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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及lncrnaefrl在制备诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品中应用、试剂盒和药物。
技术介绍
1、动脉粥样硬化(atherosclerosis,as)通常被认为是一种慢性炎症性疾病,病变从内膜开始,先后有脂质和复合糖类积聚、纤维组织增生和钙质沉着,并伴有动脉中层的逐渐退变,继发性病变尚有斑块内出血、斑块破裂及局部血栓形成。在正常情况下,巨噬细胞胞葬起到了十分重要的作用,专职性吞噬细胞对凋亡细胞能够有效清除,以防止炎症加剧和斑块不稳定性增加。当胞葬作用障碍时,凋亡细胞不能被及时清除而积聚,导致继发性坏死,坏死细胞、炎性介质及细胞毒性物质蓄积于内膜下,引发更强的炎症反应,促进斑块内坏死核扩大,恶性循环从而加剧粥样硬化斑块的不稳定性,增加心血管事件发生风险。
2、同型半胱氨酸(homocysteine,hcy)是一种含硫氨基酸,为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要中间产物,hcy已被确定为动脉粥样硬化的独立危险因素及预测指标。研究表明,血浆hcy水平升高时可通过改变巨噬细胞功能,减少巨噬细胞数目等方式导致更大的动脉粥样硬化斑块形成和更多的炎性细胞因子分泌。但hcy水平调控巨噬细胞胞葬作用参与as发生的机制仍不清楚。
3、长链非编码rna(long non-coding rna,lncrna)是一种长度大于200nt具有调节功能的rna。lncrna可以通过多种相互作用参与基因组组构、细胞结构和基因表达。这些相互作用包括染色质结构、转录调控、剪接、蛋白质翻译和定位等。lncrna在
技术实现思路
1、为解决现有技术中同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的早期诊断困难、标志物缺乏特异性及灵敏性的问题,本专利技术提供了lncrnaefrl在制备诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品中应用、试剂盒和药物。
2、为实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案。
3、本专利技术提供了lncrna efrl在制备诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品中应用。
4、其中,所述lncrna efrl的核苷酸序列如seq id no.1所示:gagaccacaaaatggctgccggcggcttcgtcacgtgacccctttgtgcctttcgggcccccgaactccgcgggacccaggtcgggcagatcctcacagcggaagaccggcagcggcttcgaggcgtccagcgcccgcgcccgaaacgacagtttactcatctcaggcgcagcagatacctctccgctctggggaaacggccccggccagcgggatcatggagaaccggagtttcggtctccactcgcctgccgctgccggggacttgggggcggagcgcaaagcccgccgtccgggccctgacaccagccgggagggtgggaggctgtgccgctccgcgcctcgctcactcgctctcttcaatacgccatggccaacatggcggacattaaaactccactgtgcgctcttcagccaaccccagccattccccacactgcatcgcgcagcgacgcgggcacgcgcggggggagcgcgggctcgagcgggcgccggcgcggcgcggcatggagcgcgcgtcccgccaacccccggcccgccggccgccggcctcgcccgcccgctccgcccggccgcctcgcttcccgccctgcgcggtgctcaagcgagggagcgacgagctcggcgcccgcgcgggccctgggaaggccggcgcgtagagcggctggga。lncrnaefrl简称为efrl。
5、本专利技术聚焦于lncrna efrl这一关键生物分子,研究发现,在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化中,lncrnaefrl的表达水平会发生特异性且显著的变化。通过先进的分子生物学技术,我们能够检测生物样本(如血液、组织液等)中lncrnaefrl的含量。基于此,本专利技术提供了lncrnaefrl用于制备诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品,利用实时荧光定量pcr技术,能够在短时间内对样本中的lncrna efrl进行精确量化。与传统检测方法相比,这种基于lncrnaefrl的检测手段具有更高的灵敏度和特异性,解决了现有技术中同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的早期诊断困难、标志物缺乏特异性及灵敏性的问题。并且,该技术操作简便,无需复杂的样本预处理,大大缩短了检测时间,助力提高同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的早期诊断水平。
6、优选地,所述产品包括试剂盒或药物。用以检测所述lncrna eflr表达量以及下游靶基因spast的表达量,从而实现对hcy致as的早期、高灵敏度、高特异性诊断。
7、本专利技术还提供了一种以所述lncrna efrl作为标记物诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的试剂盒,所述试剂盒包括用于检测所述lncrna eflr表达量的特异性引物对;所述用于检测所述lncrnaefrl表达量的特异性引物对的上下游碱基序列分别如seq id no.2和seq id no.3所示。
8、优选地,还包括锁核苷酸lna gapmers。
9、优选地,还包括助转染试剂。
10、所述助转染试剂为lipofectamine 2000。
11、优选地,还包括针对内参基因定量的通用引物对。
12、所述的内参基因为gapdh基因。
13、优选地,针对所述内参基因定量的通用引物对的上下游碱基序列分别如seq idno.4和seq id no.5所示。
14、优选地,所述药物在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化早期诊断或检测中调控下游靶基因spast的表达。
15、本专利技术还提供了一种治疗同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的药物,所述药物包括如下中的任意一种或多种:
16、所述lncrnaefrl。
17、含有所述lncrnaefrl的编码基因的重组载体。
18、含有所述lncrnaefrl的编码基因的重组病毒。
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【技术保护点】
1.LncRNAEFRL在制备诊断和/或治疗同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品中应用,其特征在于,所述LncRNAEFRL的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述产品包括试剂盒或药物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述药物用于在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化早期诊断或检测中调控下游靶基因SPAST的表达。
4.一种治疗同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的药物,其特征在于,所述药物包括如下中的任意一种或多种:
5.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述药物还包括药学上可接受的载体;
6.一种以LncRNAEFRL作为标记物诊断同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于检测权利要求1所述的LncRNA EFRL表达量的特异性引物对;用于检测所述LncRNAEFRL表达量的特异性引物对的上下游碱基序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,还包括锁核苷酸LNA GapmeRs
8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,还包括助转染试剂;
9.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,还包括针对内参基因定量的通用引物对;
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,针对所述内参基因定量的通用引物对的上下游碱基序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。
...【技术特征摘要】
1.lncrnaefrl在制备诊断和/或治疗同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的产品中应用,其特征在于,所述lncrnaefrl的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述产品包括试剂盒或药物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述药物用于在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化早期诊断或检测中调控下游靶基因spast的表达。
4.一种治疗同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的药物,其特征在于,所述药物包括如下中的任意一种或多种:
5.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述药物还包括药学上可接受的载体;
6.一种以lncrnaefrl作为标记物诊断同型半胱氨酸致动脉粥样...
【专利技术属性】
技术研发人员:姜怡邓,杨佳琪,马芳,张正皓,夏童童,刘虹麟,
申请(专利权)人:宁夏医科大学,
类型:发明
国别省市:
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