【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种聚球藻藻红蛋白血管紧张素转化酶抑制肽及其应用，属于生物活性肽。
技术介绍
1、随着经济社会的发展，高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病已成为我国发病率和死亡率占据首位的疾病，严重威胁居民身体健康。其中，高血压已成为当今世界死亡率较高的疾病之一，世界各国平均患病率在10％～12％，且人群分布较广。目前高血压及其并发症的威胁已严重影响人民的健康水平和生活质量。因此，高血压的防治可以最大限度降低心血管病的病残率和死亡率，具有重要的社会意义。在心血管疾病早期阶段，肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiolensin-aldosterone system，raas)对血压的慢性调节具有重要作用。血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme，ace)是该系统调节血压的关键酶，高活性的ace或者过量的ace会造成血管收缩和血压升高，因此，通过抑制ace的活性，能起到降低血压的效果，故ace成为治疗高血压、心力衰竭等疾病的理想靶点。目前国内外正式用于临床的ace抑制剂有20多种，大多是合成类药物，如替普罗肽、卡托普利等化学合成药物对高血压具有良好的治疗效果，但往往也具有一定的副作用，如蛋白尿、白细胞减少、皮疹、咳嗽、皮肤瘙痒、味觉紊乱或血压过低等。因此，寻找和开发安全性高且无毒副作用的高效降压药物替代品是十分必要的，而海洋生物来源的ace抑制肽以其温和、安全等特点成为近年高血压控制药物研究的热点。
2、目前已经有多种从海洋藻类中筛选出的具有ace抑制作用的多肽，例如中国专利文
3、聚球藻是一种广泛分布的单细胞海洋蓝藻，有多种适用于生物技术和食品工业应用的优良特征，富含蛋白质和其它活性组分，且未被发现分泌任何蓝藻毒素或具有相关的同源基因，其主要蛋白组分藻红蛋白具有抗氧化、抗肿瘤等多种功能，因此聚球藻可以作为活性肽的重要来源。目前，除公开号为cn113444145a的专利报道了序列为vty的聚球藻ace抑制肽之外，便再无序列清晰的聚球藻ace抑制肽。因此，聚球藻ace抑制肽依然有待进一步开发研究。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供一种聚球藻藻红蛋白血管紧张素转化酶抑制肽及其应用。
2、本专利技术的技术方案如下：
3、一种血管紧张素转化酶抑制肽，所述抑制肽的序列为ala-ser-tyr-phe(asyf)。
4、优选的，所述抑制肽对血管紧张素转化酶的半抑制浓度ic50值为15.46μg/ml。
5、优选的，所述抑制肽源自聚球藻藻红蛋白。
6、优选的，所述抑制肽具有血管紧张素转化酶抑制活性，可从海洋聚球藻藻红蛋白经酶解制备，也可以从其它蛋白经酶解制备，或经人工合成法制备。
7、上述血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法，包括如下步骤：
8、(1)收集聚球藻，加磷酸盐缓冲液混匀，藻液比0.03～0.05，单位g/ml，压力破碎后离心收集上清液；
9、(2)将步骤(1)得到的上清液通过deae sepharose fast flow层析柱，利用阴离子交换层析法纯化得到藻红蛋白溶液；
10、(3)将步骤(2)所得藻红蛋白溶液用透析袋透析，透析液离心去除杂质沉淀，取上清液，即为纯化的藻红蛋白溶液；
11、(4)向步骤(3)所得纯化的藻红蛋白溶液中加入胰凝乳蛋白酶，酶解3～5h后，沸水浴10～15min终止酶解，得酶解液；
12、(5)将步骤(4)所得酶解液离心收集上清液，经3kda超滤膜超滤，得到肽分子量<3kda的肽液；
13、(6)将步骤(5)所得肽液利用tsk gel g2000 swxl凝胶柱进一步分离纯化，超纯水作为洗脱液，流速0.5ml/min，洗脱体积30ml，并在220nm处测定吸光度，收集洗脱体积在20～22ml的组分，得到血管紧张素转化酶抑制肽。
14、优选的，步骤(3)所述透析袋的分子截留量为10kda，所述透析缓冲液为超纯水。
15、优选的，步骤(4)所述胰凝乳蛋白酶的酶活为≥40u/mg，添加量为聚球藻质量的2％～4％。
16、优选的，步骤(4)所述酶解的条件为：温度45～55℃，ph 7.0～8.0，转速130～170rpm。
17、优选的，步骤(1)、(3)和(5)所述离心为10000～15000rpm离心10～15min。
18、上述血管紧张素转化酶抑制肽在制备降血压产品和/或预防高血压产品和/或治疗高血压产品中的应用。
19、一种降血压产品和/或预防高血压产品和/或治疗高血压产品，包含上述血管紧张素转化酶抑制肽作为活性成分。
20、有益效果：
21、本专利技术提供了一种聚球藻藻红蛋白来源的新型血管紧张素转化酶抑制肽，其氨基酸序列为ala-ser-tyr-phe(asyf)，该结构新颖，分子量小，易被吸收并发挥作用，其对血管紧张素转化酶体外抑制ic50值为15.46μg/ml。
22、本专利技术的聚球藻藻红蛋白ace抑制肽(ala-ser-tyr-phe)在ace抑制剂和高血压治疗相关的药品和保健品方面有广泛的应用前景。
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1.一种血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽的序列为Ala-Ser-Tyr-Phe。
2.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽对血管紧张素转化酶的半抑制浓度IC50值为15.46μg/mL。
3.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽源自聚球藻藻红蛋白。
4.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽具有血管紧张素转化酶抑制活性，可从海洋聚球藻藻红蛋白经酶解制备，也可以从其它蛋白经酶解制备，或经人工合成法制备。
5.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述透析袋的分子截留量为10kDa，所述透析缓冲液为超纯水。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述胰凝乳蛋白酶的酶活为≥40U/mg，酶添加量为聚球藻质量的2％～4％，酶解条件为：温度45～55℃，pH 7.0～8.0，转速130～170rpm。
9.权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽在制备降血压产品和/或预防高血压产品和/或治疗高血压产品中的应用。
10.一种降血压产品和/或预防高血压产品和/或治疗高血压产品，包含权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽作为活性成分。
...【技术特征摘要】
1.一种血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽的序列为ala-ser-tyr-phe。
2.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽对血管紧张素转化酶的半抑制浓度ic50值为15.46μg/ml。
3.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽源自聚球藻藻红蛋白。
4.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于，所述抑制肽具有血管紧张素转化酶抑制活性，可从海洋聚球藻藻红蛋白经酶解制备，也可以从其它蛋白经酶解制备，或经人工合成法制备。
5.如权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张楠，李春阳，习京瑶，朱丽萍，颜世敢，
申请(专利权)人：齐鲁工业大学山东省科学院，
类型：发明
国别省市：
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