【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制药，尤其涉及一种含有分子内佐剂的多表位融合蛋白及其在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗中的应用。
技术介绍
1、畜牧业关系国计民生，猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)是中国猪群中最常见的猪病原体，也是影响养猪业健康可持续发展的重大疾病。虽然已有数种疫苗应用十多年，但这些疫苗都不等程度的存在病毒变异快、肌注细胞/粘膜免疫水平低、潜在的ade等问题，无法满足需求。
2、针对prrsv的疫苗开发，不但需要应对高突变和潜在ade效应的影响，同时还需要考虑产业化应用的经济性。基于目前的技术和现状，亚单位疫苗因其不存在生物安全问题，蛋白明确，结构清晰，用量精确，不浪费动物免疫潜力，且可最大程度降低ade效应，成为研发的优选方向。这些疫苗在临床上可以诱导更强的细胞或体液免疫，激活th细胞反应和生发中心反应，并形成相关的记忆细胞，大大提高保护效率，为prrsv疫苗的开发提供了很好的借鉴。因此，亚单位疫苗研发这一技术路线必将成为解决现有prrsv疫苗问题的有效手段之一。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种含有分子内佐剂的多表位融合蛋白及其在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗中的应用，针对prrsv以gp5蛋白为核心，采用生信分析手段辅助蛋白设计，筛选表位、分子内佐剂及串联方式，获得的prrsv重组多表位融合蛋白再引入分子内佐剂以提高免疫水平，通过合理的截短、串联等来增强中和表位抗体水平，减少ade效应，且进一步强化体液免疫和细胞免疫。
2、为了实现上
3、本专利技术提供了一种prrsv重组多表位融合蛋白，包括prrsv重组多表位融合蛋白1、prrsv重组多表位融合蛋白2、prrsv重组多表位融合蛋白3、prrsv重组多表位融合蛋白4、prrsv重组多表位融合蛋白5或prrsv重组多表位融合蛋白6。
4、作为优选，所述prrsv重组多表位融合蛋白1的氨基酸序列如seq id no:1所示；所述prrsv重组多表位融合蛋白2的氨基酸序列如seq id no:2所示；所述prrsv重组多表位融合蛋白3的氨基酸序列如seq id no:3所示；所述prrsv重组多表位融合蛋白4的氨基酸序列如seq id no:4所示；所述prrsv重组多表位融合蛋白5的氨基酸序列如seq id no:5所示；所述prrsv重组多表位融合蛋白6的氨基酸序列如seq id no:6所示。
5、本专利技术提供了一种含有分子内佐剂的多表位融合蛋白，包括上述prrsv重组多表位融合蛋白以及分子内佐剂。
6、作为优选，所述分子内佐剂包括携带有pelb和tufisn的p22t载体、携带有pt8a和tufisn的p28t载体、携带有鞭毛蛋白cd0/1和鞭毛蛋白nd0/1的p28nd载体、携带有鼠源fc片段和tufisn的p28fcm载体、携带有猪源fc片段和tufisn的p28fcp载体、携带有ctb和tufisn的p28ctb载体、携带有t4-fd和tufisn的p28t4载体、携带有gcn4和tufisn的p28gcn载体以及携带有铁蛋白和tufisn的p28fe载体中的任意一种。
7、作为优选，所述pelb的氨基酸序列如seq id no:7所示；所述tufisn的氨基酸序列如seq id no:8所示；所述pt8a的氨基酸序列如seq id no:9所示；所述鞭毛蛋白cd0/1的氨基酸序列如seq id no:10所示；所述鞭毛蛋白nd0/1的氨基酸序列如seq id no:11所示；所述聚合肽t4-fd的氨基酸序列如seq id no:12所示；所述聚合肽gcn4的氨基酸序列如seqid no:13所示；所述ctb蛋白的氨基酸序列如seq id no:14所示；所述铁蛋白的氨基酸序列如seq id no:15所示；所述鼠源fc片段的氨基酸序列如seq id no:16所示；所述猪源fc片段的氨基酸序列如seq id no:17所示。
