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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物,特别涉及一株青枯菌噬菌体及其在烟草青枯病防治中的应用。
技术介绍
1、由茄科雷尔氏菌(ralstonia pseudosolanacerum)侵染引起的烟草青枯病是烟草生产上的第一大细菌性病害,每年给我国烟草农业造成的经济损失达10亿元以上。烟草青枯病是典型的高温高湿病菌,在长江中下游流域的烤烟种植区,如湖南、湖北、重庆、江西、福建和安徽等地偏重发生;此外,在贵州和云南的旱地烟区也有较重发生。青枯病已经成为制约上述主产烟区烟草农业可持续发展的主要障碍因子之一。
2、烟草青枯病的防治极为困难。青枯病在土壤中越冬,侵染根系后并不立即发病,而是定殖于木质部导管内,经过长期的潜伏期后,当温度和湿度满足发病后即进入发病高峰期。由于从出现症状到烟株死亡的时间非常短,难以通过传统的化学防治或生物防治达到较好的防治效果,因此又被称为植物癌症。研究表明,土壤中青枯菌的种群数量与青枯病发病率和严重程度均呈正相关,降低土壤中青枯菌的种群数量可以显著减轻病害的发生。
3、青枯菌噬菌体是专性侵染青枯菌的病毒,具有侵染速度快、裂解时间短和对宿主特异性强等特点,可以在短时间内快速降低环境中青枯菌的种群数量且对非寄主生物无负面影响,所以青枯菌噬菌体被认为是有效防控青枯病的优质生防资源。
4、青枯菌的遗传变异频繁,泛基因组学研究结果表明,青枯菌的核心基因组仅占其基因总量的42.7%左右,超过50%的基因来源于dna水平转移或其他途径,从而易导致其逃避噬菌体的侵染与裂解。正因为如此,青枯菌噬菌体的挖掘与应用遵
技术实现思路
1、有鉴于此,本专利技术提供了一株青枯菌噬菌体及其在烟草青枯病防治中的应用,为生产中应用噬菌体制剂防控烟草青枯菌提供了噬菌体来源。
2、为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供以下技术方案:
3、本专利技术提供了噬菌体,名称为yl2,分类命名为ralstonia phage,于2024年10月23日保藏于中国典型培养物保藏中心,地址为:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内,中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:cctcc no: m 20242305。
4、上述噬菌体yl2为有尾噬菌体纲(caudoviricetes),短尾噬菌体属(gervaiseviru),具有多面体头部和短的尾部。
5、上述噬菌体yl2的全基因组序列长60,673 bp。
6、上述噬菌体yl2经60℃处理60 min,噬菌体效价仍保持在1010 pfu/ml以上,在ph 4~11的条件下,其效价仍保持在107 pfu/ml以上。
7、本专利技术还提供了上述噬菌体在裂解茄科雷尔氏菌(ralstoniapseudosolanacerum)中的应用。
8、本专利技术还提供了上述噬菌体在防治青枯病中的应用。
9、在本专利技术的一些具体实施方案中,上述应用所述青枯病为烟草青枯病。
10、本专利技术还提供了生防制剂,包括上述噬菌体,以及可接受的辅料或助剂。
11、在本专利技术的一些具体实施方案中,上述生防制剂所述噬菌体的效价为0.5×108pfu/ml~1.5×108 pfu/ml,可以是0.6×108 pfu/ml、0.7×108 pfu/ml、0.8×108 pfu/ml、0.9×108 pfu/ml、1×108 pfu/ml、1.1×108 pfu/ml、1.2×108 pfu/ml、1.3×108 pfu/ml或1.4×108 pfu/ml。
12、在本专利技术的一些具体实施方案中,上述生防制剂所述噬菌体的效价为108 pfu/ml。
13、本专利技术还提供了上述生防制剂在裂解茄科雷尔氏菌中的应用。
14、本专利技术还提供了上述生防制剂在防治青枯病中的应用。
15、在本专利技术的一些具体实施方案中,上述应用所述青枯病为烟草青枯病。
16、与现有技术相比,本专利技术的有益效果包括:
17、(1)本专利技术分离纯化了一株烟草青枯菌噬菌体yl2,该噬菌体对流行于湘西北烟区的青枯病菌具有较宽的裂解谱和较好的裂解活性,为利用噬菌体防治湘西北烟区的青枯病提供了优质的噬菌体来源;
18、(2)本专利技术提供的噬菌体yl2经60℃处理60 min,噬菌体效价仍保持在1010 pfu/ml以上,在ph 4~11的条件下,其效价仍保持在107 pfu/ml以上,因此该噬菌体具有较高的温度耐受性和较宽的酸碱稳定性,有利于其适应更广泛的环境条件;
19、(3)本专利技术直接将噬菌体yl2用于防治烟草青枯病,用灌根法进行施用,可显著降低发病率与病情指数,对烟草青枯病具有较好的防治效果。
20、生物保藏说明
21、生物材料:青枯菌噬菌体yl2,分类命名:ralstonia phage,于2024年10月23日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏中心地址为:中国.武汉.武汉大学;保藏编号为cctccno: m 20242305。
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1.噬菌体,其特征在于,保藏编号为CCTCC NO: M 20242305。
2.如权利要求1所述的噬菌体在裂解茄科雷尔氏菌(Ralstonia pseudosolanacerum)中的应用。
3.如权利要求1所述的噬菌体在防治青枯病中的应用。
4.如权利要求1所述的噬菌体在制备防治青枯病的生防制剂中的应用。
5.生防制剂,其特征在于,包括权利要求1所述的噬菌体,以及可接受的辅料或助剂。
6.如权利要求5所述的生防制剂,其特征在于,所述噬菌体的效价为0.5×108 PFU/ml~1.5×108 PFU/ml。
7.如权利要求6所述的生防制剂,其特征在于,所述噬菌体的效价为108 PFU/ml。
8.如权利要求5至7任一项所述的生防制剂在裂解茄科雷尔氏菌中的应用。
9.如权利要求5至7任一项所述的生防制剂在防治青枯病中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述青枯病为烟草青枯病。
【技术特征摘要】
1.噬菌体,其特征在于,保藏编号为cctcc no: m 20242305。
2.如权利要求1所述的噬菌体在裂解茄科雷尔氏菌(ralstonia pseudosolanacerum)中的应用。
3.如权利要求1所述的噬菌体在防治青枯病中的应用。
4.如权利要求1所述的噬菌体在制备防治青枯病的生防制剂中的应用。
5.生防制剂,其特征在于,包括权利要求1所述的噬菌体,以及可接受的辅料或助剂。
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【专利技术属性】
技术研发人员:易克,向东,何昊欣,叶惠源,胡心雨,邢云飞,谭格,杨磊,陈武,
申请(专利权)人:湖南中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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