【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌(streptococcus thermophilus)菌株。这些菌株在蔗糖调节子的一个或多个基因中携带一个或多个突变，并且任选地携带影响葡萄糖转运蛋白(非pts葡萄糖通透酶)，例如影响glcu和/或其表达的一个或多个进一步突变。本专利技术的这些菌株可以进一步在编码甘露糖-葡萄糖特异性pts蛋白质和葡萄糖激酶、甘露糖-葡萄糖特异性pts蛋白质和分解代谢物控制蛋白a(ccpa)、和/或甘露糖-葡萄糖特异性pts蛋白质、葡萄糖激酶和ccpa的基因中携带突变。当本专利技术的这些菌株发酵含有任何蔗糖的奶时，这些菌株可以在不消耗该蔗糖的情况下做到这一点，从而降低了对添加蔗糖的需求，或者在需要添加减少量的蔗糖的情况下，同时仍然从蔗糖中获得预期的甜味水平。任选地，本专利技术的这些菌株提供低乳糖发酵奶和/或在发酵温度下储存时未经历后酸化的发酵奶。本专利技术还涉及包含本专利技术的至少一种乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株的组合物，以及此菌株或组合物用以制造发酵乳产品的用途。
技术介绍
1、食品行业使用细菌来改进食物产品或饲料产品的口味和质地。在乳品工业中，常使用乳酸细菌来例如引起奶的酸化(通过乳糖发酵)，并且改变这些乳酸细菌所掺入的产品的质地。例如，属于物种嗜热链球菌(s.thermophilus)的乳酸细菌单独地或与其他细菌组合地广泛用于制造新鲜发酵乳产品(如奶酪或酸奶)。
2、乳品技术中使用乳酸细菌的难题之一是后酸化，即在获得目标ph(技术所需的ph)后[终止发酵]乳酸细菌产生乳酸。因此，后
3、乳品工业中的另一个难题是在发酵期间培养物可能会消耗任何添加的或已经存在的蔗糖。为了获得预期的发酵产品的甜味，有必要在发酵之前、期间或结束时将蔗糖添加到奶中。乳品工业中的另一个难题是在发酵期间培养物可能会消耗任何添加的蔗糖。因此，为了达到预期的甜味，可能需要将过量的蔗糖添加到该奶中。此外，可以设想通过释放部分或全部由培养物的乳糖水解产生的葡萄糖部分甚至更多地减少添加的蔗糖的量。
4、此外，乳品消费者有使用乳糖含量减少或较低的发酵产品(乳糖不耐症)的趋势。
5、因此，需要改进生产发酵乳产品的方法，由改进的方法所生产的发酵乳产品使制造商和消费者都满意，不经历后酸化，对添加蔗糖的需求降低，并且乳糖含量减少。
技术实现思路
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1.一种乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)菌株，其携带选自由以下组成的组的一个或多个突变：
2.根据权利要求1所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株是葡萄糖阳性的或葡萄糖上生长缓慢的菌株。
3.根据权利要求1或2所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在蔗糖调节子的scrA和scrB基因中的一个或多个基因中具有一个或多个突变。
4.根据权利要求3所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述蔗糖调节子的一个或多个基因中的突变在scrA基因中实际上破坏了基因功能，例如导致编码EIIABC蔗糖蛋白质的基因的可读框移码的插入或缺失，使得翻译出由scrA基因编码的截短的EIIABC蔗糖蛋白质，例如通过在scrA基因的可读框(ORF)中插入或缺失核苷酸，如在对应于SEQ ID NO:212的第133位的核苷酸处或周围插入或缺失核苷酸的突变。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在调节scrA、scrB和/或scrR基因中任一种的表达的启
6.根据权利要求5所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述突变是scrA和/或scrB基因的启动子区中的SNP，例如scrB基因的启动子区中的SNP，例如启动子的-10和-35序列附近的突变，例如对应于scrB启动子上游的SEQ ID NO:213的第38位的T至G的突变，例如将包含由SEQ ID NO:213鉴定的完整序列或与其具有至少约90％，如至少约95％同一性的变体序列的突变(pscrB829)。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株具有影响葡萄糖转运蛋白的突变，当所述菌株在作为唯一碳水化合物来源的葡萄糖上生长时，所述突变恢复或改善所述菌株的葡萄糖消耗，例如与乳糖阳性和蔗糖阳性的嗜热链球菌亲本菌株相比，所述菌株在葡萄糖上的生长完全恢复。
8.根据权利要求7所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述影响葡萄糖转运蛋白的突变影响glcU和/或其表达，例如位于glcU的启动子区内的突变，例如选自以下的突变
9.根据权利要求1-8中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步包含选自以下的一个或多个突变：
10.根据权利要求1-9中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株是半乳糖阴性的菌株，例如通过glcK基因和/或ccpA基因中的突变任选地与编码甘露糖-葡萄糖特异性PTS的蛋白质的基因之一中的突变组合。
11.根据权利要求9-10所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在编码葡萄糖激酶的glcK基因中具有突变，所述突变使所述菌株中的葡萄糖激酶活性被显著降低但不为零。
12.根据权利要求9-11中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述突变的glcK基因编码选自由以下组成的组的葡萄糖激酶：
13.根据权利要求9-12中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述突变的glcK基因编码葡萄糖激酶，其序列选自由以下组成的组：