8、本专利技术还提供了所述含有分子内佐剂的多表位融合蛋白在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗中的应用。
9、本专利技术还提供了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒亚单位疫苗，包括所述含有分子内佐剂的多表位融合蛋白和药学上可接受的佐剂。
10、通过采用上述技术方案，本专利技术具有如下有益效果：
11、本专利技术技术方案中，针对prrsv以gp5蛋白为核心，采用生信分析手段辅助蛋白设计，筛选表位、分子内佐剂及串联方式，获得的prrsv重组多表位融合蛋白再引入分子内佐剂以提高免疫水平，通过合理的截短、串联等来增强中和表位抗体水平，减少ade效应，且进一步强化体液免疫和细胞免疫。增强了蛋白候选物的免疫原性，与传统亚单位疫苗相比具有更好的免疫原性。
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1.一种PRRSV重组多表位融合蛋白，其特征在于，包括PRRSV重组多表位融合蛋白1、PRRSV重组多表位融合蛋白2、PRRSV重组多表位融合蛋白3、PRRSV重组多表位融合蛋白4、PRRSV重组多表位融合蛋白5或PRRSV重组多表位融合蛋白6；
2.一种含有分子内佐剂的多表位融合蛋白，其特征在于，包括权利要求1所述PRRSV重组多表位融合蛋白以及分子内佐剂。
3.根据权利要求2所述的含有分子内佐剂的多表位融合蛋白，其特征在于，所述分子内佐剂包括携带有Pelb和Tufisn的p22T载体、携带有PT8A和Tufisn的p28T载体、携带有鞭毛蛋白CD0/1和鞭毛蛋白ND0/1的p28ND载体、携带有鼠源Fc片段和Tufisn的p28fcM载体、携带有猪源Fc片段和Tufisn的p28FcP载体、携带有CTB和Tufisn的p28cTB载体、携带有T4-Fd和Tufisn的p28T4载体、携带有GCN4和Tufisn的p28GCN载体以及携带有铁蛋白和Tufisn的p28Fe载体中的任意一种。
4.根据权利要求3所述的含有分子内佐剂的多表位融合蛋
5.权利要求2所述含有分子内佐剂的多表位融合蛋白在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗中的应用。
6.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒亚单位疫苗，其特征在于，包括权利要求2所述含有分子内佐剂的多表位融合蛋白和药学上可接受的佐剂。
...【技术特征摘要】
1.一种prrsv重组多表位融合蛋白，其特征在于，包括prrsv重组多表位融合蛋白1、prrsv重组多表位融合蛋白2、prrsv重组多表位融合蛋白3、prrsv重组多表位融合蛋白4、prrsv重组多表位融合蛋白5或prrsv重组多表位融合蛋白6；
2.一种含有分子内佐剂的多表位融合蛋白，其特征在于，包括权利要求1所述prrsv重组多表位融合蛋白以及分子内佐剂。
3.根据权利要求2所述的含有分子内佐剂的多表位融合蛋白，其特征在于，所述分子内佐剂包括携带有pelb和tufisn的p22t载体、携带有pt8a和tufisn的p28t载体、携带有鞭毛蛋白cd0/1和鞭毛蛋白nd0/1的p28nd载体、携带有鼠源fc片段和tufisn的p28fcm载体、携带有猪源fc片段和tufisn的p28fcp载体、携带有ctb和tufisn的p28ctb载体、携带有t4-fd和tufisn的p28t4载体、携带有gcn4和tufisn的p28gcn载体以及携带有铁蛋白和tufisn的p28fe载体中的任意一种。
4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：田克恭，王云龙，逄文强，李玉林，程蕾，王继创，石盼盼，钟雅静，
申请(专利权)人：河南省生物工程技术研究中心，
类型：发明
国别省市：
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