【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程，具体涉及两种双靶点纳米抗真菌肽及其制备方法和应用。
技术介绍
1、抗菌肽(amps)作为宿主自身防御系统的首要组成部分，广泛分布于动物、植物和微生物等，被认为是最有潜力的抗生素替代物之一。膜活性抗菌肽(amp)选择性地破坏微生物膜的完整结构，被认为是应对多重耐药致病真菌的新一代抗生素。准确理解膜活性药物与生物膜组分之间的相互作用对于揭示其分子机制并优化其靶向特异性至关重要，并且也是减少潜在副作用的先决条件。麦角固醇是真菌(包括霉菌和酵母)细胞膜中的关键固醇成分。真菌细胞膜中麦角固醇水平的降低容易导致其细胞膜受损甚至死亡，因此大多数抗真菌药物都是针对参与麦角固醇生物合成途径的关键酶。双靶点药物设计被认为是一种更有效的策略，可以在疾病系统中发挥与联合用药相似的协同抑制优势，从而达到“1+1>”的治疗效果。以此开发新型抗真菌肽和化合物的构建，有望提高抗真菌肽的药效、降低毒性并减少耐药性。
技术实现思路
1、基于以上
技术介绍
的问题，本专利技术的目的在于提供两种双靶点抗真菌肽，能够在超纯水中自组装成纳米颗粒，在生理环境中对新生隐球菌及禾谷镰孢菌具有良好的杀灭效果。此外，本专利技术的抗真菌肽可以有效破坏真菌细胞膜结构，杀灭真菌。
2、本专利技术所采用的技术方案如下：两种双靶点纳米抗真菌肽nlr-2、nlr-3，其氨基酸序列如seq id no.1所示，其n端与3-(1-萘基)丙烯酸的羧基连接。
3、本专利技术的另一目的是提供两种双靶点纳米抗
4、步骤s1：采用七肽重复序列模板(lkairrr)n(n＝2，3)作为疏水支架提供疏水作用力；
5、步骤s2：选择3-(1-萘基)丙烯酸与之相连接，构建多肽；
6、步骤s3：利用固相化学合成和质谱鉴定，完成多肽的制备，再对多肽的纳米形态表征、体外细胞毒性、溶血活性、杀菌活性进行测定，最后命名为抗菌肽nlr-2、nlr-3；
7、进一步的，如上所述的两种双靶点纳米抗真菌肽nlr-2、nlr-3的自组装方法如下：浓度为64μm，37℃孵育24小时能够自组装成纳米结构。
8、本专利技术的另一目的是提供以上所述的双靶点纳米抗真菌肽nlr-2、nlr-3在预防由禾谷镰孢菌引起的玉米霉变的应用。
9、本专利技术的有益效果及优点：本专利技术的双靶点纳米抗真菌肽nlr-2、nlr-3在生理环境中形成纳米颗粒，更有利于破坏真菌细胞膜。在生理条件下具备直接杀菌活性，对新生隐球菌和禾谷镰孢菌具有很好的杀灭效果。综上所述，nlr-2、nlr-3是具有较高应用价值的自组装抗真菌肽。
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1.两种双靶点纳米抗真菌肽NLR-2、NLR-3，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其N端与3-(1-萘基)丙烯酸的羧基连接，以对应真菌膜上麦角甾醇两种关键酶(SE/CYP51)为靶向。
2.根据权利要求1所述的两种双靶点抗真菌肽NLR-2、NLR-3的制备方法，其特征在于，步骤如下：
3.根据权利要求1所述的两种双靶点抗真菌肽NLR-2、NLR-3的自组装方法，其特征在于：浓度为64μM，37℃孵育24小时能够自组装成纳米结构。
4.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：在生理条件下，对新型隐球菌以及禾谷镰孢菌具有杀灭效果。
【技术特征摘要】
1.两种双靶点纳米抗真菌肽nlr-2、nlr-3，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.1所示，其n端与3-(1-萘基)丙烯酸的羧基连接，以对应真菌膜上麦角甾醇两种关键酶(se/cyp51)为靶向。
2.根据权利要求1所述的两种双靶点抗真菌肽nlr-2、nlr-3的制备方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：王家俊，邢珺雅，要雨婷，李湘，宋静，单安山，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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