法,对鸡lnc-ca13基因的功能研究具有广泛的应用前景。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种过表达鸡lnc-ca13基因的生物材料及其应用,以解决上述现有技术存在的问题。将本专利技术提供的鸡lnc-ca13基因插入到慢病毒载体中能够有效增加鸡lnc-ca13基因的表
2、为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:
3、本专利技术提供了一种鸡lnc-ca13基因,所述鸡lnc-ca13基因的序列如seq id no.1所示。
4、本专利技术提供了一种过表达鸡lnc-ca13基因的重组载体,所述重组载体为在基础载体的多克隆位点插入鸡lnc-ca13基因;所述鸡lnc-ca13基因的序列如seq id no.1所示。
5、优选的,所述基础载体为慢病毒表达载体。
6、进一步优选的,所述慢病毒表达载体为gl159载体。
7、优选的,所述基础载体的多克隆位点为基础载体的agei酶切位点和ecori酶切位点。
8、本专利技术提供了上述的重组载体的构建方法,包括连接鸡lnc-ca13基因和基础载体的步骤。
9、进一步优选的,所述基础载体为慢病毒表达载体。
10、进一步优选的,所述慢病毒表达载体为gl159载体。
11、优选的,所述连接的反应体系为20μl,包括1μl鸡lnc-ca13基因、3μl基础载体、2μl10×t4 dnaligase buffer、1μlt4 dnaligase和余量的水。
12、本专利技术提供了一种含有上述的重组载体的重组菌。
13、优选的,所述重组菌的基础菌为大肠杆菌。
14、本专利技术提供了上述的鸡lnc-ca13基因、上述的重组载体或上述的重组菌在过表达鸡lnc-ca13基因中的应用。
15、本专利技术提供了上述的鸡lnc-ca13基因、上述的重组载体或上述的重组菌在制备过表达鸡lnc-ca13基因的产品中的应用。
16、本专利技术公开了以下技术效果:
17、将本专利技术提供的鸡lnc-ca13基因插入到慢病毒载体中,能够获得提高鸡lnc-ca13基因表达的生物材料(重组载体(慢病毒重组载体,lnc-ca13-4)和重组菌),该生物材料可有效提高鸡lnc-ca13基因的表达量,在基因水平的过表达效率为95.85%。将鸡lnc-ca13基因构建于慢病毒载体上,适用于体内及体外研究;同时,本专利技术对于深入研究鸡lnc-ca13基因的功能等方面具有重要的科学意义及应用前景。
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1.一种鸡lnc-CA13基因,其特征在于,所述鸡lnc-CA13基因的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种过表达鸡lnc-CA13基因的重组载体,其特征在于,所述重组载体为在基础载体的多克隆位点插入鸡lnc-CA13基因;所述鸡lnc-CA13基因的序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述基础载体为慢病毒表达载体。
4.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述基础载体的多克隆位点为基础载体的Age I酶切位点和EcoR I酶切位点。
5.权利要求2所述的重组载体的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括连接鸡lnc-CA13基因和基础载体的步骤。
6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述连接的反应体系为20μL,包括1μL鸡lnc-CA13基因、3μL基础载体、2μL 10×T4 DNA ligase Buffer、1μL T4 DNA ligase和余量的水。
7.一种含有权利要求2-4任一项所述的重组载体的重组菌。
8.根据
9.权利要求1所述的鸡lnc-CA13基因、权利要求2-4任一项所述的重组载体或权利要求7或8所述的重组菌在过表达鸡lnc-CA13基因中的应用。
10.权利要求1所述的鸡lnc-CA13基因、权利要求2-4任一项所述的重组载体或权利要求7或8所述的重组菌在制备过表达鸡lnc-CA13基因的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种鸡lnc-ca13基因,其特征在于,所述鸡lnc-ca13基因的序列如seq id no.1所示。
2.一种过表达鸡lnc-ca13基因的重组载体,其特征在于,所述重组载体为在基础载体的多克隆位点插入鸡lnc-ca13基因;所述鸡lnc-ca13基因的序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述基础载体为慢病毒表达载体。
4.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述基础载体的多克隆位点为基础载体的age i酶切位点和ecor i酶切位点。
5.权利要求2所述的重组载体的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括连接鸡lnc-ca13基因和基础载体的步骤。
6.根据权利要求5所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:石雷,武敏,陈辉,王德贺,陈一凡,郝二英,徐俊杰,李欣欣,吴星霖,范毅豪,
申请(专利权)人:河北农业大学,
类型:发明
国别省市:
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