14.根据权利要求1-13中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步在ccpA基因中携带突变。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步在编码甘露糖-葡萄糖特异性PTS蛋白质的基因中携带突变，例如选自由manL基因、manM基因和manN基因组成的组的基因中的突变。
16.根据权利要求14或15所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述ccpA基因携带选自由以下组成的组的突变：位于所述ccpA基因的编码序列的第1个核苷酸与第270个核苷酸之间的无义突变，和位于所述ccpA基因的编码序列的前四分之一处导致所述ccpA基因的可读框移码的突变。
17.根据权利要求16所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述突变的ccpA基因的序列选自由以下组成的组：
18.根据权利要求1-17中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中当所述菌株能够在24小时的发酵期间如实例5中所描述发酵奶时：
19.根据权利要求1-18中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中与没有所述一个或多个突变的亲本菌株相比，所述菌株具有过量消耗乳糖的能力，例如其中发酵甜奶时，如根据实例6中所描述和测定的乳糖的剩余量低于100mM，例如低于90mM、80mM、70mM、60mM、50mM、40mM、3...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌(streptococcus thermophilus)菌株，其携带选自由以下组成的组的一个或多个突变：
2.根据权利要求1所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株是葡萄糖阳性的或葡萄糖上生长缓慢的菌株。
3.根据权利要求1或2所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在蔗糖调节子的scra和scrb基因中的一个或多个基因中具有一个或多个突变。
4.根据权利要求3所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述蔗糖调节子的一个或多个基因中的突变在scra基因中实际上破坏了基因功能，例如导致编码eiiabc蔗糖蛋白质的基因的可读框移码的插入或缺失，使得翻译出由scra基因编码的截短的eiiabc蔗糖蛋白质，例如通过在scra基因的可读框(orf)中插入或缺失核苷酸，如在对应于seq id no:212的第133位的核苷酸处或周围插入或缺失核苷酸的突变。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在调节scra、scrb和/或scrr基因中任一种的表达的启动子区中具有突变。
6.根据权利要求5所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述突变是scra和/或scrb基因的启动子区中的snp，例如scrb基因的启动子区中的snp，例如启动子的-10和-35序列附近的突变，例如对应于scrb启动子上游的seq id no:213的第38位的t至g的突变，例如将包含由seq id no:213鉴定的完整序列或与其具有至少约90％，如至少约95％同一性的变体序列的突变(pscrb829)。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株具有影响葡萄糖转运蛋白的突变，当所述菌株在作为唯一碳水化合物来源的葡萄糖上生长时，所述突变恢复或改善所述菌株的葡萄糖消耗，例如与乳糖阳性和蔗糖阳性的嗜热链球菌亲本菌株相比，所述菌株在葡萄糖上的生长完全恢复。
8.根据权利要求7所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述影响葡萄糖转运蛋白的突变影响glcu和/或其表达，例如位于glcu的启动子区内的突变，例如选自以下的突变
9.根据权利要求1-8中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步包含选自以下的一个或多个突变：
10.根据权利要求1-9中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株是半乳糖阴性的菌株，例如通过glck基因和/或ccpa基因中的突变任选地与编码甘露糖-葡萄糖特异性pts的蛋白质的基因之一中的突变组合。
11.根据权利要求9-10所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，所述菌株在编码葡萄糖激酶的glck基因中具有突变，所述突变使所述菌株中的葡萄糖激酶活性被显著降低但不为零。
12.根据权利要求9-11中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述突变的glck基因编码选自由以下组成的组的葡萄糖激酶：
13.根据权利要求9-12中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述突变的glck基因编码葡萄糖激酶，其序列选自由以下组成的组：
14.根据权利要求1-13中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步在ccpa基因中携带突变。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其进一步在编码甘露糖-葡萄糖特异性pts蛋白质的基因中携带突变，例如选自由manl基因、manm基因和mann基因组成的组的基因中的突变。
16.根据权利要求14或15所述的乳糖阳性蔗糖阴性的嗜热链球菌菌株，其中所述ccpa基因携带选自由以下组成的组的突变：位于所述ccpa基因的编码序列的第1个核苷酸与第270个核苷酸之间...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·科许布拉谢尔，E·吉鲁，C·弗雷莫斯，AC·库特蒙瓦辛，
申请(专利权)人：国际营养与健康丹麦有限公司，
类型：发明
国别省市：
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